Слайд 2Цель занятия:
выявление полового хроматина
*в ядрах соматических клеток человека:
- слизистой буккального
![Цель занятия: выявление полового хроматина *в ядрах соматических клеток человека: - слизистой](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-1.jpg)
эпителия;
- нейтрофилов крови;
*решение генетических задач;
*скрининг-тесты для генных наследственных обменных болезней человека.
Слайд 3Половой хроматин (тельце Барра) — материал генетически инактивированной X-хромосомы,
в норме выявляемый
![Половой хроматин (тельце Барра) — материал генетически инактивированной X-хромосомы, в норме выявляемый](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-2.jpg)
только в соматических (диплоидных) клетках женщин с кариотипом 46ХХ.
В гранулоцитах половой хроматин выглядит как «барабанная палочка».
Число Х-хромосом у индивида равно числу телец полового хроматина плюс один.
Слайд 4В клетках различных тканей (в различных популяциях) половой хроматин выявляется с неодинаковой
![В клетках различных тканей (в различных популяциях) половой хроматин выявляется с неодинаковой](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-3.jpg)
частотой: 80—90 % нервных клеток содержат половой хроматин,
тогда как в клетках буккального эпителия половой хроматин обнаруживается со средней частотой 20—40 %.
Слайд 5Половой хроматин локализуется в ядре, чаще всего прилегая к ядерной оболочке, с
![Половой хроматин локализуется в ядре, чаще всего прилегая к ядерной оболочке, с](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-4.jpg)
которой он связан тонкими нитями.
Реже он располагается около ядрышка или в середине ядра.
Если половой хроматин прилегает изнутри к ядерной оболочке, он имеет форму треугольника, с вершиной, направленной в сторону центра ядра, или имеет полусферическую форму.
Слайд 6Все организмы, в кариотипе которых
имеются две Х-хромосомы,
содержат одно тельце полового
![Все организмы, в кариотипе которых имеются две Х-хромосомы, содержат одно тельце полового](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-5.jpg)
хроматина.
При трисомии по Х-хромосоме в ядрах клеток содержится по два тельца полового хроматина.
Существует обратная зависимость между пролиферативной активностью клеточной популяции и частотой встречаемости телец полового хроматина.
Слайд 7Объекты исследования Х-хроматина — клетки буккального эпителия, эпителиальные клетки мочевого осадка, нейтрофилы
![Объекты исследования Х-хроматина — клетки буккального эпителия, эпителиальные клетки мочевого осадка, нейтрофилы](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-6.jpg)
крови и др.
В онтогенезе половой хроматин появляется рано, до того, как у эмбриона закладываются гонады.
Слайд 8Изучение полового хроматина используется для верификации хромосомного пола (1),
диагностики хромосомных аберраций
![Изучение полового хроматина используется для верификации хромосомного пола (1), диагностики хромосомных аберраций](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-7.jpg)
по половым хромосомам (2),
для ориентировочного прогноза
пролиферативной активности опухолей (3).
Слайд 9На 5—6-й день эмбрионального развития сначала в клетках трофоэктодермы, затем — в
![На 5—6-й день эмбрионального развития сначала в клетках трофоэктодермы, затем — в](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-8.jpg)
других частях зародыша осуществляется инактивация одной из каждых двух гомологичных хромосом,
включая и одну из двух Х-хромосом у зародышей женского пола.
Слайд 10Механизм этого явления связан с метилированием ДНК инактивируемой хромосомы.
Специальный участок Xq27.3
![Механизм этого явления связан с метилированием ДНК инактивируемой хромосомы. Специальный участок Xq27.3](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-9.jpg)
на Х-хромосоме («островок CpG») содержит множественные цитозин-гуаниновые повторы, которые в геноме эукариот могут метилироваться.
Так, они полностью метилированы в тельце Барра и не метилированы (активны) в единственной мужской Х-хромосоме, как и в активной женской.
Слайд 11
У человека развитие мужского пола предопределено наличием Y-хромосомы.
В присутствии любого количества
![У человека развитие мужского пола предопределено наличием Y-хромосомы. В присутствии любого количества](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-10.jpg)
Х-хромосом одной Y-хромосомы достаточно для формирования организма по мужскому типу.
