РАЗРАБОТКА МОДИФИКАЦИИ РИА-МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЛЬДОСТЕРОНА В МОЧЕ, АНАЛИЗ ЕЁ ИНФОРМАТИВНОСТИ У БОЛЬНЫХ С ОПУХОЛЯМИ НА

РАЗРАБОТКА МОДИФИКАЦИИ РИА-МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЛЬДОСТЕРОНА В МОЧЕ, АНАЛИЗ ЕЁ ИНФОРМАТИВНОСТИ У БОЛЬНЫХ С ОПУХОЛЯМИ НАДПОЧЕЧНИКОВ,
В СРАВНЕНИИ С ИССЛЕДОВАНИЕМ АЛЬДОСТЕРОНА В КРОВИ
ПРОФЕССОР Р.С.ТИШЕНИНА, К.М.СМОЛЯНЕЦ
ГУ Московский областной научно-исследовательский клинический институт им.М.Ф.Владимирского, Москва

РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ
ОПУХОЛЕЙ НАДПОЧЕЧНИКОВ
Среди больных гипертонией примерно у 20% повышение артериального давления – вторичное, симптоматическое. Клиническая значимость проведения дифференциальной диагностики между эссенциальной гипертонией и симптома тической артериальной гипертензией (АГ) заключается в том, что своевременное лечение основного заболевания сопровождается нормализацией артериального дав- ления, тем самым уменьшается количество осложнений (АГ) в виде инсультов и инфарктов.

13.ПОНЯТИЕ ИНЦИДЕНТАЛОМА
Инцинденталома – случайно выявленное узелковое образование в надпочечниках,
благодаря широкому внедрению УЗИ и КТ по поводу различных заболеваний брюшной полости.

КЛАССИФИКАЦИЯ ОПУХОЛЕЙ НАДПОЧЕЧНИКОВ
I . Гормонально-активные опухоли коры надпочеч –
ников
1. Альдостерома – опухоль, секретирующая минералокортикоиды , основной - альдостером ( синдром Конна).
2. Глюкостерома – опухоль, секретирующая глюкокортикостероиды,
основной – кортизол
3. Андростерома - опухоль, секретирующая андрогены , основные - дегидроэпиандростерон ( ДГЭА), ( ДГЭА-С) .
4. Эстрома - опухоль, секретирующая эстрогены
5. Смешанные опухоли – глюкоандростерома, кортикостерома.
II. ГОРМОНАЛЬНО - НЕАКТИВНЫЕ ОПУХОЛИ КОРЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ
III. ОПУХОЛИ МОЗГОВОГО СЛОЯ НАДПОЧЕЧНИКОВ –
феохроцитомы

КЛАССИФИКАЦИЯ ПЕРВИЧНОГО ГИПЕРАЛЬДОСТЕРОНИЗМА
Одиночная альдостеронпродуцирующая аденома надпочечника - синдром Конна ( 65% случаев ПГА).
2. Идиопатический первичный гиперальдостеронизм- ИПГА [двусторонняя гиперплазия надпочечников с микро- или макроузелковыми изменениями или без таковых] (30-35% случаев).
3. Односторонняя надпочечниковая гиперплазия.
4. Альдостеронпродуцирующая карцинома надпочечника

ПЕРВИЧНЫЙ
ГИПЕРАЛЬДОСТЕРОНИЗМ
Первичный гиперальдостеронизм (ПГА) –синдром G. Coon ( 1955) - является одним из наиболее распространенных опухолей надпочечников и самой частой причиной симптоматической артериальной гипертензии (АГ) эндокринного генеза.
Частота ПА колеблется от 6 до 15 % среди всех больных с АГ, а среди пациентов с лекарственной
толерантностью к гипотензивной терапии 20%.
ПГА вызывается чаще односторонней доброкачественной, реже злокачественной аденомой коры надпочечников или двусторонней узелковой гиперплазией.

СЕМЕЙНЫЙ ГИПЕРАЛЬДОСТЕРОНИЗМ
5. Глюкокортикоидподавляемый ГА (дексаметазонподавляемый ГА,
глюккортикоидзависимый ГА,
семейный ГА 1 типа) наследуется по аутосомно-доминантному типу.
Д-з основывается на генетическом анализе возможной мутации гибридного гена , кодирующего синтез 11-гидроксилазы и альдостерон –синтетазы.
Лечение: прием дексаметазона

ДИАГНОСТИКА ПЕРВИЧНОГО ГИПЕРАЛЬДОСТЕРОНИЗМА
1-й этап: Наиболее информативным скрининговым тестом при ПГА является соотношение концентраций в крови альдостерона и активности ренина плазмы.
2-й этап:Диагноз подтверждается одной из 4-х провокационных проб: а) оральный тест с нагрузкой солью, б).нфузионный тест с нагрузкой солью, в).флудрокортизоновый тест, г). каптоприловый тест
3-й этап : Визуализация типа ПГА осуществляется – высокоразрешающей КТ надпочечников
4-й этап: Диагностика стороны поражения основывается на селективном заборе крови из вен надпочечника.

