Презентация на тему Физиологические эффекты активных форм кислорода

Основные механизмы образования АФК.

NAD(P)H-оксидазы - главные физиологические
продуценты АФК в клетках сосудов.
NAD(P)H-оксидаза - 4 субъединицы:
цитохром b558: gp91phox и p22phox
2 цитозольных компонента:
р47phox и p67phox.
G-белок rac-семейства участвует в
сборке активного комплекса.
Точно неизвестно, какие субъединицы
функционально активны для производства
АФК в разных типах клеток.

АФК как сигнальные молекулы в ГМК

PDGF
EGF
NIH3T3-клетки (immortalized fibroblasts)

Первичные легочные фибробласты.
TGF-β1

Оксидативная модификация белков как
возможный механизм АФК-опосредованной
передачи сигналов в клетке.
ОМ белков путем окисления Cys-остатков

Образование внутримолекулярных
дисульфидных мостиков

Димеризация белков межмолекулярными
дисульфидными мостиками:
прямая:
обратная:

Образование дитирозиновых связей:
Металл-катализируемое окисление

Методы изучения АФК

DCFH - 2’,7’-дихлорфлуоресцин -
нефлуоресцирующий
DCF - 2’,7’-дихлорфлуоресцеин -
флуоресцирующий

Флуориметрический метод, основанный на
способности гем-пероксидаз катализировать
Н2О2-зависимую димеризацию замещенных
фенольных элементов.
Высокая специфичность и чувствительность
к Н2О2.
Наиболее часто используется пероксидаза хрена.

Электрон-спиновая резонансная спектроскопия -
единственный аналитический метод.