Слайд 12Ген SRY, находящийся в Y-хромосоме, срабатывает на 6—7-й неделе эмбриогенеза,
запуская в
![Ген SRY, находящийся в Y-хромосоме, срабатывает на 6—7-й неделе эмбриогенеза, запуская в](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-11.jpg)
действие ряд генов, локализованных в других хромосомах и обеспечивающих программу синтеза тестостерона.
Фетальный тестостерон направляет развитие зародыша по мужскому типу.
Слайд 13
Продукция тестостерона и антимюллерова ингибирующего пептида в гонадах плода
предопределяет
(2—3-й месяц
![Продукция тестостерона и антимюллерова ингибирующего пептида в гонадах плода предопределяет (2—3-й месяц](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-12.jpg)
эмбриогенеза) формирование внутренних половых органов по мужскому типу.
Слайд 14 Метаболит андрогенов
(5-альфа-дигидротестостерон),
не конвертируемый в эстрогены,
контролирует маскулинный тип формирования
![Метаболит андрогенов (5-альфа-дигидротестостерон), не конвертируемый в эстрогены, контролирует маскулинный тип формирования наружных](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-13.jpg)
наружных гениталий на 3—4-м месяце фетогенеза (соматический пол).
Часть тестостерона плода метаболизирует в эстрогены.
Слайд 15При наличии Y-хромосомы и высокой продукции тестостерона
обеспечивается высокое содержание метаболитов эстрогенов,
![При наличии Y-хромосомы и высокой продукции тестостерона обеспечивается высокое содержание метаболитов эстрогенов,](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-14.jpg)
подавляющих формирование обратной связи между продукцией лютеинизирующего гормона (ЛГ) и эстрогенов в развивающемся мозге.
Слайд 16Это ведет к установлению мужского нециклического типа гипоталамо-гипофизарной регуляции половых функций
и
![Это ведет к установлению мужского нециклического типа гипоталамо-гипофизарной регуляции половых функций и](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-15.jpg)
обеспечивает на 4—6-м месяце фетогенеза
мужской тип дифференцировки головного мозга,
что лежит в основе нейропсихической маскулинизации в последующей жизни.
Слайд 17Созревание центров секреции гонадотропинов идет под контролем эстрогенов, полученных из тестостерона,
а
![Созревание центров секреции гонадотропинов идет под контролем эстрогенов, полученных из тестостерона, а](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-16.jpg)
центров, определяющих половое влечение, — под совместным контролем андрогенов и их ароматических эстрогенных производных.
Центры, ответственные за поддержание поведения,
соответствующего избранной половой роли,
у мужчин организуются под влиянием
только андрогенов.
Слайд 18При отсутствии гена SRY, даже если кариотип 46ХХ, а не 45X0 (синдром
![При отсутствии гена SRY, даже если кариотип 46ХХ, а не 45X0 (синдром](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-17.jpg)
Шерешевского — Тернера),
описанные события не происходят,
и
формируется
соматический и психический
женский тип.
Слайд 19Под наследственными понимают заболевания с
первичными техническими дефектами в программном аппарате клеток,
![Под наследственными понимают заболевания с первичными техническими дефектами в программном аппарате клеток,](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-18.jpg)
передаваемые
по наследству через гаметы.
Слайд 20Моногенные наследственные заболевания контролируются одним геном и поэтому наследуются в соответствии с
![Моногенные наследственные заболевания контролируются одним геном и поэтому наследуются в соответствии с](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-19.jpg)
законами Менделя (например, гемофилия А).
Полигенные наследственные болезни контролируются суммарным эффектом нескольких генов, расположенных в разных частях генома и имеющих неодинаковые свойства.
Слайд 21Полигенные наследственные болезни наследуются по
аддитиво-полигенному типу, как правило, с пороговым эффектом
![Полигенные наследственные болезни наследуются по аддитиво-полигенному типу, как правило, с пороговым эффектом](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-20.jpg)
по воздействию того или иного лимитирующего фактора внешней среды (например, сахарный диабет).
