Диагностические возможности иммуноферментных бесприборных тест-систем

Бесприборные тесты для определения антител к ВИЧ
Бесприборные тесты, применяемые для определения антител к ВИЧ:
1. Иммунохроматографические
Минимальное время реакции
Принцип анализа, отличный от классического ИФА
Визуальное считывание,
нестабильные результаты
2. Иммуноферментные
Принцип анализа, Чувствительность и специфичность, соответствующие классическому ИФА
Стабильность результата в течение лет
© ЗАО «Биоград», 2011г.

1. Иммунохроматографические
Минимальное время реакции
Принцип анализа, отличный от классического ИФА
Визуальное считывание,
нестабильные результаты
Окрашивание на основе связывания окрашенных частиц в виде полосы в области результата (отличается от ИФА/ELISA)
© ЗАО «Биоград», 2011г.

2. Иммуноферментные
Принцип анализа, Чувствительность и специфичность, соответствующие классическому ИФА
Стабильность результата в течение лет
Окрашивание на основе каталитической ферментативной реакции (так же, как в классическом ИФА/ELISA и иммуноблотах)
© ЗАО «Биоград», 2011г.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Типовой состав набора ИммуноКомб
1. Проявочная ванна (3 шт)
2. Пластиковый гребень в алюминиевом пакете (3 шт)
3. Положительный и отрицательный контрольные образцы
4. Перфоратор
______________
5. Шкала КомбСкейл

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Схема постановки анализа
6. Результат анализа в виде окрашенных точек.
Верхняя точка: внутренний контроль. Нижняя точка и (или) средняя точки появляются в случае наличия антител или антигенов.
1. Для индивидуального тестирования гребень можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов.
2. В ряд А проявочной ванны вносятся образцы (сыворотка, плазма или цельная кровь) и контроли.
3. Гребень вставляется в ряд А и инкубируется (реакция антиген-антитело).
4. Гребень перемещается из ряда в ряд проявочной ванны в соответствии с инструкцией (промывки и связывание с конъюгатом).
5. Цветная реакция в ряду F.

Иммуноферментные бесприборные тест-системы
Особенности Иммуноферментных бесприборных тест-систем ИммуноКомб:
Чувствительность и специфичность,
соответствующая классическому ИФА
Внутренний контроль в каждом тесте (верхняя точка)
Положительный и отрицательный контроли поставляются в составе набора
Отдельные точки для разных маркеров – одновременная постановка нескольких маркеров
Визуальное или автоматическое считывание результатов (на приборе КомбСкан)
Стабильность окраски результатов
© ЗАО «Биоград», 2011г.

Санитарно-эпидемиологические правила
СП 3.1.5.2826-10 "Профилактика ВИЧ-инфекции" устанавливают следующее требование:
«4.8.2. Каждое исследование на ВИЧ с применением простых/быстрых тестов должно сопровождаться обязательным параллельным исследованием той же порции крови классическими методами ИФА, ИБ.»
Иммуноферментные тесты ИммуноКомб позволяют поставить полноценный ИФА, поэтому повтор не требуется.
© ЗАО «Биоград», 2011г.

Иммуноферментные бесприборные тест-системы
ИммуноКомб II HIV 1&2 Bispot – скрининговый, 36 мин
Полноценный ИФА за 36 минут
ИммуноКомб II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab – АГ-АТ, 84 мин
ИФА четвертого поколения (антиген-антитело)
Дифференцированный результат по антителам и антигену p24
ИммуноКомб II HIV 1&2 CombFirm – подтверждающий (иммуноблот), 66 мин
Рекомбинантный иммуноблот (подтверждающий тест)
Определяет антитела к 5 различным антигенам ВИЧ (Для каждого анализа используется по 2 зубца)
© ЗАО «Биоград», 2011г.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Результаты испытаний тест-систем на сероконверсионной панели HIV 9017, Bioclinical Partners, США
ИФА(ELISA) планшетные тест-системы
(Данные производителя панели)
Отчет о сравнительных испытаниях диагностических иммуноферментных тест-систем для
выявления антител к ВИЧ, разрешенных к применению в РФ, МЗ РФ 22.03.04, таблица 24
№
образца
Дата
забора
образца
Abbott
AxSYM
Anti-
HIV1/2
Organon
Vironostika
HIV Uni-Form
II Ag/Ab
Roche
Enzymum
-Test
HIV Combi
Abbott
Architect
HIV Ag/Ab
Combo
Serodia
HIV-1/2,
ИХА
ИммуноКомб II
ВИЧ 1+2 БиСпот,
ИФА
Genie II
HIV-1/HIV-2,
ИХА
Детермин
ВИЧ ½,
ИХА
Ретрочек
ВИЧ
ИХА
1
26.12.97
0,31
0,47
0,23
0,74
-
-
-
-
-
2
29.12.97
0,31
0,50
0,23
0,19
-
-
-
-
-
3
02.01.98
0,39
0,48
0,25
-
-
-
-
-
-
4
05.01.98
0,40
0,52
0,25
0,15
-
-
-
-
-
5
09.01.98
0,68
0,57
0,31
-
-
-
-
-
-
6
12.01.98
0,93
0,69
0,57
0,43
-
+
-
-
-
7
16.01.98
1,01
0,62
1,40
1,12
-
+
-
-
-
8
19.01.98
1,43
0,80
1,96
1,58
-
+
-
-
-
9
23.01.98
2,23
1,08
3,17
2,88
-
+
-
-
+
10
27.01.98
3,51
1,45
3,39
-
+
+
+
+
+
11
30.01.98
4,12
1,70
4,43
5,16
+
+
+
+
+

