Овариальный резерв и паракринный яичникНекоторые биологические, клинические и лабораторные аспекты

Антральный фолликул
TE: theca externa
TI: theca interna
LB: lamina basalis
G: granulosa
A: antrum
O: ovum
vg: vesicula germinalis

Образование примордиальных фолликулов
Примордиальные герминативные клетки образуются в желточном мешке, аллантоисе и задней кишке зародыша с 3-х недель гестации
К 5-6 неделям гестации они мигрируют в генитальную складку
В 6-8 недель гестации активное митотическое деление герминативных клеток
Максимальное число ооцитов (6-7 миллионов в обоих яичниках) к 16-20 неделям беременности

Примордиальный фолликул состоит из яйцеклетки, замершей на стадии диплотена профазы первого мейотического деления, окруженной одним слоем веретенообразных клеток гранулезы

Рост фолликулов
Рост фолликулов — процесс, описываемый как континуум
Вплоть до полного истощения всего запаса фолликулов, они вступают в рост и переходят в атрезию при всех физиологических состояниях
Рост и атрезия фолликулов не прерываются беременностью, овуляцией или периодами ановуляции
Этот процесс продолжается всегда, включая период детства и перименопаузальный период

Рост фолликулов
Скорость уменьшения запаса фолликулов пропорциональна количеству имеющихся фолликулов
Поэтому в наибольшей степени атрезия затрагивает внутриутробный период
Из 6-7 миллионов фолликулов к рождению остается только 2 миллиона, а к менархе — только 300 000
Менее 500 яйцеклеток смогут овулировать в течение всего репродуктивного периода

Рост фолликулов
Для достижения преовуляторного статуса примордиальному фолликулу требуется 85 дней
Больший период роста фолликулов не зависит от гонадотропной стимуляции
Под действием ФСГ первичные фолликулы переходят в антральную стадию

Прямые маркеры функции и функционального резерва яичников
Ингибин
Активин
Анти-Мюллеровский гормон
Фоллистатин (нейтрализует биологическую активность активина, что приводит к усилению продукции яичниковых андрогенов и усилению инсулинорезистентности)

Ингибин

Гонадотропины и ингибин/активин
Клетки гранулезы:
- ФСГ up-регулирует экспрессию ßA и ßB - ФСГ стимулирует синтез активина
Клетки теки:
- ЛГ up-регулирует экспрессию α-субъединицы
- ЛГ стимулирует синтез ингибина
Лютеиновые клетки:
- ЛГ up-регулирует α and ß-субъединицы
- ЛГ стимулирует синтез ингибина

Активин
Состоит из двух цепей, идентичных бета-субъединицам ингибина

Ингибин/активин и
селекция фолликула - 1
SG Hillier (1991)
Активин подавляет ответ клеток теки на
ЛГ – подавляет синтез андростендиона
Ингибин потенцирует ответ клетки теки на
ЛГ
Ингибин стимулирует ответ клеток гранулезы на ФСГ
Активин стимулирует ответ клеток гранулезы на ФСГ – up-регуляция ароматазного потенциала

Холестерин
Андростендион
Прегненолон
Тека
Гранулеза
ßA + ßB
Активин
ЛГ
ФСГ
Ингибин/активин и
селекция фолликула - 2
Эстрадиол (E2)
Андростендион
Эстрон (E1)

Холестерин
Андростендион
Прегненолон
Тека
Гранулеза
α + ßA/B
Ингибин
ЛГ
ФСГ
Ингибин/активин и
селекция фолликула - 3
ЛГ
Эстрадиол (E2)
Андростендион
Эстрон (E1)

Ингибин/активин и
селекция фолликула - 4
Самый чувствительный к ФСГ фолликул - наибольший синтез ингибина
Активин обеспечивает баланс между выходом андрогенов теки и ароматазой гранулезы
Ингибин готовит клетки гранулезы к ароматизации андрогенов
Ингибин усиливает поставку андрогенов -
выход E2 из доминантного фолликула

