Особенности физиологии лабораторных животных. Основные манипуляции

ОБЩИЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ ПРИЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
фиксация животных
проведение инъекций
проведение наркоза
измерение температуры тела
регистрация дыхания и легочной вентиляции

ФИКСАЦИЯ ЖИВОТНЫХ

Фиксация лягушек
Для чего проводят?
введение растворов в спинной лимфатический мешок
разрушение спинного и головного мозга
декапитация
Препаровальный набор для опытов на лягушке:
1 – ножницы большие, 2 – ножницы малые, 3 – скальпель,
4 – игла, 5 – тонкий крючок, 6 – лигатурный крючок,
7 – стеклянный крючок, 8 – пинцет анатомический,
9 – зажим Пеана, 10 – зажим Диффенбаха

Лимфатические мешки лягушки. I — сверху; II — снизу (по Брэму). Пунктирные полоски означают кожные перегородки между лимфатическими мешками
Для введения раствора в спинной лимфатический мешок необходимо:
задние конечности лягушки зажать левой рукой (ограничить движения в тазобедренных и коленных суставах, спина лягушки должна быть обращена к экспериментатору);
иглу шприца, находящегося в правой руке, ввести* под кожу спины и, убедившись, что кончик иглы легко подвижен, ввести раствор.
*Прокол лучше делать ближе к голове. В противном случае, после того как лягушка примет свою нормальную позу, раствор начнет вытекать через прокол.
Введение растворов в спинной лимфатический мешок

Разрушение спинного и головного мозга
Как провести:
лягушку взять в левую руку спиной вверх, так чтобы большой палец лежал на ее спине;
положив указательный палец на верхнюю челюсть лягушки, наклонить ее голову вниз;
через затылочную ямку ввести иглу в полость черепа и разрушить головной мозг;
затем, повернув иглу в направлении позвоночника, ввести ее в спинномозговой канал и разрушить спинной мозг несколькими поворотами иглы.
Например, бескровным методом лягушку обездвиживают с целью дальнейшего приготовления препарата брыжейки лягушки

Декапитация
Как выполнить декапитацию:
взять лягушку в левую руку, а правой ввести как можно глубже нижнее лезвие ножниц в рот под заднюю часть верхней челюсти за глаза;
быстрым движением отрезать верхнюю челюсть на уровне заднего конца барабанных перепонок (нижнюю челюсть сохраняют);
в отверстие мозгового канала ввести препаровальную иглу и разрушить спинной мозг.
Декапитацию используют там, где необходима сохранность спинного мозга (при оценке влияния желчи на скорость двигательного рефлекса; при анализе рефлекторной дуги).

Фиксация крыс
1. При некоторых манипуляциях достаточно бывает взять его за кожу в области спины, а большим и указательным пальцами, удерживая крысу с боков, выдвинуть передние конечности кпереди.
2. Успокаивают животное поглаживанием, затем помощник (можно и без него) правой рукой берет крысу за кожу в области затылка и фиксирует этим голову и передние конечности, а левой рукой удерживает задние конечности и хвост. После этого животному придают нужное положение.

3. Для фиксации крыс предложен ряд специальных приспособлений – гильзы из проволочной сетки, цилиндры (рестрейнеры). При открытой крышке крыса заползает в цилиндр. Через отверстие в задней крышке станка можно вводить растворы под кожу задней лапы или брать кровь из хвоста.
4. Для длительной фиксации применяют также станки или операционные дощечки.

Проведение инъекций крысе

Экспозиция нахождения крысы в эксикаторе составляет около 5 мин, после чего животное извлекается и фиксируется. Последующий после фиксации наркоз поддерживается ингаляцией эфира. Общая продолжительность наркоза зависит от поставленной задачи. Критериями нахождения крысы в наркозе являются отсутствие реакции на прикосновение, боль, усугубление и участие вспомогательной мускулатуры в акте дыхания.
ПРОВЕДЕНИЕ НАРКОЗА
На практических занятиях применяется ингаляционный эфирный наркоз: введение препарата осуществляют через дыхательные пути, для чего используется эксикатор, куда помещается вата, смоченная эфиром, и животное.

Для измерения температуры тела применяют:
максимальные термометры;
электротермометры.
При измерении температуры тела у крысы термометр вводится в прямую кишку, на глубину 2-5 см. В случаях повторных измерений ректальной температуры термометр всегда погружается в кишку на одну и ту же глубину.
При включении термометра на нем высвечивается буква «L», то это обозначает «низкая температура измеряемого объекта».
ИЗМЕРЕНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ ТЕЛА

При регистрации дыхания у крыс на занятии используют визуальный подсчет числа дыханий или графическую регистрацию дыханий. На глаз удается подсчитать до 400 дыханий в мин. Для визуальной регистрации частого дыхания применяется следующий способ. Определяется при помощи секундомера продолжительность 20 вдохов. Для этого ведут счет 2 раза подряд до 10, причем на счет «0» включают секундомер и на счет 10 (последний) выключают. Затем рассчитывают число дыханий в минуту или пользуются заранее составленной таблицей.
РЕГИСТРАЦИЯ ДЫХАНИЯ И ЛЕГОЧНОЙ ВЕНТИЛЯЦИИ