06 __________

Содержание

Слайд 2

Генетический код Перевод (translation) с языка нуклеотидов на язык аминокислот

Генетический код

Перевод (translation) с языка нуклеотидов на язык аминокислот

Слайд 3

Генетический код Стартовые кодоны: AUG(GUG, UUG) Met Стоп-кодоны: UAA, UAG, UGA Генетический

Генетический код

Стартовые кодоны: AUG(GUG, UUG) Met Стоп-кодоны: UAA, UAG, UGA

Генетический код:
- непрерывный (нет

пробелов и «накладок») - вырожденный (1 аминокислота может кодироваться несколькими кодонами)
- однозначный (один кодон – не более одной аминокислоты) - триплетный
Слайд 4

тРНК – молекула-адаптер для аминокислот Aminoacid acceptor end (CCA) T loop D

тРНК – молекула-адаптер для аминокислот

Aminoacid acceptor end (CCA)

T loop

D loop

Anticodon loop

Anticodon

Aminoacid acceptor

end (CCA)

T loop

D loop

Anticodon loop

Слайд 5

Неоднозначные пары оснований (wobble pair)

Неоднозначные пары оснований (wobble pair)

Слайд 6

Как к тРНК присоединяется нужная аминокислота? Аминокислота Белок Узнавание тРНК Аминоацил-тРНКсинтетаза определяет соответствие аминокислоты и тРНК

Как к тРНК присоединяется нужная аминокислота?

Аминокислота

Белок

Узнавание тРНК

Аминоацил-тРНКсинтетаза определяет соответствие аминокислоты и

тРНК
Слайд 7

Механизм аминоацилирования тРНК

Механизм аминоацилирования тРНК

Слайд 8

Редактирующая активность аминоацилил-тРНК синтетаз ! Частота ошибок аминоацил-тРНКсинтетаз не превышает 1:104-1:105 –

Редактирующая активность аминоацилил-тРНК синтетаз

! Частота ошибок аминоацил-тРНКсинтетаз не превышает 1:104-1:105 –

«суперспецифичность»

ES – editing site

Слайд 9

Структура бактериальной рибосомы Small subunit Large subunit Head Platform Body Decoding center

Структура бактериальной рибосомы

Small subunit

Large subunit

Head

Platform

Body

Decoding center

A P E

Central protuberance

GTPase center

L7/L12

L1

PTC center

Слайд 10

Строение бактериальной мРНК

Строение бактериальной мРНК

Слайд 11

Инициация трансляции у бактерий мРНК связывается с малой субъединицей при помощи последовательности

Инициация трансляции у бактерий

мРНК связывается с малой субъединицей при помощи последовательности

Шайн-Дальгарно и инициаторной тРНК. Затем присоединяются другие факторы инициации, и затем - большая субъединица рибосомы.
Слайд 12

Функциональная роль факторов инициации

Функциональная роль факторов инициации

Слайд 13

Цикл элонгации трансляции

Цикл элонгации трансляции

Слайд 14

EF-Tu приносит аминоацил-тРНК EF-Tu*GDP EF-Tu*GTP*aa-tRNA

EF-Tu приносит аминоацил-тРНК

EF-Tu*GDP

EF-Tu*GTP*aa-tRNA

Слайд 15

EF-Tu: цикл работы

EF-Tu: цикл работы

Слайд 16

Пептидилтрансферазная реакция P-site A-site P-site A-site N-формилметионин Пролин

Пептидилтрансферазная реакция

P-site

A-site

P-site

A-site

N-формилметионин

Пролин

Слайд 17

Транслокация состоит из нескольких последовательных стадий

Транслокация состоит из нескольких последовательных стадий

Слайд 18

Структурное сходство между катализатором транслокации – EF-G*GTP и aa-тРНК*EF-Tu*GTP

Структурное сходство между катализатором транслокации – EF-G*GTP и aa-тРНК*EF-Tu*GTP

Слайд 19

Терминация трансляции RF1 и RF2 узнают стоп-кодоны и отсоединяют пептид от тРНК

Терминация трансляции RF1 и RF2 узнают стоп-кодоны и отсоединяют пептид от тРНК

Слайд 20

Терминация трансляции RF3 необходим для вытеснения RF1 или RF2

Терминация трансляции RF3 необходим для вытеснения RF1 или RF2

Слайд 21

Терминация трансляции RRF нужен для разборки рибосомы

Терминация трансляции RRF нужен для разборки рибосомы

Слайд 22

Трансляция у эукариот устройство мРНК Кэп Только один цистрон («рамка считывания») поли-А

Трансляция у эукариот устройство мРНК

Кэп

Только один цистрон («рамка считывания»)

поли-А

Бактериальная мРНК

Эукариотическая мРНК

Последовательность Козак:

(gcc)gccRccAUGG, где R = A или G

Полицистронная мРНК

ORF – Open Reading Frame

Слайд 23

Инициация трансляции у эукариот: мРНК

Инициация трансляции у эукариот: мРНК

Слайд 24

«Циклическая» мРНК у эукариот

«Циклическая» мРНК у эукариот

Слайд 25

Инициация трансляции у эукариот: малая субъединица рибосомы

Инициация трансляции у эукариот: малая субъединица рибосомы

Слайд 26

Инициация трансляции у эукариот: сканирование мРНК в поисках AUG-кодона

Инициация трансляции у эукариот: сканирование мРНК в поисках AUG-кодона

Слайд 27

Инициация трансляции у эукариот: сканирование мРНК в поисках AUG-кодона

Инициация трансляции у эукариот: сканирование мРНК в поисках AUG-кодона

Слайд 28

Инициация трансляции у эукариот: присоединение большой субъединицы

Инициация трансляции у эукариот: присоединение большой субъединицы

Слайд 29

Элонгация трансляции у эукариот

Элонгация трансляции у эукариот

Слайд 30

Терминация трансляции у эукариот

Терминация трансляции у эукариот

Слайд 31

Альтернативный вариант инициации трансляции: IRES-элементы (internal ribosome entry site) IRES element Обычная

Альтернативный вариант инициации трансляции: IRES-элементы (internal ribosome entry site)

IRES element

Обычная

мРНК

Нет кэпа (не требуется для инициации), Нет сканирования, Трансляция начинается не с первого AUG-кодона

мРНК, содержащая IRES (например, вирусная)

IRES – Internal Ribosome Entry Site

Слайд 32

Альтернативный вариант инициации трансляции: IRES-элементы (internal ribosome entry site) Для поиска IRES-элементов

Альтернативный вариант инициации трансляции: IRES-элементы (internal ribosome entry site)

Для поиска IRES-элементов

можно использовать бицистронные конструкции с двумя различными репортёрными белками