Слайд 22Важно помнить, что мутации, хотя и лежат в основе патогенеза наследственных болезней,
![Важно помнить, что мутации, хотя и лежат в основе патогенеза наследственных болезней,](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-21.jpg)
но не тождественны самому понятию «наследственная болезнь».
Для возникновения наследственных болезней -как и для возникновения других заболеваний - необходимо действие причинных факторов и существенно влияние условий и реактивности организма.
Слайд 23Работа 1.
Определение полового хроматина в соскобе
со слизистой полости рта
![Работа 1. Определение полового хроматина в соскобе со слизистой полости рта](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-22.jpg)
Слайд 24Перед взятием соскоба со слизистой щеки несколько раз зубами сжать слизистую, затем
![Перед взятием соскоба со слизистой щеки несколько раз зубами сжать слизистую, затем](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-23.jpg)
проглотить слюну и шпателем сделать соскоб с данного места слизистой щеки.
Полученный материал перенести на предметное стекло и размазать по стеклу.
Слайд 25Не давая материалу подсохнуть, наносят на мазок 1—2 капли 1 % уксуснокислого
![Не давая материалу подсохнуть, наносят на мазок 1—2 капли 1 % уксуснокислого](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-24.jpg)
орсеина.
При отсутствии орсеина окраску можно производить 0,2—0,5 % раствором толуидиновой
(или метиленовой) синьки или азура 1, имеющими рН 4,5—4,7.
Слайд 26Через 1—2 мин на мазок накладывается покровное стекло, а поверх него —
![Через 1—2 мин на мазок накладывается покровное стекло, а поверх него —](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-25.jpg)
кусочек фильтровальной бумаги, сложенной в 4 раза. Большим пальцем прижимают фильтровальную бумагу и покровное стекло к предметному стеклу.
Таким образом достигается равномерное распределения клеток эпителия в один слой.
Слайд 28Слева: клетки буккального эпителия. Красная стрелка указывает на глыбку полового хроматина (тельце
![Слева: клетки буккального эпителия. Красная стрелка указывает на глыбку полового хроматина (тельце](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-27.jpg)
Барра).
Справа: Ядро фибробласта женщины, окрашенное флуоресцентным красителем. Стрелками указано тельце Барра
Слайд 29Работа 2. Нахождение Х-хроматина в нейтрофилах крови человека
Окрашенный мазок крови просматривают под
![Работа 2. Нахождение Х-хроматина в нейтрофилах крови человека Окрашенный мазок крови просматривают](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-28.jpg)
иммерсионным увеличением, внимательно изучают сегментоядерные нейтрофилы и отыскивают 100 нейтрофилов, отмечая количество клеток, содержащих Х-хроматин — «барабанные палочки».
В протоколе:
а) нарисовать нейтрофилы, содержащие Х-хроматин («барабанные палочки»);
б) подсчитать частоту встречаемости нейтрофилов,
содержащих «барабанные палочки».
Слайд 32
Ход анализа полового хроматина:
1. Получение клеточного материала.
Источник – разнообразные ткани, но
![Ход анализа полового хроматина: 1. Получение клеточного материала. Источник – разнообразные ткани,](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-31.jpg)
предпочтительны те, что не нужно культивировать in vitro.
Для определения Х-хроматина у взрослого человека используют чаще всего мазки со слизистой оболочки щеки, реже слизистой оболочки влагалища, а также клетки волосяных фолликулов.
Перинатальная диагностика проходит с использованием амниотических клеток.
Для определения численности У-хроматина используется перечисленные ткани, а также сперматозоиды и культивируемые лимфоциты.
В целом для анализа Х-хроматина и У-хроматина идеально подходят однослойные культуры клеток, обычно фибробластов.
Слайд 332. Фиксация препаратов раствором метанола или смесью этанола и уксусной кислоты (3:1)
![2. Фиксация препаратов раствором метанола или смесью этанола и уксусной кислоты (3:1)](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-32.jpg)
или исключительно этанолом.
3. Дегидратация путем переноса (ТОЛЬКО для анализа телец Барра) препарата из одного раствора в другой с выдержкой в каждом в течение 5 минут: в спирте 70°, в спирте 50°, в дистиллированной воде I, в дистиллированной воде II.
