МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Микробиология — наука о живых организмах, невидимых невооруженным глазом (микроорганизмах)
К микроорганизмам относятся: бактерии
грибы
простейшие
вирусы
Раздел микробиологии, изучающий бактерии, называется бактериология

Правила работы в бактериологической лаборатории:
форма одежды сотрудников лаборатории (медицинские халаты, шапочки, сменная обувь, маска из марли). Работа с особо опасными микроорганизмами проводится в специально оборудованных лабораториях особо опасных инфекций (ООИ),
в лаборатории запрещается принимать пищу и курить,
рабочее место должно быть в порядке (личные вещи хранить в специально отведённых местах),
при случайном попадании инфицированного материала на стол, пол и другие поверхности это место необходимо тщательно обработать дезинфицирующим раствором,
хранение, наблюдение за культурами микроорганизмов и их уничтожение проводится согласно специальным инструкциям,
по окончании работы руки следует тщательно вымыть, рабочее место и помещение тщательно продезинфицировать.

Методы диагностики бактериальных инфекций
Микроскопический
окраска бактериальными красителями
окраска люминесцирующими красителями
Бактериологический
(выделение и изучение чистой культуры)
Биологический
(заражение чувствительных лабораторных животных)
Серологический
(обнаружение АТ в сыворотке больного)
Метод кожно-аллергических проб
Молекулярно-генетический
(ПЦР, ДНК-гибридизация)

Микроскопия
Для обнаружения возбудителя в исследуемом материале – микроскопический метод диагностики
Для идентификации возбудителя – часть бактериологического метода
исследование в живом состоянии
исследование окрашенных препаратов
фазово-контраст-
ная микро-
скопия
темно-польная микро-скопия
исследование в живом состоянии
исследование окрашенных препаратов
фазово-контраст-
ная микро-
скопия
темно-польная микро-скопия
иммер-сионная микро-скопия
люминес-центная микро-скопия
иммер-сионная микро-скопия

Микроскопический метод
Для изучения окрашенных бактериальных препаратов используют
световой иммерсионный микроскоп

Методика приготовления препарата из бактерий (мазка)
Обезжирить предметное стекло: натереть сухим мылом, затем снять его марлевой салфеткой. В центр стекла (на обезжиренную поверхность) стеклянной палочкой нанести каплю физиологического раствора.
Прокаленной в пламени спиртовки и остуженной бактериологической петлей забрать бактериальную массу (очень немного, менее булавочной головки).
Приготовить равномерную взвесь бактериальной массы в капле физ. раствора и растереть её тонким слоем 15-20 мм в диаметре, высушить на воздухе.
Зафиксировать – провести предметное стекло (мазком кверху) через пламя спиртовки 3-4 раза так, чтобы слегка обжигало тыл руки. При фиксации бактерии погибают, поэтому в окрашенных препаратах (мазках) бактерии изучают в неживом состоянии!!!

Методы окраски бактерий:
простые
(используют один краситель),
сложные
(используют 2 и более красителей, нанося их на мазок в определённой последовательности)
Перед микроскопией на препарат наносят каплю иммерсионного масла, в которую опускают объектив

Бактериальные красители
Основные (щелочные):
красные: сафранин, основной фуксин;
фиолетовые: генцианвиолет, кристаллвиолет, метилвиолет;
синие: метиленовый синий;
зеленые: малахитовая зелень;
коричневые: везувин, хризоидин;
2. Кислые:
красные: кислый фуксин, эозин;
желтые: пикриновая кислота

Морфологическая классификация бактерий

Стафилококк
(окраска генцианвиолетом)

Стафилококк
(окраска генцианвиолетом)

Стрептококк
(окраска генцианвиолетом)

Стрептококк
окраска
генцианвиолетом
окраска
метиленовым синим

Тетракокк
(окраска генцианвиолетом)

Крупная палочка
(окраска генцианвиолетом)