Антигенные системы эритроцитов: системы Резус и Келл, клиническое значение, методики определения резус- и Келл- принадлежности

ЦЕЛЬ ЛЕКЦИИ
Рассмотреть вопросы
структуры и диагностики
антигенной системы Резус

ЗАДАЧИ ЛЕКЦИИ
Дать понятие о свойствах антигенов системы Резус.
Дать понятие антирезусных антител
Рассмотреть современную классификацию фенотипов системы Резус
Получить представление о современных методах диагностики резус принадлежности

Открыта Ландштейнером и Винером в 1940г
кодируется шестью генами Dd, Cc, Ee которые локализуются не 1 – й хромосоме
включает пять антигенов: D Cc, Ee;
ген d аморфный т.е. не образует антигена
Гены системы резус передаются по три от каждого из родителей
Аутосомно – доминантный, не сцепленный с полом тип наследования
Могут быть различные комбинации генов
Н-р: Cde, CDe, cdE итд.
Можно выделить более 50 серологически различных вариантов.

1941Г. Винер открыл антиген с
1942 г. Левиным обнаружены антитела к антигену С
1943г. Винер и Сонн открыли антиген Е
1945 г. обнаружены антитела к антигену е
1946г. Обнаружен антиген сW

Основные концепции наследования антигенов системы Rhesus
американской школы генетиков (A.S. Wiener)
английской (R.F. Fischer)
Концепция Винера
наблюдаемое разнообразие комбинаций антигенов обусловлено наличием на соответствующих хромосомах в едином генном локусе множественных аллелей
Концепция Р.Фишера
предполагает наличие на одной хромосоме трех тесно сцепленных локусов, в каждом из которых имеется не менее двух аллельных генов, обуславливающих существование не менее 8 генных комплексов

Характеристика антигенов эритроцитов системы Резус.
Антигены системы Резус имеют белковую природу. Подтверждением этого является чувствительность антигенов к протеолитическим ферментам.
Антигенные детерминанты расположены на клеточной мембране случайным образом.
Количество антигенных детерминант на эритроцитах человека:
D антигена от 12 до 202 тыс
С антигена-от 37 до 85 тыс.,
Е антигена -от 450 до 25 тыс
е антигена-от 13 тыс. до 24 тыс.

ЗНАЧЕНИЕ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ РЕЗУС
СТРУКТУРНЫЕ БЕЛКИ МЕМБРАНЫ ЭРИТРОЦИТА
УЧАСТИЕ В ОБМЕННЫХ ПРОЦЕССАХ КЛЕТКИ
УЧАСТИЕ В ГАЗОТРАНСПОРТЕ
ОТСУТСТВИЕ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ РЕЗУС СОПРОВОЖДАЕТСЯ НЕПРАВИЛЬНОЙ ФОРМОЙ ЭРИТРОЦИТОВ, СКЛОННОСТЬЮ К ГЕМОЛИЗУ, АНЕМИИ.

Если человек наследует ген D его эритроциты дают положительную реакцию при тестировании с анти - D (Rh +)
Если человек не наследует ген D его эритроциты дают отрицательную реакцию при тестировании с анти - D (Rh -)
фенотип Rh(–) является гомозиготой по рецессивному гену d
гомозигота по доминантному гену (DD) и гетерозигота (Dd) фенотипически не различимы.
Ген D не обладает эффектом дозы: эритроциты генотипов DD и Dd агглютинабельны в одинаковой мере
Антигены системы Резус появляются на 8 неделе внутриутробного развития

Частота встречаемости антигенов системы резус
Северная Европа 85% населения имеют антиген D
Западная Европа 95% населения имеют антиген D
В отдельных областях Китая все люди
имеют D - положительный резус
В России:
D - 85%
c - 80%
C - 70%
E - 30%
е 20%

Связь системы Rh с заболеваниями
Язвенная болезнь желудка – преобладают люди с фенотипом CСDeе
у D-положительных людей выше содержание тироксина
у D-отрицательных - АКТГ и СТГ

ШКАЛА ПРИОРИТЕТА ТРАНСФУЗИОННО ОПАСНЫХ АНТИГЕНОВ ЭРИТРОЦИТОВ
D > c > E > e > CW> C

Антитела системы Резус
В норме антител системы резус быть не должно
Причины иммунизации:
Переливание резус – положительной крови резус – отрицательному реципиенту
Беременность резус – отрицательной женщины резус – положительным плодом
Иммунные
Тепловые
Неполные
Агглютинины
IgG
5 – 10% IgM

Методики определения Резус – принадлежности
Реакция с неполными антителами
- Стандартная сыворотка анти D
- цоликлон анти – D
- унивенсальный реагент анти – D
2. Реакция с полными антителами
цоликлон анти – D – супер

Причины ошибок при исследовании резус-принадлежности
Ложноположительные результаты наблюдаются:
• Ошибочное использование реактива другой специфичности.
• В реактиве, используемом для определения резус-
принадлежности содержатся антитела дополнительной
специфичности (например, анти - К, - С, - Fy и так далее)
• На исследуемых эритроцитах присутствуют
аутоантитела.
• Полиагглютинабельность исследуемых эритроцитов.
• Бактериальное загрязнение крови.

2. Ложноотрицательные результаты
• Ошибочное использование другого реактива
• Недостаточно-высокое качество
используемого реактива
• Ослабление активности антигенов при заболеваниях
• Использование реактива антирезус для метода
исследования, который не указан на этикетке.
• Реактив антирезус не добавлен в исследуемый образец.

• Чрезмерно-интенсивное перемешивание взвеси эритроцитов и реактива при проведении исследования, что приводит к распаду мелких агглютинатов.
• Срок годности используемого реактива истек.

АЛГОРИТМ ПРОВЕДЕНИЯ ГЕМОТРАНСФУЗИИ
Определить показание к гемотрансфузии
2. Получить согласие больного на гемотрансфузию
3. Определить группу крови реципиента
4. Переопределить группу крови из гемакона
5. Провести пробу на совместимость (in vitra)
- на плоскости
- в пробирке
6. Провести пробу на индивидуальную совместимость (биологическая проба) in viva

7. Фиксировать время начала и окончания трансфузии
После окончания гемотрансфузии наблюдать за больным
в течение 2 часов (при отсутствии реакций)
- общий анализ мочи
- АД - 3 раза
- Термометрия - 3 раза
- Суточный диурез
9. Общий анализ крови через 12 часов.
10. Пробирка с кровью реципиента, взятая до трансфузии и гемакон с остатками трансфузионной среды хранятся в холодильнике 2 суток после трансфузии.

Карточка включает
6 пробирок,
заполненных
полиакриламидным
гелем, содержащим
моноклональные
антитела
Принцип метода

Эритроциты
донора
вносятся в
каждую
пробирку
Принцип метода

Принцип метода
Карточки центрифугируются в специальной центрифуге
геометрия ротора соответствует размерам карточек

Принцип метода
Если нет агглютинации
эритроциты опускаются на дно пробирки (-)
Если есть агглютинация – находятся на поверхности или в толще геля
++++
-

Принцип метода