Анализ современных методов, используемых для идентификации микроорганизмов и определения их видовой принадлежности

Идентификация

Биохимические методы

Иммунохимические методы

Реакция связывания комплемента (РСК)
Рисунок 1. Схема постановки РСК

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Рисунок 2. Схема постановки РИФ

Иммуноблотинг
Рисунок 4. Схема имунноблотинга
1- нанесение на активированную бумагу или нитроцеллюлознцю мембрану,
2 – добавление сыворотки больного,
3 – отмывка и нанесение сыворотки меченной ферментом,
4 - добавление хромогенного субстрата

Молекулярно-генетические методы
ПЦР
Разделение ДНК
(94-95°С)
Присоединение комплементарных праймеров к одноцепочечной ДНК
(40-65°С)
Денатурация
Достраивание Taq-полимеразой второй цепи ДНК
(72°С)

Лигазная цепная реакция (ЛЦР)
Денатурация ДНК
и отделение лигированного продукта от матрицы (+95°С )
Присоединение комплементарных олигонуклеотидов к одноцепочечной ДНК - лигирование (+65°С)
Охлаждение
Нагрев

Метод ДНК-зондирования
Три стадии проведения анализа:
- гибридизация зонда образует с участком ДНК

Метод мультилокусного секвенирования-типирования

Геномная «дактилоскопия»
выявление (с помощью рестрикционно анализа и последующей гибридизации со специфическими зондами) в генетическом материале уникальных по структуре повторяющихся участков ДНК, характерных для данного организма.
Разная локализация и разное число этих повторов, которые отличаются у особей данного вида и являются их уникальными генетическими характеристиками

Биосенсоры
биологический компонент + преобразователь
+ биосенсорная техника измерения

Бесконтактное определение микроорганизмов
- анализ воздушного пространства над образцом для определения летучих компонентов (ЛК), которые определяют специфический запах бактерий.
Рисунок 5 - Бесконтактная идентификация бактерий
при использовании системы искусственного носа

Заключение