Изучение сезонного биоритма бациллярнококковой трансформации бактерии helicobacter pylori

Helicobacter pylori – спиралевидная граммотрицательная,
микроаэрофильная бактерия,
инфицирующая желудочно-кишечный тракт человека

Нобелевская премия 2005 г по физиологии и медицине
«За открытие бактерии Helicobacter pylori и ее роли в развитии гастрита и язвы желудка»

H.pylori проявляет
бациллярно-кокковый диморфизм

Кокковые формы
жизнеспособны
некультивируемы
сохраняют клеточную структуру
поддерживают метаболизм и экспрессию белков
переносят более широкий диапазон рН
более устойчивы к неблагоприятным факторам и антибиотикам
не утрачивают вирулентность

Наиболее адекватный метод изучения кокковых форм in vivo - иммуноцитохимический,
слишком дорогой и трудоемкий, чтобы войти в повседневную практику

Сезонный характер обострений язвенной болезни может быть связан с активностью бактериальных клеток H.pylori

Цель:
Изучить особенности сезонного колебания показателя «степень обсемененности СОЖ кокковыми формами», и изучение сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации H.pylori в антральном отделе желудка.
Задачи:
1. Создать базу данных эндоскопических диагнозов и результатов иммуноцитохимических анализов, пригодную для последующей аналитической обработки.
2. Определить характер распределения пациентов по показателю «частота встречаемости кокковых форм в СОЖ».
3. Провести контрольное ИЦХ исследование гастробиоптатов методом ЖЦ на предмет присутствия в них истинных кокковых форм, а так же определить частоту их встречаемости среди всех бактериальных клеток H.pylori .
4. Изучить и представить графически сезонные колебания показателя «степень обсемененности СОЖ кокковыми формами».

5422 пациента,
обследованных ИЦХ-методом на хеликобактериоз,
2002-2009 гг

Эндоскопические диагнозы
Хронические состояния (1): хронический гастрит, хронический диффузный гастрит, поверхностный диффузный гастрит, хронический антральный гастрит, очаговый гастрит, поверхностный гастрит, хронический дуоденит, хронический бульбит, культи желудка, полипы желудка и пищевода, хронический атрофический диффузный гастрит, зарубцевавшаяся язва, рубцевая деформация ЛДПК
Уже не хронические, но еще и не эрозивные (2): катаральный бульбит, очаговый бульбит, поверхностный бульбит, рефлюкс-эзофагит, катаральный эзофагит, острый эзофагит, пищевод Баррета, ГЭРБ, хронический рефлюкс-гастрит, хронические эрозии.
Эрозивные состояния (3): эрозии желудка, эрозивный бульбит, эрозивный гастрит, эрозивный дуоденит, эрозивный эзофагит, эрозии 12-перстной кишки, острые эрозии желдка, острые эрозии 12-перстной кишки.
Язвенные состояния (4): язва желудка, язва 12-перстной кишки, язва ЛДПК, язва пилорического канала, язвы пищевода, острые язвы, рубцующиеся язвы.

Полуколичественная шкала оценки степени обсемененности СОЖ бактериальными клетками:
(-) Кокковые формы НР не выявлены (не встречаются ни в одном из полей зрения).
(+) Встречаются единичные кокковые формы (не реже, чем в одном из пяти полей зрения).
(++) Присутствуют кокковые НР (не превышает 10% от всех наблюдаемых форм НР).
(+++) Кокковые формы НР обнаруживаются в значительном количестве (более 10% от всех форм НР)

Метод жидкостной цитологии
Приготовление клеточной суспензии
Цитоцентрифугирование на предметное стекло
ИЦХ окрашивание

Кокковая форма Helicobacter pylori, выявленная иммуноцитохимическим методом, в препарате, приготовленном из гомогенизированного биоптата слизистой оболочки желудка методой ЖЦ. Увеличение 1000х.

Распределение H.pylori-инфицированных пациентов с диагнозом хронический гастрит по признаку «частота встречаемости кокковых и U-форм в СОЖ». На круговой диаграмме изображено полуколичественное распределение пациентов по степени обсемененности СОЖ кокковыми и U-формами НР

Полуколичественная шкала оценки степени обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori

Помесячное распределение данных иммуноцитохимических исследований, соответствующих степени обсемененности СОЖ кокковыми формами к +++ (%) в 2002-2009 годах

Динамика интенсивной обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori (кокки = 3, %)

Динамика интенсивной обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori (кокки = 3, %)

Критерий Фишера
(угловое преобразование Фишера) -оценивает достоверность различий между процентными долями двух выборок, в которых зарегистрирован интересующий нас эффект.

Сравнение данных пациентов, обследованных в июле с данными пациентов, обследованных в остальные месяцы, по статистическому критерию Фишера.
Красным выделены данные за месяцы, удовлетворяющие условию «достоверность различия по статистическому критерию Фишера 95% минимум в 4 из 5 лет»