НЕДОСТАТКИ ВЫШЕПЕРЕЧИСЛЕННЫХ ТЕСТОВ
1. Недостаточная информативность
2.Сложные и дорогостоящие процедуры, особенно ангиографические.
3. Ограничение по возрасту, перенесенным заболеваниям: дети, старшее поколение, инсульт в анамнезе.

Анализ информативности методов диагностики первичного гиперальдостеронизма

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
В связи с тем, что для исследования альдостерона в моче РИА-методом на тест-системе фирмы «Immnotech» Чехия реактив Solution U в Россию не поступает , целью исследования явилась разработка модифика -ции данного этапа исследования с последую -щим анализом его информативности при обследовании больных с инциденталомами надпочечников и с содержанием альдостерона в крови.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Обследовано 40 с инциденталомами надпочечников и 39 с альдостеромаи в возрасте от 18-72 лет за период с 2008 -2011 г., часть из которых прооперирована в отделении хирургической эндокринологии МОНИКИ.
В сыворотке крови определяли концентрацию
калия, натрия, альдостерона, активности ренина, кортизола.
В суточной моче определяли показатели кортизола, модифицированным методом альдостерона.
Гормоны в крови и моче определяли РИА-методами, на коммерческих наборах «Immunotech» (Чехия), остальные анализы биохимическими методами.

ПРИНЦИП МОДИФИКАЦИИ РИА-МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЬДОСТЕРОНА В МОЧЕ
В отличие от РИА-метода фирмы «SEA SIA SORIN», в котором исследование альдостерона осуществляется с построением отдельных калибровочных графиков для крови и мочи, РИА-метод определения альдостерона фирмы «Immnotech» проводится с построением единого калибровочного графика для крови и мочи.
Поскольку пробы мочи не содержат белка , поэтому в реакционные пробирки вначале вносится реактив Solution U, а затем моча. Реактив Solution U состоит из сыворотки крови человека и азида натрия (<0,1%).
Так как для альдостерона транспортным белком в сыворотке крови является альбумин, поэтому наша модификация метода заключалось в том, что в качестве белкового компонента использован коммерческий 10% раствор альбумина ( Производитель ФГУП «НПО «Микроген», Россия).
Данный раствор состоит из плазмы человека с добавлением натрия каприловокислого, натрия хлорида и воды для инъекций.

ЭТАПЫ МОДИФИКАЦИИ РИА-МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЬДОСТЕРОНА В МОЧЕ
1-й этап: Определения концентрации общего белка, альбумина, электролитов в реактиве Solution U и в 10% растворе альбумина. Установлено более высокое содержание альбумина в растворе альбумина.
Это исследование проведено через разные промежутки времени 3 раза :2008 г.,2009 г., 2011 г.
2-й этап: Для выравнивания концентраций альбумина к 1 мл 10% раствора альбумина добавляется 330 мкл дистиллированной воды, тщательно перемешивается и через 30 мин. разливали по аликвотам, которые помещаются в морозильную камеру при минус 29-30 о С, а затем используются при определении концентрации альдостерона в моче.
3-й этап: Исследование содержания альдостерона в обоих реактивах.

Концентрации общего белка, калия, натрия, альдостерона в Solution U и растворе альбумина до и после разведения 2008 г.

Концентрации общего белка, калия, натрия, альдостерона в Solution U и растворе альбумина до и после разведения 2011 г.

Сравнение экскреции альдостерона, определенной двумя методами 2008 г.

Величины концентрации альдостерона плазмы и экскреции альдостерона с мочой у больных с опухолью надпочечников

Сравнение экскреции альдостерона
( нмоль/сутки), определенной двумя методами 2008 г

Сравнение экскреции альдостерона
( нмоль/сутки), определенной двумя методами
в 2011 г.

КОЛИЧЕСТВО ВЫПОЛНЕННЫХ АНАЛИЗОВ МОЧИ БОЛЬНЫМ С АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ В 2008-2011 г.г.

Процентное соотношение пациентов с повышенной концентрацией альдостерона в плазме и повышенной экскрецией альдостерона с мочой

ВЫВОДЫ
1.Исследование содержания альдостерона в суточной моче модифицированным РИА-методом с использованием альбумина согласуется с клиническими диагнозами и отличается более высокими показателями содержания альдостерона в моче.
2. Исследование альдостерона в суточной моче обладает большей доказательностью по сравнению с исследованием в крови у пациентов с инцидентоломами и первичным гиперальдостеронизмом.
3. На результаты определения влияет преаналитический этап: прием гипотензивных препаратов, пищевых добавок, избыточного количества соли.