Методы стерилизации в микробиологии

СТЕРИЛИЗАЦИЯ
Методы, применяемые для уничтожения всех форм жизни, как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов.

ДЕЗИНФЕКЦИЯ И СТЕРИЛИЗАЦИЯ
Дезинфекция
уничтожение в окружающей человека среде возбудителей инфекционных заболеваний. В этом случае гибнут только вегетативные формы микроорганизмов, загрязняющие обрабатываемые предметы.
Стерилизация
уничтожение не только вегетативных форм микроорганизмов, но и их спор, которые, как известно, отличаются особой устойчивостью к воздействию внешней среды

ОБЪЕКТЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ В МИКРОБИОЛОГИИ
Микробиологическая посуда (пробирки, чашки Петри, колбы и т.д.)
Среды для выращивания микроогранизмов
Боксы и помещения, в которых ведут работу с микробиологическими объектами
Отработанные материалы (наконечники, чашки Петри, мазки и т.д.)

СТЕРИЛИЗАЦИЯ
Термическая
Прокаливание в пламени и обжигание
Кипячение
Сухожаровая стерилизация ( горячим воздухом)
Автоклавирование ( насыщенным паром под давлением )
Тиндализация ( дробная стерилизация )
Холодная
Фильтрование
Облучение
Химические средства

ОБЖИГАНИЕ В ПЛАМЕНИ ГОРЕЛКИ

КИПЯЧЕНИЕ – ОДНОКРАТНОЕ НАГРЕВАНИЕ ДО ТЕМПЕРАТУРЫ 100 °С

АВТОКЛАВИРОВАНИЕ – СТЕРИЛИЗАЦИЯ НАСЫЩЕННЫМ ПАРОМ ПОД ДАВЛЕНИЕМ

АВТОКЛАВИРОВАНИЕ
Материалы:
Основной режим - изделия из бязи, марли (перевязочный материал, белье и т.д.), стекла, изделия из коррозийностойкого металла.
Щадящий режим - изделия из тонкой резины, латекса (хирургические перчатки и др.) и отдельных видов полимеров (полиэтилен высокой плотности), питательные среды
Упаковка:
Биксы, крафт-пакеты, бумага-ламинат, бязь.

АТОКЛАВИРОВАНИЕ
Достоинства:
высокая проницаемость пара,
большой выбор упаковки,
дольше сохраняется стерильность,
дешевый и простой в использовании метод.
Недостатки:
увлажнение изделий,
вызывает коррозию металлов

СТЕРИЛИЗАЦИЯ ЖАРОМ
Условия стерилизации:
при 180 0С – 1/2 ч,
при 170 0С – 1 ч,
при 160 0С – 2 ч,
при 150 0С – 2,5 ч,
при 140 0С – 3 ч,
при 120 0С – 6 ч.

СТЕРИЛИЗАЦИЯ ЖАРОМ
Материалы:
изделия из стекла, металлов, фарфора и резин на основе силиконового каучука, лабораторная посуда, термостойкие порошкообразные лекарственные средства (тальк, белая глина, окись цинка и др.), минеральные и растительные масла, жиры, ланолин, вазелин, воск.
Упаковка:
крафт-пакеты, бязь.

СТЕРИЛИЗАЦИЯ ЖАРОМ
Достоинства:
дешевый, простой метод,
не вызывает коррозии металла,
не происходит увлажнения упаковки и изделий
Недостатки:
ограниченный выбор упаковки,
медленное и неравномерное прогревание изделий,
необходимость использования более высоких температур,
невозможность использовать материалы из резины, полимеров.

ТИНДАЛИЗАЦИЯ – ДРОБНАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ ЖИДКОСТЕЙ С ПРОМЕЖУТОЧНЫМ ХРАНЕНИЕМ В ТЕРМОСТАТЕ

ПАСТЕРИЗАЦИЯ
процесс однократного нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ при температуре
65 °С в течение 30 минут,
75 °С 15-40 секунд,
85 °С 8-10 секунд.
Пастеризация не означает стерилизации продукта!
При пастеризации в продукте погибают вегетативные формы микроорганизмов, однако споры остаются в жизнеспособном состоянии и при возникновении благоприятных условий начинают интенсивно развиваться.
При пастеризации молока погибают практически все болезнетворные микроорганизмы, но остаются термостойкие молочнокислые

