Некультивируемое состояние микроорганизмов

ТРАКТОВКА ТЕРМИНА «ПОКОЙ»
Клетки культур стационарной фазы
Некультивируемые формы
Неактивные клетки в биопленках
Антибиотикоустойчивые персисторы
Клетки цистоподобного типа

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
ЖНС – состояние микроорганизмов, характеризующееся прекращением роста на питательных средах в ответ на действие неблагоприятных факторов
45 видов
30 видов патогенны для человека, в том числе, ВОЗБУДИТЕЛИ ХОЛЕРЫ, ТУЛЯРЕМИИ, ЛЕГИОННЕЛЕЗА
15 видов условно-патогенны для человека
Грамотрицательные, грамположительные, микоплазмы, археобактерии

ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ

ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ
Светопреломление (рефрактерность)
Усложнение и утолщение клеточных оболочек
Неоднородность текстуры цитоплазмы
Появление электронпрозрачных включений полиалконатов
Конденсация и компактизация нуклеоида
Отсутствие признаков деления
Бугристый рельеф клеточной поверхности
Переходный характер флюоресценции

СТРОЕНИЕ ПОКОЯЩИХСЯ ФОРМ

СТРОЕНИЕ ПОКОЯЩИХСЯ ФОРМ

ИНДУКТОРЫ НЕКУЛЬТИВИРУЕМОГО СОСТОЯНИЯ
Температура (+0,5-+7 0С для Campilobacter jejuni, 250 C для Vibrio cholerae)
Вариации химического состава среды (повышенное содержание меди для Agrobacterium tumerifaciens)
Антибиотики (ципрофлоксацин для Mycobacterium tuberculosis)
γ- лучи
Аэрация
Чередование световой и темновой фазы ( S. typhimurium)
Экзометаболиты (ГМЛ, факторы d1 - АОБ)

МЕТАБОЛИЗМ
Отсутствие дыхательной активности
Низкое соотношение P/S, и высокое соотношение Ca/K
Терморезистентность
Устойчивость

УСЛОВИЯ ОБРАЗОВАНИЯ ПОКОЯЩИХСЯ ФОРМ
Трофическая регуляция
Стресс, вызванный исчерпанием пространства (избыточное количество глюкозы, индукция автолиза)
Резкое изменение окружающих условий
Микробные аутоиндукторы

РАЗНООБРАЗИЕ ПОКОЯЩИХСЯ ФОРМ
Внутривидовые/ Межштаммовые
толщина и слоистость клеточных оболочек
наличие включений
степень выраженности покоящегося состояния
Полиморфизм (эндоспоры и ЦПК)
Фенотипическая вариабельность

ЖНС И ДИАГНОСТИКА
Прямые методы
Электронная микроскопия
Метод рентгеновского анализа
Микроскопия препаратов, окрашенных ДНК-связывающими красителями Live/Dead
Культуральный метод
ПЦР анализ

ДИАГНОСТИКА. ПРЯМОЙ МЕТОД
Микроскопия
Анализ содержания P, S. Ca, K

АУТОРЕГУЛЯЦИЯ ПОКОЯЩЕГОСЯ СОСТОЯНИЯ
Алкилризорцины, гидрохиноны

АОБ И ДНК
Эластовязкость
Концентрация АОБ точки излома соответствовала концентрации, индуцирующей ЦПК (псевдомонады)
Повышение температуры плавления
Защита при УФ-излучении
Конформационная подвижность
Гипохромный эффект
Сдвиг максимума флюоресценции

ГИПОХРОМНЫЙ ЭФФЕКТ И ЗАЩИТА ОТ УФ-ИЗЛУЧЕНИЯ

КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЕ ГЕКСОРЕЗОРЦИМА С ДНК
Линейные фрагменты
Мицеллоподобные структуры на ДНК, диаметро200нм
Утолщенные разветвленные структуры, до 1 мкм в диаметре

HLP БЕЛОК И ПОКОЯЩИЕСЯ ФОРМЫ MYCOBACTERIUM SMEGMATIS

MYCOBACTERIUM SMEGMATIS И RPF ГЕН

MYCOBACTERIUM SMEGMATIS И RPF ГЕН

MYCOBACTERIUM SMEGMATIS И RPF ГЕН

M. TUBERCULESIS И RPF ГЕН