4. Гидролиз (ТОЛЬКО для анализа телец Барра) в НСl (необязательно).
Слайд 345. Окрашивание полового хроматина.
Методы окраски X- и Y-хроматина различны. Х -
![5. Окрашивание полового хроматина. Методы окраски X- и Y-хроматина различны. Х -](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-33.jpg)
хроматин окрашивается препаратами на основе нефлюоресцирующих красителей: основной фуксин, тионин, ацетоорсеин, толуидиновый синий и др. У – хроматин окрашивается флюорохромами — производными акридинового оранжевого: акрихином, акрихин-ипритом, акрихин-пропилом.
Препараты выдерживаются в краситиле от 30 минут до 12 часов.
Препараты Х-хроматина высушивают и изучают с масляной иммерсией в проходящем свете.
Препараты У-хроматина заключают в специальный буферный р-р и изучают в ультрафиолетовом свете с помощью люминесцентного микроскопа.
Анализ проводят на разъединенных, распластанных клетках.
Срезы тканей для определения полового хроматина используют лишь тогда, когда невозможно получить мазки или препараты-отпечатки среза органа.
Слайд 35Работа 3. Скрининг-тесты наследственных обменных болезней человека
А. Определение фенилаланина в моче человека
![Работа 3. Скрининг-тесты наследственных обменных болезней человека А. Определение фенилаланина в моче](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-34.jpg)
(проба И. А. Феллинга)
К пробе мочи (2 мл) добавить 6 капель 10 % раствора хлорного железа.
Появление сине-зеленого окрашивания мочи указывает на положительный результат пробы (реакция положительна при содержании фенилаланина в моче более 15 мг %).
Слайд 36Фенилкетонурия (ФКУ) – это нарушение метаболизма аминокислот, приводящее к возникновению клинического синдрома умственной
![Фенилкетонурия (ФКУ) – это нарушение метаболизма аминокислот, приводящее к возникновению клинического синдрома](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-35.jpg)
отсталости с когнитивными и поведенческими расстройствами, вызванными повышенным уровнем фенилаланина.
Наследуется аутосомно-рецессивно.
Слайд 38 фенилаланин – незаменимая аминокислота, строительный блок белков.
При фенилкетонурии (наследстевнная ферментопатия, дефект
![фенилаланин – незаменимая аминокислота, строительный блок белков. При фенилкетонурии (наследстевнная ферментопатия, дефект](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-37.jpg)
гена РАН (12q23.2; ген фенилаланингидроксилазы)
нарушено нормальное превращение фенилаланина в тирозин как результат недостатка фенилаланингидроксилазы
(A.Folling,1934, 98%),
фенилаланин накапливается в крови и превращается в фенилпировиноградную кислоту = нейротропный яд.
➤ судорожный синдром, олигофрения (фенилпировиноградная олигофрения).
Слайд 39При своевременной диагностике можно полностью избежать патологических изменений, если с рождения и
![При своевременной диагностике можно полностью избежать патологических изменений, если с рождения и](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-38.jpg)
до полового созревания ограничить поступление в организм фенилаланина с пищей.
Позднее начало лечения хотя и даёт определённый эффект, но не устраняет развившихся ранее необратимых изменений ткани мозга.
Слайд 40При рождении ребёнка в роддомах
на 3—4 сутки берут анализ крови и проводят неонатальный скрининг для
![При рождении ребёнка в роддомах на 3—4 сутки берут анализ крови и](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-39.jpg)
обнаружения врождённых заболеваний обмена веществ.
На этом этапе возможно обнаружение фенилкетонурии и
возможно раннее начало лечения для предотвращения необратимых последствий.
Слайд 41В. Определение гомогентизиновой кислоты в моче человека (проба А. Гаррода)
К 0,5 мл
![В. Определение гомогентизиновой кислоты в моче человека (проба А. Гаррода) К 0,5](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-40.jpg)
мочи больного алкаптонурией добавить
5 мл 5 % раствора азотнокислого серебра и несколько капель 10 % раствора аммиака. Появление черного окрашивания указывает на положительный результат пробы
(наличие в моче гомогентизиновой кислоты).
