ХОЛЕРА

Холера (определение ВОЗ) – острое инфекционное заболевание человека с фекально-оральным механизмом заражения, вызываемое холерным вибрионом, для которого характерны резко выраженные гастроэнтерит, интоксикация и обезвоживание организма вследствие потери жидкости и солей с водянистыми испражнениями и рвотными массами.
Относится к карантинным особо опасным инфекциям.

Историческая справка
В 1883г. Р. Кох выделил холерный вибрион в чистой культуре из испражнений больных.
Первоначальное название возбудителя – comma Cochi.
Ф. Готшлих в 1906г. на карантинной станции Эль – Тор в Египте выделил из кишечника паломников вибрион по биологическим свойствам такой же, но отличающийся гемолитическими свойствами.

Историческая справка
До 1960 г было известно 6 пандемий холеры.
Во время пятой пандемии в России в 1892 – 1893 гг. умерло 700 тыс.
В 1970 г эпидемия холеры Эль – Тор в Одессе, Керчи, Астрахани.

Характеристика возбудителя
Классификация
5 группа по определителю Бержи (факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки)
семейство Vibrionaceae
род Vibrio
вид – V. Cholerae
4 биовара: V. cholerae cholerae, V. cholerae eltor – вызывают холеру, и холероподобные - V. cholerae proteus, V. cholerae albensis.

С 1993г. по решению ВОЗ ещё одним возбудителем холеры является холерный вибрион O139 серогруппы.
В настоящее время различают три серологических варианта V. cholerae cholerae, V. cholerae eltor : Огава, Инаба, Гикошима

Морфологические и тинкториальные свойства
Мелкие изогнутые в виде запятой палочки
монотрихи
спор и капсул не образуют
Грам-отрицательны

Культуральные свойства
Хорошо растут на простых питательных средах, предпочитают щелочную рН (8,5 – 9,6)
аэроб
на жидких средах (1% щелочная пептонная вода) через 6 – 8 часов образуется нежная голубоватая пленка
на плотных (щелочной МПА) – мелкие 2 – 3 мм, полупрозрачные, округлые, слегка блестящие колонии, напоминающие росинки.
дифференциально-диагностические среды:
среда Мансура (таурохолат-триптиказо-телуритовая среда) - V. cholerae образует колонии черного цвета с серой каемкой, холероподобные вибрионы – бледно – серые колонии;
среда ТЦБС (тиосульфат-цитратно-биллиарно-сахарозная среда) - V. cholerae образует ярко – желтые колонии, холероподобные вибрионы – нет роста или неокрашенные колонии.

Биохимические свойства
Ферментирует большинство углеводов до кислоты,
наиболее значима в диагностике – триада Гейберга: V. cholerae – манноза и сахароза – до кислоты, арабиноза – не ферментируется, холероподобные вибрионы – не ферментируют эти сахара.
V. cholerae разжижает желатин,
восстанавливает нитраты в нитриты,
образует индол, что лежит в основе нитрозо – индоловой реакции – реакции холера-рот.
V. cholerae расщепляет крахмал.

Токсигенные свойства
эндотоксин, обладающий энтеротоксигенностью – вызывает десквамацию эпителия кишечника;
экзотоксин (холерогентоксин) – белок 8 тысяч Da, термолабильный, состоит из 2 компонентов:
В – выполняет функцию акцептора, обеспечивает прикрепление к специфическим рецепторам энтероцитов и способствует трансмембранному переносу А – субъединицы в цитоплазму.
Субъединица А вызывает активацию аденилатциклазы, что приводит к нарушению водно – солевого обмена

Факторы вирулентности
адгезины
ферменты инвазивности - лецитиназа, гиалуронидаза

Антигенные свойства
Основной антиген – соматический О – АГ, типоспецифический (определяет серогруппы)
Н – АГ видоспецифический.
V. cholerae и V. Eltor относятся О1 серогруппе.
О1 – АГ имеет 3 компонента – А, В, С, в соответствии с чем выделяют сероварианты холерного вибриона: Огава – АВ, Инаба – АС, Гикошима АВС.

Разновидности О1 антигена

Резистентность
Чувствительны к действию температуры, при 100° погибают мгновенно, при 80° - через 20 минут.
В водопроводной воде сохраняются до 2 недель,
в соленой воде - до нескольких месяцев.
При УФО погибают через 10 минут.
Чувствительны к кислоте и дезрастворам в рабочих концентрациях.
V. Eltor во внешней среде более устойчив.

Патогенность для животных
Антропонозная инфекция

Эпидемиология
Источник инфекции – больной человек и, особенно, вибриононосители.
Механизм передачи – фекально – оральный. Пути передачи: контактно – бытовой, водный, алиментарный.
Восприимчивость людей к холере высокая, чаще заболевают люди с ахлоргидрией (анацидный гастрит).

Патогенез
входные ворота - пищеварительный тракт
инкубационный период 1 – 5 дней
холерогентоксин связывается с рецепторами энтероцитов
комплекс холерогентоксин + рецептор активирует аденилатциклазу
увеличивается образование цАМФ
цАМФ регулирует секрецию воды и электролитов в просвет кишечника

Патогенез
потеря жидкости составляет около 1 л в течение часа
гиповолемия
дегидратационный шок
острая почечная недостаточность
ацидоз
нарушение деятельности сердечно-сосудистой системы
в тяжелых случаях - летальный исход

Иммунитет
При холере наблюдается гуморальный иммунный ответ
Образуются 2 вида антител: 1) к О – АГ - агглютинины, лизины; 2) антитоксические АТ к холерогену.
Существенную роль играют секреторные иммуноглобулины (SIgA), препятствующие адгезии вибриона.
Постинфекционный иммунитет достаточно стойкий.

Лабораторная диагностика
Исследуемый материал
фекалии
рвотные массы
желчь
секционный материал (отрезки тонкого кишечника и желчный пузырь)
предметы, загрязненные испражнениями (постельное и нательное белье и др.)
вода

Лабораторная диагностика
Экспресс – диагностика
РНТФ с индикаторными холерными бактериофагами IV типа и Eltor
РИФ с люминесцирующей холерной сывороткой
РПГА с суспензионными холерными АТ
Реакция иммобилизации холерных вибрионов с О1 холерной сывороткой, учет – темно-польная микроскопия
ИФА
ПЦР

Лабораторная диагностика
Микроскопический метод
окраска по Граму,
серебрение по Морозову (выявление жгутиков).

Лабораторная диагностика
Бактериологический метод – основной
I этап. посев на 1% щелочную пептонную воду, щелочной агар, элективные дифференциально - диагностические среды.
II этап изучение роста вибрионов на щелочной пептонной воде, щелочном агаре, элективных дифференциально - диагностических и выделение чистой культуры на скошенном щелочном агаре
III этап дифференциация холерного и холероподобных вибрионов, дифференциация биоваров классического и эль – тор, определение серовара холерного вибриона: реакция агглютинации на стекле с сыворотками Инаба и Огава.
Заключение через 36 часов после начала исследования

Лабораторная диагностика
Серологический метод – дополнительный Может быть использован для выявления вибрионосителей.
Реакция агглютинации с холерными диагностикумами
Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарными холерными диагностикумами

Специфическая профилактика
вакцина холерная бивалентная химическая таблетированная (смесь холероген-анатоксина и О-антигенов, сероваров Инаба и Огава). Иммунитет 6-8 месяцев
Специфическое лечение - не применяется