Клеточные ответы на ингибин/активин
2 клонированных рецептора ингибина – оба с низкой аффинностью 2 клонированных рецептора активина:
- 1 с низкой аффинностью
- 1 с высокой аффинностью
Необычность рецепторов ингибина/актвина
- внутренняя киназная активность
- Ser/Thr киназы

Анти-Мюллеровский гормон
Структурно близок к другим молекулам семейства трансформирующего фактора роста бета (ингибинам и активинам)
У женщин начинает секретироваться только с началом полового созревания
Место продукции – клетки гранулёзы яичника
Контролирует образование первичных фолликулов, подавляя избыточное рекрутирование
Используется в комплексной диагностике СПКЯ и ранней менопаузы

АМГ
1916 – Франк Лилли: эффект примартин
1947 – Альфред Йост – эффект примартин не связан с тестостероном
1986 – определение структуры АМГ
1996 – АМГ синтезируется клетками гранулезы

АМГ
у мышей с гомозиготной делецией гена АМГ происходит избыточное рекрутирование фолликулов и преждевременное истощение яичников – рождение гипотезы о защитной роли АМГ при рекрутировании фолликулов

АМГ у женщины
вырабатывается клетками гранулезы зреющих фолликулов в независимом от гонадотропинов режиме
уровень АМГ слабо коррелирует с уровнями других репродуктивных гормонов в течение цикла

АМГ у женщины
уровень коррелирует с общим количеством клеток гранулезы и стабильно снижается с возрастом
уровень коррелирует с количеством доступных для гонадотропной стимуляциии фолликулов
критическое снижение наступает за 4 года до менопаузы

Анти-Мюллеровский гормон
Маркер
Овариального резерва
Овариального старения
Овариальной дисфункции
Овариального ответа
Уровень коррелирует с количеством антральных фолликулов в начале цикла
Снижение: снижение ответа на стимуляцию овуляции и шансов успеха ЭКО
При СПКЯ – повышение уровня

Расширенный EFORT-тест
Exogenous FSH Ovarian Reserve Test (Исследование резерва яичников с помощью экзогенного ФСГ)
Натощак на 3-й день цикла:
ЛГ, ФСГ, ингибин B, АМГ
После забора крови: 300 МЕ Гонала-Ф п/к или в/м
Через 24 часа (4-й день цикла):
ингибин B, АМГ
В ответ на стимуляцию ФСГ уровень ингибина B повышается, а уровень АМГ снижается

Показания к проведению EFORT-теста
Подозрение на снижение функционального резерва яичников по клиническим признакам, данным УЗИ и гормонального исследования
Прогнозирование успеха ЭКО
Важное исследование для выбора ГЗТ

Глюкокортикоиды
Простагландины
Цитокины
Инсулиноподобные факторы роста (IGF)
Семейство трансформирующего фактора роста (TGF)ß
Межклеточные сигналы «Яйцеклетка-Гранулеза»
Глюкокортикоиды
Простагландины
Цитокины
Инсулиноподобные факторы роста (IGF)
Семейство трансформирующего фактора роста (TGF)ß
Межклеточные сигналы «Яйцеклетка-Гранулеза»
ПАРАКРИННЫЙ КОНТРОЛЬ
ФУНКЦИИ ЯИЧНИКА

GDF9
Член семейства TGFß
Growth Differentiation Factor 9
Продуцируется яйцеклеткой
Готовит примордиальные фолликулы к рекрутированию
Необходим для экспансии клеток кумулюса в зрелом фолликуле
MM Matzuk

BMPs
Члены семейства TGFß
Bone Morphogenetic Proteins
BMP2, BMP6 и BMP15 ооцит-специфические
Влияют на рекрутирование фолликулов
BMP усиливают синтез гранулезой E2
BMP подавляют синтез гранулезой прогестерона (т. е. предотвращают лютеинизацию
BMP недавно идентифицирован как F-gene у овец Boorola-Merino - CHJ Souza