Слайд 42Алкапто́нури́я — наследственное заболевание, обусловленное выпадением функций оксидазы гомогентизиновой кислоты и характеризующееся расстройством обмена тирозина и экскрецией с
![Алкапто́нури́я — наследственное заболевание, обусловленное выпадением функций оксидазы гомогентизиновой кислоты и характеризующееся](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-41.jpg)
мочой большого количества гомогентизиновой кислоты.
На примере алкаптонурии сэр Арчибальд Эдвард Гаррод в 1909 году разработал концепцию метаболического блока.
Слайд 43Концепция метаболического блока de facto основана на принципе
«один ген - один
![Концепция метаболического блока de facto основана на принципе «один ген - один](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-42.jpg)
фермент - один признак (симптом)»
(принцип Бидла - Тейтама).
Слайд 44Согласно концепции метаболического блока, при наследственном заболевании имеется дефицит белка-фермента.
Это ведет
![Согласно концепции метаболического блока, при наследственном заболевании имеется дефицит белка-фермента. Это ведет](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-43.jpg)
к нарушению определенной биохимической реакции.
Создается избыток вовлеченного в эту реакцию субстрата.
Часть его может выделяться из организма или откладываться в тканях
(«болезни накопления» или тезаурисмозы ).
Слайд 45
Избыток субстрата может вовлекаться в альтернативные превращения, давая такие продукты, которые отсутствуют
![Избыток субстрата может вовлекаться в альтернативные превращения, давая такие продукты, которые отсутствуют](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-44.jpg)
или имеются лишь в виде следов в норме.
Помимо избытка субстрата и действия альтернативных продуктов ( которые могут быть токсическими), часть симптомов наследственных болезней порождается нехваткой конечных продуктов блокированной реакции и подавлением реакций, следующих в цепи превращений за блокированным этапом.
Слайд 46Помимо избытка субстрата и действия альтернативных продуктов
( которые могут быть токсическими),
![Помимо избытка субстрата и действия альтернативных продуктов ( которые могут быть токсическими),](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-45.jpg)
часть симптомов наследственных болезней порождается
нехваткой конечных продуктов блокированной реакции и подавлением реакций, следующих в цепи превращений за блокированным этапом.
Слайд 47Современная трактовка принципа Бидла-Тейтама и положений Гарода о метаболическом блоке сильно изменилась
![Современная трактовка принципа Бидла-Тейтама и положений Гарода о метаболическом блоке сильно изменилась](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-46.jpg)
по сравнению с оригинальной, поскольку появилось много новых данных, не укладывающихся в классическую схему:
1. Не все гены кодируют белки. Некоторые из них кодируют транспортные и рибосомальные РНК.
Слайд 482. Не все белки, кодируемые генами - ферменты.
Множество наследственных болезней не
![2. Не все белки, кодируемые генами - ферменты. Множество наследственных болезней не](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-47.jpg)
связано с дефектом какого бы то ни было фермента, так как при них поражаются гены, кодирующие неэнзиматические белки.
Слайд 493. Один белок кодируется чаще всего не одним геном, а несколькими, причем
![3. Один белок кодируется чаще всего не одним геном, а несколькими, причем](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-48.jpg)
каждый ответственен за структуру одного полипептида в составе белка.
4. Гены в генотипах взаимодействуют, и, в силу этого, существует явление плейотропии - множественного действия гена.
Слайд 50Алкаптонурия возникает вследствие мутации гена, кодирующего синтез оксидазы гомогентезиновой кислоты.
Данная патология характеризуется
аутосомно-рецессивным
типом
![Алкаптонурия возникает вследствие мутации гена, кодирующего синтез оксидазы гомогентезиновой кислоты. Данная патология](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-49.jpg)
наследования.
Алкаптонурией чаще болеют мужчины.
Ген оксидазы гомогетинзиновой кислоты человека (HGD) локализован на длинном плече
3 хромосомы человека (3q 21-23).
