Индукция толерогенных свойств дендритных клеток мышей линий BALB/C и C57BL/6

Дендритные клетки, обладающие толерогенными свойствами (толДК), осуществляют ведущие процессы поддержания иммунного гомеостаза, благодаря способности индукцировать иммунологическую толерантность, механизмы которой связаны с генерацией Т-регуляторных клеток, индукцией анергии или апоптоза Т-клеток.

ТолДК имеют потенциал для использования в качестве терапии аутоиммунных заболеваний и трансплантационных осложнений. Представлено множество работ, описывающих особенности толДК, их функционал и фенотипические особенности. Разработаны различные методы культивации, генерации толДК, способы их модификации (пр. электропорация плазмидами) для индукции их толерогенных свойств.
АКТУАЛЬНОСТЬ

ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Индукция и сравнение толерогенных свойств дендритных клеток, выделенных от мышей линий BALB/C и C57BL/6

ЗАДАЧИ РАБОТЫ
Выделение ДК у мышей линий BALB/C и C57BL/6, трансфекция ДК pIL-10
Оценка продукции IL-10 и индукции Treg в совместной культуре ДК и аутологичных спленоцитов

Модель исследования
Выделение ДК из костного мозга мышей C57BL/6 и BALB/c, посадка в питательную среду
СО2 – инкубатор
при Т 37,0 °C
Оценка клеточной культуры, смена питательной среды
СО2 – инкубатор
при Т 37,0 °C
3 суток
3 суток
Оценка клеточной культуры
Проведение магнитной трансфекции pIL-10
СО2 – инкубатор
при Т 37,0 °C
1 сутки
Выделение аллогенных спленоцитов, ссаживание культур ДК и спленоцитов
СО2 – инкубатор
при Т 37,0 °C
3 суток
Исследования уровня IL-10 и содержания индуцированных Treg в смешанных культурах (ДК+спленоциты )
Обработка и оценка полученных результатов

Содержание IL-10 в кондиционной среде совместных культур

Содержание Treg в культурах клеток

Вывод:
Дендритные клетки мышей линии C57BL/6 интенсивнее демонстрируют толерогенные свойства, чем клетки линии BALB/c, в заданных условиях, при модификации их pIL-10.