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Результаты испытаний тестов
Иммуноферментные тесты Иммунокомб II HIV 1&2 Bispot выявили антитела к ВИЧ на 11-15 дней раньше, чем экспресс-тесты, основанные на принципе иммунохроматографии.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Первый в мире бесприборный тест 4 поколения (АГ-АТ)
ИммуноКомб II HIV 1&2 TriSpot Ag-Ab – АГ-АТ, 84 мин
ИФА четвертого поколения без дополнительного оборудования
Дифференцированный результат по антителам и антигену p24 – результат более информативен, чем в совмещенных тестах, что позволяет интерпретировать статус инфекции на ранних стадиях

Алгоритм тестирования
(СП 3.1.5.2826-10)
«4.4.2. На втором этапе (референс-лаборатория).
Первично положительная сыворотка повторно исследуется в ИФА во второй тест-системе другого производителя, отличающейся от первой по составу антигенов, антител или формату тестов, выбранной для подтверждения. При получении отрицательного результата сыворотка повторно исследуется в третьей тест-системе другого производителя, отличающейся от первой и второй по составу антигенов, антител или формату тестов. В случае получения отрицательного результата (во второй и третьей тест-системах) выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ. »
…
© ЗАО «Биоград», 2011г.

Подтверждение скрининговых исследований
ИммуноКомб II HIV 1&2 CombFirm – подтверждающий (иммуноблот), 66 мин
Рекомбинантный иммуноблот (подтверждающий тест)
Определяет антитела к 5 различным антигенам ВИЧ (Для каждого анализа используется 2 зубца)
© ЗАО «Биоград», 2011г.

© ЗАО «Биоград», 2011г.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
ИммуноКомб II ВИЧ 1+2 КомбФирм
ImmunoComb® II HIV 1&2 CombFirm
Время анализа – 1 час
Не требует разведения реагентов
(реагенты готовы к применению)

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Тест ИммуноКомб КомбФирм разрешен для подтверждения наличия антител к ВИЧ (приказ МЗ РФ № 292 от 30.07.2001).
Результаты мультицентровых испытаний (Израиль, Франция, Бельгия, Бразилия, Сенегал)
* - включая 15 положительных по ВИЧ-1 группы О
Без учета неопределенных:
чувствительность 100%,
специфичность 100%

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Технология ИммуноКомб позволяет диагностировать широкий спектр инфекций: ВИЧ, HTLV, Гепатиты А, В, С, ЦМВ, Токсоплазмоз, Хламидиоз, Краснуху, Хеликобактериоз, тропические инфекции.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Тест-системы для определения Гепатитов А, В и С
ИммуноКомб II HBsAg 90’
ИммуноКомб II Anti-HBs
ИммуноКомб II HBc IgG
ИммуноКомб II HCV
ИммуноКомб II HAV IgM
ИммуноКомб II HAV Ab

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Испытания ВОЗ БПТ для выявления HBs Ag

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Испытания ВОЗ БПТ для выявления HBs Ag на сероконверсионных панелях
Панель
Обнаружение HBs Ag, дней с момента забора первого образца
ИммуноКомб
ИФА
Экспресс тесты
(иммунохроматографи-
ческие
и агглютинационные)
ELISA
референс-тесты
PHM 901 (BBI)
0
8-16
2-8
PHM 902 (BBI)
57
85-88 и более
71-73
PHM 903 (BBI)
14
17 и более
14
PHM 907 (BBI)
50
57-64
50
PHM 910 (BBI)
42
46-49 и более
35-42

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Агглютационные, мембранные и иммунохроматографические тесты, обеспечивающие короткое время получения результата (15мин), менее чувствительны и специфичны на образцах сероконверсионных панелей, чем Иммуноферментные бесприборные тест-системы ИммуноКомб, основанные на иммуноферментном твердофазном анализе.

© ЗАО «Биоград», 2011г.
Тесты ИммуноКомб сертифицированы СЕ и широко используются более чем в ста странах мира. Как достоверные, высокочувствительные и специфичные тесты ИммуноКомб отобраны для программ ВОЗ, UNAIDS, Красного Креста, допущены FDA (США) для поставок по специальным программам фонда Клинтона.