Диагностические и терапевтические подходы с использованием нового СС хемокина CLTAP

CLTAP – маркер макрофагов, ассоциированных с опухолью
Поддержание концентраций цитокинов
Координирование обновления тканей
Подавление нежелательных иммунных реакций
Уничтожение трансформированных клеток
Детекция патогена
Стимуляция воспалительной реакции
Уничтожение патогена
Стимуляция системы приобретенного иммунитета
Фагоцитоз апоптотических клеток и клеточного дебриса
Стимуляция миграции и деления клеток
Стимуляция ангиогенеза
Подавление активности клеток иммунной системы
Функции макрофагов в организме

Возникновение макрофагов ассоциированных с опухолью (МАО)
CLTAP – маркер макрофагов, ассоциированных с опухолью

Макрофаги ассоциированные с опухолью (МАО) поддерживают рост опухоли секретируя ростовые факторы и цитокины
TGFβ, EGF, CXCL8, CXCL12
МАО подавляют противоопухолевый иммунитет
TGFβ, IL-10 (Иммуносуппрессия)
СCL17, CCL18, CCL22 (привлечение Т-клеток, не имеющих цитотоксической активности)
МАО поддерживают ангиогенез
VEGF
МАО перестраивают внеклеточный матрикс:
MMP, белки внеклеточного матрикса, трансглютаминазы
МАО поддерживают миграцию опухолевых клеток:
MMP, хемокины
МАО - типичные макрофаги 2 типа
CLTAP – маркер макрофагов, ассоциированных с опухолью

CLTAP был обнаружен в макрофагах стимулированных ТФР бета
CLTAP CC-chemokine Like TGFbeta Activated Protein
Нет гомологов на уровне белка
Нет гомологов на уровне мРНК
Нет консервативных доменов
CLTAP – маркер макрофагов, ассоциированных с опухолью

CLTAP – маркер макрофагов, ассоциированных с опухолью
Экспрессия CLTAP в макрофагах активируется только ТФР бета

Структура CLTAP в сравнении со структурой CCL25
Сигнальный
пептид или
трансмембранный
участок
Экспрессия CCL25 в различных тканях
CCL25
CLTAP
Экспрессия CLTAP в различных тканях
Структура белка и высокая тканеспецифичность указывает на возможную принадлежность CLTAP к семейству СС-хемокинов

Экспрессия мРНК CLTAP образцах почечноклеточной карциномы (GEO)
Экспрессия CLTAP значительно снижена в образцах почечноклеточной карциномы

Моноклональные антитела к CLTAP
Получены моноклональные антитела к CLTAP (Клон 7A5)
Антитела пригодны для проточной цитометрии (левая панель) и иммунофлуоресценции (средняя панель)
Вестерн блоттинга (правая панель)
CLTAP локализован в везикулярных структурах

Экспрессия CLTAP в почках
CLTAP экспрессируется в клетках эпителия проксимальных канальцев

Экспрессия мРНК CLTAP в почечноклеточной карциноме
Во всех исследованных случаях обнаружена полная потеря экспрессии

Экспрессия мРНК CLTAP в опухолях шейки матки
В отдельных случаях наблюдается повышение экспрессии CLTAP

Роль CLTAP в развитие опухолей
Почечноклеточная карцинома
CLTAP участвует в регуляции апоптоза эпителиальных клеток
потеря экспрессии CLTAP ведет к устойчивости клеток к апоптозу
Опухоли шейки матки
Повышенная экспрессия CLTAP является маркером количества МАО

Перспективные диагностические стратегии
1. Стратегии
Исследование экспрессии CLTAP в различных опухолях с целью выявления МАО с высоким иммуносуппрессорным потенциалом
Ассоциация уровня экспрессии CLTAP с прогнозом заболевания
2. Методика
Иммуногистохимический анализ экспрессии CLTAP в парафиновых срезах при помощи имеющихся антител.
3. Состояние проекта
Отработана методика, получены первые данные на клиническом материале.
Необходимо проведение широкомасштабных клинических исследований.

Перспективная терапевтическая стратегия
1. Стратегия
Активация апоптоза в клетках почечноклеточной карциномы за счет экспрессии рекомбинантного CLTAP.
2. Методика
Внесение экспрессионного конструкта при помощи аденовирусов или иммунных нанолипосом.
3. Состояние проекта
Показано участие CLTAP в регуляции апоптоза в клетках почечноклеточной карциномы.
Получены конструкты, содержащие кодирующую последовательность CLTAP.
Необходима подготовка средства доставки (аденовируса или иммунных нанолипосом).