Слайд 51В нормальных условиях гомогентизиновая кислота — промежуточный продукт распада тирозина и фенилаланина
![В нормальных условиях гомогентизиновая кислота — промежуточный продукт распада тирозина и фенилаланина](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-50.jpg)
— переводится в малеилацетоуксусную кислоту,
из которой в конечном счёте образуются фумаровая и ацетоуксусная кислоты, вступающие в другие биохимические циклы.
Слайд 52Из-за дефекта фермента этот процесс тормозится, и остающаяся в избытке гомогентизиновая кислота
![Из-за дефекта фермента этот процесс тормозится, и остающаяся в избытке гомогентизиновая кислота](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-51.jpg)
превращается полифенолоксидазой в хиноновый полифенол (алкаптон или бензохинонацетат), который и выводится почками.
Слайд 53Алкаптон - если он не полностью экскретируется с мочой - откладывается в
![Алкаптон - если он не полностью экскретируется с мочой - откладывается в](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-52.jpg)
хрящевой и другой соединительной ткани,
обусловливая их потемнение и повышенную хрупкость.
Чаще всего первой появляется пигментация склер и ушных хрящей.
Радикального лечения нет, используется симптоматическая терапия и большие дозы аскорбиновой кислоты.
Слайд 54Г. Определение меди в моче человека
Пробу мочи больного гепатоцеребральной дистрофией (болезнь Вильсона
![Г. Определение меди в моче человека Пробу мочи больного гепатоцеребральной дистрофией (болезнь](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-53.jpg)
— Коновалова) нанносят на фильтровальную бумагу и высушивают.
На высушенную пробу мочи наносят каплю реактива (непосредственно перед постановкой реакции
растворить в 5 мл ацетона 0,1 г ортотолуидина и 0,5 г роданистого аммония).
Появление в течение 30 сек синего окрашивания указывает на положительный результат
(экскреция меди повышена).
Слайд 55Болезнь Вильсона — Коновалова (Гепатоцеребральная дистрофия, гепатолентикулярная дегенерация, болезнь Вестфаля — Вильсона) —
наследственное
![Болезнь Вильсона — Коновалова (Гепатоцеребральная дистрофия, гепатолентикулярная дегенерация, болезнь Вестфаля — Вильсона)](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-54.jpg)
нарушение метаболизма меди, приводящее к тяжелейшим поражениям центральной нервной системы и внутренних органов.
Слайд 56Диагностируется у 5-10 % больных циррозом печени дошкольного и школьного возраста. Заболевание
![Диагностируется у 5-10 % больных циррозом печени дошкольного и школьного возраста. Заболевание](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-55.jpg)
передаётся аутосомно-рецессивно.
Ген ATP7B, мутации которого вызывают заболевание, расположен на 13-й хромосоме (участок 13q14-q21)
Ген кодирует P-тип АТФазы, которая транспортирует медь в желчь и включает её в церулоплазмин.
Слайд 57Аутосомно-рецессивный тип наследования болезни Вильсона.
25 % вероятность рождения больного у родителей-гетерозигот
![Аутосомно-рецессивный тип наследования болезни Вильсона. 25 % вероятность рождения больного у родителей-гетерозигот](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-56.jpg)
Слайд 58Английский невролог Сэмюель Вильсон
( S. Wilson, (1878 - 1937) в 1912 году
описал у больных:
* типичные изменения
![Английский невролог Сэмюель Вильсон ( S. Wilson, (1878 - 1937) в 1912](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-57.jpg)
в головном мозге,
*клинику нового заболевания,
*установил постоянное наличие цирроза печени
* и назвал патологию
прогрессивной лентикулярной дегенерацией
(лат. lenticularis чечевицеобразный).
Слайд 59Было предположено, что ген PRNP
(кодирует прионный белок, активен в головном мозге
![Было предположено, что ген PRNP (кодирует прионный белок, активен в головном мозге](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-58.jpg)
и других тканях)
участвует в транспорте меди.
А вариации в гене PRNP могут изменить течение болезни, увеличивая возраст появления заболевания и влияя на тип симптомов, которые развиваются.
Слайд 60Медь в организме выполняет множество функций.
