Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов методом Tunel - тест на выявление повреждений ДНК в сперматозоидах, путем мечения 3'-гидроксильных концов в двухцепочечных разрывах ДНК, образующихся во время апоптоза
Анализ помогает в оценке фертильной функции и выявить причины бесплодия и спонтанных абортов.

Для выявления повреждений нуклеиновых цепочек используется оптический эффект. Образец спермы смешивается с энзимом, маркированные нуклеотиды которого встраиваются в поврежденные сегменты цепочек. Поврежденные сперматозоиды приобретают окраску или подсвечиваются, после чего их можно подсчитать и вычислить индекс фрагментации - процент поврежденных клеток по отношению к общему количеству. Референсное значение для tunel-теста составляет 15%;

Гипотеза фрагментации ДНК
Генетическая предрасположенность Возраст
Заболевания Лейкоцитоспермия Варикоцеле
Рак
медикаменты
Образ жизни Внешние токсиканты (ксенобиотики) Профессион. факторы и стиль жизни
Абортивный апоптоз
Дефектное ремоделирование хроматина
Атака АФК (окислительный стресс)
Повреждение ДНК
сперм-ов

Показания
при мужском бесплодии
если попытки искусственного оплодотворения не дали результата;
повторяющиеся выкидыши;
если эмбрион плохого качества;
мужчинам в возрасте от 45 лет;
после криохранения образца спермы перед ЭКО
при варикозе сосудов семенного канатика;
если в течение трех месяцев имела место повышенная температура тела.

Подготовка
Воздержаться от половых контактов в течение 2-7 дней
Приема лекарственных средств
Посещение сауны, бани
Эякулят собирается путём мастурбации в стерильный пластиковый контейнер. Не допускается использование презерватива
.
анализ должен быть проведен в течение часа с момента забора образца. Затем в эякулят добавляет реактив. Он, вступая в реакцию с семенной жидкостью, заполняет разрывы ДНК флуоресцирующим нуклеотидом, делая видимыми фрагментированные сперматозоиды.

Расшифровка результатов
низкая степень фрагментации ДНК сперматозоидов (15–30%) — зачатие возможно, хотя и затруднено;
фрагментация ДНК сперматозоидов повышена незначительно и составляет 30–50% — естественное зачатие маловероятно, но хорошие результаты прогнозируются для ЭКО;
50–60% — возможно только искусственное зачатие с невысокой степенью вероятности;
более 60% — зачатие при помощи собственного семенного материала маловероятно.