БАКТЕРИАЛЬНАЯ ФИЛЬТРАЦИЯ
Механический метод стерилизации с помощью микропористых фильтров.
Механизм фильтрации объясняется главным образом адсорбцией микробов, происходящей в порах фильтрующих материалов, которые в большинстве случаев заряжены отрицательно.
В качестве микропористого фильтрующего материала используют каолин, фарфор, бумажно-асбестовую массу, инфузорную землю, коллодий и другие пористые материалы, а также стекло.
Является единственным возможным методом стерилизации для термолабильных веществ
Широкое применение находят микропористые фильтры на химико- фармацевтических заводах и при производстве вакцин и сывороток

ГАЗОВАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ – СТЕРИЛИЗАЦИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГАЗООБРАЗНЫХ ВЕЩЕСТВ (ОКСИД ЭТИЛЕНА, МЕТИЛ-БРОМИД И ИХ СМЕСИ (ОБ, ОКЭБМ), ФОРМАЛЬДЕГИД И ДР.)
Материалы:
полимеры, стекло, металл
Упаковка:
бумага-ламинат, пергамент, крафт-бумага

ГАЗОВАЯ СТЕРИЛИЗАЦИЯ
Достоинства:
Не вызывает коррозии металлов, порчи изделий из кожи, шерсти, бумаги, резины, пластмасс.
Является сильным бактерицидным, спорицидным и вирулицидным средством.
Пары обладают высокими проницающими свойствами
Может применяться для любых материалов, в том числе термолабильных.
Срок сохранения стерильности в упакованных предметах около 5 лет.
Недостатки :
Изделия, простерилизованные газовым методом, допускается применять только после тщательного проветривания в вентилируемом помещении.
токсичность для персонала и взрывоопасность при несоблюдении техники безопасности

РАДИАЦИОННЫЙ МЕТОД – СТЕРИЛИЗАЦИЯ ИОНИЗИРУЮЩИМ ИЗЛУЧЕНИЕМ
Материалы:
перевязочные и шовные материалы,
некоторые лекарственные препараты, в том числе антибиотики и гормоны, биологические ткани и т.д.
Полимерные материалы одноразового назначения
Используется при производстве вакцин и стерилизации токсинов.

РАДИАЦИОННЫЙ МЕТОД
Достоинства:
Изделия обрабатываются, будучи помещенными в герметичные упаковки. Благодаря этому увеличиваются сроки их хранения.
Приступать к использованию продукции можно непосредственно после облучения.
В области эксплуатации облучающей установки не создаются сопутствующие вредные вещества.
Стерилизованные гамма-лучами изделия остаются сухими и не содержат канцерогенных составляющих.
Недостатки:
значительные затраты на строительство специальных радиационных установок и закупку радиоактивных источников, стоимость которых остается пока повсеместно очень высокой

КОНТРОЛЬ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Физический, состоящий в визуальном и инструментальном контроле за всеми параметрами стерилизации. Измерительная аппаратура должна периодически контролироваться в государственном метрологическом учреждении.
Химический, проводимый с помощью индикаторов, изменяющих цвет или плавящихся при достижении определенного уровня температуры, влажности, концентрации стерилизанта.
Биологический, при котором в качестве индикатора используются споры микроорганизмов. Для паровой стерилизации в качестве биологического индикатора используют споры В. stearothermophilus, для стерилизации этиленоксидом – В. subtilis

ХИМИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ
Индикаторы 1 класса являются индикаторами («свидетелями») процесса. Примером такого индикатора является термоиндикаторная лента

ХИМИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ
2-й класс индикаторов предназначен для использования в специальных тестовых процедурах, например, при проведении теста Бовье-Дика (Bowie-Dick test). Этот тест не контролирует параметры стерилизации, он оценивает эффективность удаления воздуха из камеры парового стерилизатора.

ХИМИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ
Индикаторы 3-го класса являются индикаторами одного параметра. Они оценивают максимальную температуру, но не дают представления о времени ее воздействия.

ХИМИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ
4-й класс - это многопараметровые индикаторы. Они содержат красители, изменяющие свой цвет при сочетанном воздействии нескольких параметров стерилизации, чаще всего — температуры и времени. Примером таких индикаторов служат термовременные индикаторы для контроля воздушной стерилизации.

ХИМИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ
5-й класс - интегрирующие индикаторы. Эти индикаторы реагируют на все критические параметры метода стерилизации.