Генетический полиморфизм цитокинов у доношенных новорожденных детей с гипоксическими событиями

АКТУАЛЬНОСТЬ
В структуре причин перинатальной смертности 2-е место занимает гипоксия плода
(Кузнецов П.А., Козлов П.В., 2017 г)
В проведении первичных реанимационных мероприятий в родильном зале нуждается от 0,5% до 2% доношенных новорожденных детей
По данным ВОЗ в 70-80% причинами нервно-психических заболеваний у детей являются перинатальные поражения головного мозга гипоксического генеза
(Шабалов Н.П., 2016 г)

ЦЕРЕБРАЛЬНАЯ ИШЕМИЯ
I
II
III
Возбудимость ЦНС или угнетение не более 5-7 суток
-Возбудимость/угнетение ЦНС, смена фаз церебральной активности более 7 суток
-Судороги
-ВЧ гипертензия
-Вегето-висцеральные расстройства
-Угнетение ЦНС /кома
-Судороги, эпистатус
-Стволовая дисфункция
-Поза декортикации или децеребрации
-ВЧ гипертензия
-Вегето-висцеральные расстройства
-Доброкачественная внутричерепная
гипертензия
- Расстройство вегетативной автономной
нервной системы
-Гиперактивное поведение, гипервозбудимость
- Нарушение (задержка) моторного развития
- Сочетанные формы задержки
- Симптоматические судороги и ситуационно обусловленные пароксизмальные
расстройства
-ДЦП
-Эпилепсия
-Гидроцефалия
- Органические формы нарушений психического развития
Период новорожденности Первый год жизни

ПАТОГЕНЕЗ ГИПОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА
(Терапевтическая гипотермия у новорожденных. Клинические рекомендации, 2019)

ЦИТОКИНЫ
(Utpal S. Bhalala et al, 2015)

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ЦИТОКИНОВ
Гены цитокинов обладают чрезвычайно высокой степенью полиморфизма
(Пузырева Л.В. и др., 2016)
Тесная ассоциация полиморфизма генов с разнообразной патологией ЦНС у новорожденных: церебральная ишемия, ПВЛ
Возможное участие цитокинов в потенцировании воспаления в головном мозге, ведущее к повреждению нервной ткани и предопределяя течение заболевания
(Gabriel ML et al, 2016; Merino ST et al, 2015; Князева А.С., 2015; Chae JW et al, 2016; Xia L et al, 2018; Hu W, 2017 )

Полиморфизм генов цитокинов в группах доношенных новорождённых, которые перенесли гипоксию (хроническую внутриутробную/острую в родах) практически не изучен
В большинстве случаев генетическое исследование проводилось у детей – имеющие неврологические диагнозы
(Gabriel ML et al, 2016; Merino ST et al, 2015; Пузырева Л.В. и др., 2016)
Важна ранняя лабораторная диагностика предрасположенности к патологии ЦНС
ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ ЦИТОКИНОВ

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Выявить частоту генетического полиморфизма цитокинов Ил-1β(С-511Т), Ил-1β(С3953Т), Ил-4(С589Т), Ил6(C174G), Ил-10(C819T), Ил-10(G1082A) у новорождённых с гипоксическими событиями и у детей, не испытывавших гипоксию

Материалы и методы
1 группа (n=48) – дети, перенесшие внутриутробную гипоксию
2 группа (n=80) –
дети, перенесшие асфиксию
3 группа (n=52) –
здоровые доношенные дети
Группы пациентов

Критерии включения
1-я группа:
ХВГП, зафиксированная во время беременности
< 8 баллов по данным кардиотокографии (КТГ) (тахикардия плода, наличие децелераций, монотонный низковариабельный ритм, единичные акцелерации или их отсутствие)
данные биофизического профиля плода (суммарная оценка < 8 баллов)
данные ультразвуковой допплерографии (нарушение маточно-плацентарного кровотока 1В 2 ст.)
2-я группа:
оценка по шкале Апгар 7 баллов и ниже на первой минуте жизни
наличие ацидоза и дефицита оснований
отклонения в неврологическом статусе
Критерии исключения
-недоношенность
-наличие генерализованных инфекций
-наличие хромосомных и генетических заболеваний
-отказ родителей от участия в исследовании

Характеристика детей

Степень тяжести ГИЭ определялась по модифицированной классификации H. Sarnat и M. Sarnat (1976) в модификации
B. Stoll и R. Kliegman (2004)

Неврологический статус группы контроля

Метод исследования
Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени, а также с помощью электрофореза в агарозном геле с последующей визуализацией результата в ультрафиолетовом свете.
Использовались комплекты SNP-наборов, соответствующих заявленному полиморфизму Ил-1β(С-511Т), Ил-1β(С3953Т), Ил-4(С589Т), Ил-6(C174G), Ил-10(C819T), Ил-10(G1082A) (НПФ «Литех», Москва)

Статистическая обработка
Проводили при помощи пакетов программ Microsoft Excel 2010, Statistica 10.0 (StatSoft Inc., США)
Риск развития событий оценивали по отношению шансов (odds ratio (OR)) с расчётом 95% доверительного интервала (ДИ), также использовался критерий χ2
Статистически значимые различия рассматривались при значении уровня p < 0,05

Результаты исследования
Частота аллеля, генотипа ИЛ-1β(С-511Т) в группах исследования
* p<0,05, критерий χ2 , отношение шансов
У детей 1 группы преобладали генотип ТТ (p=0,04) и аллель T Ил-1β(С-511Т) (р = 0,01) по сравнении с группой контроля. Относительная вероятность выявления аллеля Ил-1β-511Т и генотипа Ил1β-511ТТ у детей, перенёсших внутриутробную гипоксию, в сравнении со здоровыми детьми, была выше в 2 раза
У детей 2 группы преобладал аллель T Ил-1β(С-511Т) по сравнению с контрольной группой (p = 0,03)

Результаты исследования
Частота аллеля, генотипа ИЛ-1β(С3953Т) в группах исследования
* p<0,05, критерий χ2 , отношение шансов
В 1 группе исследуемых при изучении полиморфизма гена Ил-1β преобладал аллель T (р = 0,03) в точке С3953Т, в отличие от группы контроля.
Относительная вероятность выявления аллеля Ил-1β-3953Т у детей, перенёсших внутриутробную гипоксию, в сравнении со здоровыми, была выше в 2,33 раза

Результаты исследования
Полиморфные варианты генов Ил-4(С589Т), Ил6(C174G), Ил-10(C819T), Ил-10(G1082A) статистически значимо не различались

Выводы
ВЫВОДЫ