Классификация методов хроматографии

По принципу
фракционирования
Классификация методов хроматографии
По способу
элюирования
По расположению
неподвижной фазы
Аффинная
хроматография
Гель-
фильтрация
Ионообменная
хроматография
Распределительная
хроматография
Осадочная
хроматография
Адсорбционная
хроматография
Комплексообразовательная
хроматография
Катионообменная
хроматография
Анионообменная
хроматография
Вытеснительная
хроматография
Элюентная
хроматография
Фронтальная
хроматография
Колоночная
хроматография
Хроматография
в толстом слое
Тонкослойная
хроматография
Бумажная
хроматография

Ввод образца
Стадия 1
Стадия 2
Стадия 3
На одной колонке можно разделить несколько веществ

Высокоэффективная жидкостная хроматография
Детектор
ВЭЖХ
ПК
Источник
подвижной
фазы
Насос высокого давления
Ввод пробы

Хроматографическое разделение в ВЭЖХ

Пример хроматограммы ВЭЖХ аминокислот

Система высокоэффективной жидкостной хроматографии
PE 200 Series (PerkinElmer, США)

Детекторы в ВЭЖХ
Рефрактометрический
УФ-детектор
Детектор на диодной матрице
Флуоресцентный
Электрохимический
Масс-спектрометрический

Схема ионного хроматографа
Подвижная фаза (электролит с
низкой электропроводностью)
Насос
Ввод пробы
Колонка
Детектор по электро-
проводности

Ion chromatogram of a mixture of cations.
Ion chromatogram of a mixture of anions.
Ионные хроматограммы смесей катионов и анионов

Ионный хроматограф PIA 1000

Антиген
Антитело к гамма-интерферону (анаферон)
Неспецифичное антитело
Инертная матрица
Неспецифичный белок
Аффинная хроматография
гамма-интерферона

Гель-фильтрация или эксклюзионная хроматография - разновидность хроматографии, в ходе которой молекулы веществ разделяются по размеру за счёт их разной способности проникать в поры неподвижной фазы (геля). Первыми выходят из колонки наиболее крупные молекулы, способные проникать в минимальное число пор неподвижной фазы. Последними выходят вещества с малыми размерами молекул, свободно проникающие в поры.
Время
Аналитический сигнал

Gel-filtration chromatogram for glucose(G), fructose(F), and sucrose(S) in canned juices.
Gel-permeation separation of components in an epoxy resin.
1. Гель-хроматограммы глюкозы (G), фруктозы (F) и сукрозы (S), содержащихся в соках.
2. Гель-хроматограмма компонентов эпоксидной смолы.
Апельсин
Клюква
Яблоко
Ананас
Стандарт
Ввод
1
2

Принципиальная схема газового хроматографа
Газ-носитель (азот или гелий)
Ввод образца
Колонка
Пламенно-ионизационный детектор (ПИД)
Воздух
Водород

Газовая хроматограмма смеси веществ

Детекторы в газовой хроматографии

Пламенно-ионизационный детектор
Водород
Воздух
Газ-носитель (из колонки)
Платиновый капилляр
Электрод
Керамический диск
Тефлоновая мембрана
Пламя
Выход газа
Коаксиальный кабель
Ионы

Электроно-захватный
детектор (ДЭЗ)

Требования к детекторам в ГХ

Классификация методов газовой хроматографии

Газо-адсорбционная хроматография
Газ-носитель:
He, Ar, H2, CO2, N2, воздух, H2O-пар, органические пары и др.
Неподвижная фаза – свойства зависят от природы, способа приготовления и обработки.
Al2O3, силикагели, синтетические цеолиты, активные угли, термическая сажа, пористые полимеры, неорганические соли, углеродные молекулярные сита, модифицированные сорбенты и др.

Скорость переноса разделяемых компонентов в колонке зависит от их сродства к неподвижной фазе. Чем выше адсорбционная способность, тем медленнее скорость переноса разделяемых компонентов.
Область над кривой соответствует массе вещества, адсорбирован-ного на неподвижной фазе
Концентрация вещества
в газовой фазе
Газ-носитель
Разделение компонентов в газо-адсорбционной хроматографии

Требования к подвижной фазе в газо-адсорбционной хроматографии

Требования к неподвижной фазе в газо-адсорбционной хроматографии

Недостатки сорбентов

Колонки в газо-жидкостной хроматографии
Набивная колонка

Неподвижные фазы в газо-жидкостной хроматографии

Хроматограмма следов алкоголя в крови

Капиллярная ГЖХ

Преимущества капиллярных колонок

Полиамидное
покрытие
Кварц
Полиамидное
покрытие
Кварц
Неподвижная фаза
Конструкция капиллярных колонок

Хроматограммы двух образцов горючего, полученные на капиллярной колонке 30 м х 0,53 мм с НЖФ DB-5
Кондиционное горючее
Некондиционное горючее