Слайд 2План:
Генная инженерия дрожжей.
Дрожжевые плазмиды.
Дрожжевые векторы.
Двухгибридные системы дрожжей.
![План: Генная инженерия дрожжей. Дрожжевые плазмиды. Дрожжевые векторы. Двухгибридные системы дрожжей.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-1.jpg)
Слайд 3Дрожжевые клетки используются по следующим причинам:
Дрожжи – это одноклеточные эукариоты, генетика и
![Дрожжевые клетки используются по следующим причинам: Дрожжи – это одноклеточные эукариоты, генетика](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-2.jpg)
физиология которых хорошо изучены, геном дрожжей секвенирован, их можно культивировать в условиях лаборатории и в биореакторах.
В качестве векторных молекул могут использоваться природные плазмиды дрожжей
В клетках дрожжей посттрансляционные модификации аминокислотных остатков белков (гликозилирование, формирование -S-S- мостиков и др.) осуществляются как у эукариот.
Способны секретировать гетерологичные белки в среду, что облегчает процесс очистки
Используются в пищевой промышленности и признаны безопасными микроорганизмами
Слайд 4Плазмиды дрожжей
2μ (2-микронная плазмида)
Размер:6,3 кб
Количество : 50 копии
Пример: вектор
![Плазмиды дрожжей 2μ (2-микронная плазмида) Размер:6,3 кб Количество : 50 копии Пример: вектор экспрессии](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-3.jpg)
экспрессии
Слайд 5Первый шаг на пути оптимизации экспрессии в дрожжах-выбор промотора
ТАТА-бокс расположен дальше (40-120
![Первый шаг на пути оптимизации экспрессии в дрожжах-выбор промотора ТАТА-бокс расположен дальше](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-4.jpg)
п.о)
Дрожжевые промоторы функционируют вместе с активаторами 100-1000п.о.
Содержат длинную регуляторную область до 1кб
Конститутивные промоторы: алкогольдедидрогеназа, триозофосфатдегидрогеназа
Индуцибельные промоторы-промоторы генов катаболизма галактозы
Полиаденилирование происходит очень близко к 3’-концу транскрипта
Слайд 6Следующее требование для экспрессии – это эффективная трансляция
Распознавание факторами инициации участка инициации
![Следующее требование для экспрессии – это эффективная трансляция Распознавание факторами инициации участка](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-5.jpg)
трансляции AUG-кодона. AUG у дрожжей находится в окружении A и U.
Остановку инициации вызывают: G, петлевые структуры
Слайд 7Известны 5 типов дрожжевых векторов:
1. YIp интегративные
2. YRp репликативные
3. YEp
![Известны 5 типов дрожжевых векторов: 1. YIp интегративные 2. YRp репликативные 3.](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-6.jpg)
эписомальные
4. YCp центромерные
5. YAC дрожжевые искусственные хромосомы
Они различаются по копийности и стабильности.
Слайд 11ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Kurs_lekcij_po_geneticheskoj_inzhenerii.pdf
Щелкунов С. Н. Генетическая инженерия.pdf
https://starius.ru/fbb/VI/GenEng/2011-03-01.pdf
![ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА Kurs_lekcij_po_geneticheskoj_inzhenerii.pdf Щелкунов С. Н. Генетическая инженерия.pdf https://starius.ru/fbb/VI/GenEng/2011-03-01.pdf](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1159943/slide-10.jpg)