Роль Bacillus cereus в этиологии пищевых отравлений

Представители рода Bacillus:
Bacillus anthracis – сибирская язва
Bacillus cereus
Bacillus mycoides,
Bacillus pseudomycoides,
Bacillus thuringiensis
Bacillus sphaericus

Заболевания связанные с Bacillus cereus
локальные инфекции, особенно в области ожогов, травматических и послеоперационных ран и инфекции глаза;
бактериемия и септицемия
инфекции ЦНС, включая менингиты, абсцессы и инфекции, связанные с шунтированием
респираторные инфекции
эндокардиты и перикардиты
пищевые токсико-инфекции, характеризующиеся токсин-индуцированной рвотой и диареей.

Источники заражения
Диапазон продуктов, из которых могут быть выделены Bacillus cereus, довольно велик: рис, молочные продукты, специи, сушеные продукты и овощи.
Перекрестное загрязнение может привести к распространению спор или вегетативных форм в другие продукты, например мясо.
В период сбора урожая, в областях производства продуктов питания, споры В. сereus могут контаминировать растительное сырье и оборудование, применяемое в пищевой промышленности.
К примеру, во время выпаса крупного рогатого скота споры B. сereus из окружающей среды попадают на вымя коров, вследствие чего клетки B. сereus – часто выделяют из молока, которое приобретает специфический дефект известный как сладкое коагулирование.

Гр(+) крупные палочки
1,0-1,2 х 3,0-5,0 мкм
Эндоспоры
Перитрихиальные жгутики
Бактерии морфологически сходны с Bасillus anthracis, но обладают подвижностью
Морфологические свойства

Культуральные свойства
Рост Bacillus cereus на МПА через 48 часов
Рост B. cereus на кровяном агаре, видна зона гемолиза

Рост B. cereus на среде с полимиксином B
и ТТХ
Рост B. cereus на желточном агаре
Рост B. cereus на среде Донована
Рост B. cereus на полимиксиновой среде

Рост B. cereus на среде Мосселя
Рост B. cereus
на солевом
полимиксиновом
агаре с ТТХ

Факторы патогенности
Фосфолипаза
Гемолизин (HBL)
Негемолитический энтеротоксин (NHE)
Цитотоксин К (CytK)
Рвотный токсин (Cereulide)

Cereulide, рвотный токсин
циклический пептид
[DO -Leu- D-Ala- DO- Val- D-Val ]3
молекулярной масса 1,2 кДа
Синтез Cereulide связан с действием нерибосомальной синтетазы, кодируемой 24-кБ кластером генов cereulide-синтетазы (CES).
Кластер расположен на мегаплазмиде, связанной с pXO1
Синтез не связан со споруляцией

Методы обнаружения
Классический метод
Метод основан на выделении Bacillus cereus из колоний, полученных при поверхностном посеве продукта или его разведения на селективные среды. Принадлежность выделенных колоний к Bacillus cereus определяют по морфологическим и биохимическим свойствам [ГОСТ 10444.8-88].
(Агар Мосселя желточный с маннитом, полимиксином и феноловым красным)
Альтернативные (ускоренные) методы
Один из основных энтеротоксинов B. сereus – НBL состоит из 3-х пептидов (связывающего и двух литических). Детекцию НBL-токсина
методом ИФА используют в качестве критерия токсигенности
исследуемого штамма. Установлено, что от 41 до 49% изолятов Bacillus cereus синтезируют НBL.
Иммунохроматографический экспресс-тест
обнаружение энтеротоксинов
HBL (гемолизин BL) и NHE (негемолитический
энтеротоксин) Bacillus cereus в пищевых продуктах

Выделение Bacillus cereus

Чувствительность к АМП
Процент промежуточной и полной устойчивости р. Bacillus к антимикробным препаратам [20]. (AMX, amoxicillin; AMP, ampicillin; CRO, ceftriaxone; CHL, chloramphenicol; CIP, ciprofloxacin; CLI, clindamycin; CLR, clarithromycin; DAP, daptomycin; ERY, erythromycin; GAT, gatifloxacin; GEN, gentamicin; LVX, levofloxacin; LZD, linezolid; MEM, meropenem; MXF, moxifloxaciAMX, amoxicillin; AMP, ampicillin; CRO, ceftriaxone; CHL, chloramphenicol; CIP, ciprofloxacin; CLI, clindamycin; CLR, clarithromycin; DAP, daptomycin; ERY, erythromycin; GAT, gatifloxacin; GEN, gentamicin; LVX, levofloxacin; LZD, linezolid; MEM, meropenem; MXF, moxifloxacin; OXA, oxacillin; PEN, penicillin; Q/D, quinupristin/dalfopristin; RIF, rifampicin; STR, streptomycin; TET, tetracycline; TGC, tigecycline; SXT, trimethoprim/sulfamethoxazole; VAN, vancomycin.n; OXA, oxacillin; PEN, penicillin; Q/D, quinupristin/dalfopristin; RIF, rifampicin; STR, streptomycin; TET, tetracycline; TGC, tigecycline; SXT, trimethoprim/sulfamethoxazole; VAN, vancomycin.

Заключение:
Bacillus cereus воходит в список 10 основных инфекционных агентов, вызывающих кишечные заболевания людей, наряду с E. coli, Salmonella sp., Shigella sp., Campilobacter sp,. Enterococcus sp., S. aureus и т.д.. По мнению W. Sperber (1991) B. cereus входят в группу из 4-х наиболее опасных микроорганизмов – источников пищевого отравления людей.
В. cereus — спорообразующий аэробный микроорганизм, является постоянным обитателем почвы, в связи с чем он широко распространен в объектах внешней среды.
Установлено, что в развитии В. cereus отсутствует избирательность к отдельным пищевым продуктам. Он в равной мере может размножаться в пищевых продуктах растительного и животного происхождения, не вызывая при этом органолептических изменений.
Основные факторы патогенности Bacillus cereus связаны с выделением разрушающих ткани экзоферментов: гемолизинов, фосфолипаз, токсина вызывающего рвоту (Cereulide) и порообразующихэнтеротоксинов (hBl, nhe, и цитотоксина K).
Сложные и трудоемкие методы лабораторной идентификации B. cereus затрудняют получение исчерпывающей информации об истинной роли вышеуказанного вида в возникновении пищевых отравлений.

Спорообразующая культура, выделенная с разделочной доски