В основном она является кофактором для
![Медь в организме выполняет множество функций. В основном она является кофактором для](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-59.jpg)
таких ферментов, как
церулоплазмин, цитохром -С-оксидаза,
дофамин бета гидроксилаза, супероксиддисмутаза и тирозиназа.
Медь всасывается из ЖКТ в тонкой кишке: транспортный белок на CMT1 ( Copper Membrane Transporter 1) перемещает медь внутрь клеток.
Слайд 61Часть меди связывается с металлотионеином, а другая — перемещается в аппарат Гольджи с помощью транспортного белка
![Часть меди связывается с металлотионеином, а другая — перемещается в аппарат Гольджи](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-60.jpg)
ATOX1.
В аппарате Гольджи в ответ на повышение концентрации меди
фермент ATP7A ( Copper-transporting ATPase 1)
высвобождает этот элемент через воротную вену в печень.
Слайд 62
В гепатоцитах белок ATP7B
1) связывает медь с церулоплазмином и высвобождает его в
![В гепатоцитах белок ATP7B 1) связывает медь с церулоплазмином и высвобождает его](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-61.jpg)
кровь,
2) удаляет избыток меди с выделяющейся жёлчью.
При болезни Вильсона обе функции ATP7B нарушены.
Медь накапливается в ткани печени; церулоплазмин продолжает выделяться, но с недостатком меди (апоцерулоплазмин)
и быстро разрушается в кровотоке.
Слайд 63Когда меди в печени становится больше,
чем белков её связывающих,
происходит их
![Когда меди в печени становится больше, чем белков её связывающих, происходит их](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-62.jpg)
окислительное повреждение .
Это приводит к гепатиту, фиброзу
и в итоге к циррозу.
Также из печени в кровоток выделяется медь, которая не связана с церулоплазмином.
Эта свободная медь оседает по всему организму, особенно в почках, глазах и головном мозге.
Слайд 64Основную роль в патогенезе играет накопление меди в нервной ткани
(особенно поражены базальные
![Основную роль в патогенезе играет накопление меди в нервной ткани (особенно поражены](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-63.jpg)
ганглии),
почках, печени и роговице и токсическое повреждение медью данных органов.
Нарушение метаболизма выражается в нарушении синтеза и снижении в крови концентрации церулоплазмина.
Слайд 65Церулоплазмин участвует в процессе выведения меди из организма.
В печени формируется крупноузловой
![Церулоплазмин участвует в процессе выведения меди из организма. В печени формируется крупноузловой](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-64.jpg)
или смешанный цирроз.
В почках в первую очередь страдают проксимальные канальцы.
В головном мозге помимо особенно сильного поражения базальных ганглиев, поражаются зубчатое ядро мозжечка и черная субстанция.
Отложение меди в десцеметовой мембране глаза приводит к формированию кольца Кайзера-Флейшера.
Слайд 66Кольца Кайзера-Флейшера:
желтовато-зелёная или зеленовато-коричневая пигментация по периферии роговицы на десцеметовой мембране (задняя пограничная мембрана).
Кольца - отложения меди на
![Кольца Кайзера-Флейшера: желтовато-зелёная или зеленовато-коричневая пигментация по периферии роговицы на десцеметовой мембране](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-65.jpg)
границе роговицы и склеры внутри от лимба роговицы, в первую очередь появляются в форме полулуния на верхнем крае роговицы.
Слайд 67Лечение
Патогенетическое лечение направлено на выведение меди из организма. Для этого применяются комплексообразующие соединения: тиолы, пеницилламин.
![Лечение Патогенетическое лечение направлено на выведение меди из организма. Для этого применяются](/_ipx/f_webp&q_80&fit_contain&s_1440x1080/imagesDir/jpg/1102110/slide-66.jpg)
Лечение пеницилламином сопровождается заметным улучшением состояния больных или даже приводит к полной ликвидации симптомов.
Диета № 5 — с ограничением меди до 1 мг в сутки — исключение шоколада, орехов, сухофруктов, раков, печени, цельной пшеницы.
Препаратом выбора является купренил (пеницилламин), который эффективен в 90 % случаев. Д-пеницилламин или унитиол.