Сифилис

Сифилис (Lues) - хроническое венерическое заболевание с циклическим течением, затрагивающее в процессе развития инфекции все органы и ткани человека.

Уровень заболеваемости сифилисом на 100 тысяч населения в странах мира по данным ВОЗ в 2004 году .
2004 год.

Возбудитель сифилиса –
Treponema Pallidum

Был открыт в 1905 г.
Ф. Шаудином и Э. Гоффманом.
Ф. Шаудином
Э. Гоффман

T. pallidum обладает тремя типами движения:
вращением вокруг прямой оси;
изгибанием под углом ;
поступательным волнообразным (маятникообразным) перемещением.

Жизненный цикл возбудителя включает в себя:
спиралевидную форму;
зернистую стадию;
стадию кистоподобных сферических тел (цисты).
Цисты являются формами устойчивого выживания в неблагоприятных условиях. Существуют также L-формы и фильтрующиеся формы T. pallidum/pallidum.
Спиралевидная форма
Кистоподобные сферические тела

Возбудитель сифилиса относится к облигатным паразитам, поэтому он не культивируется на искусственных питательных средах. Биохимические свойства вследствие некультивируемости изучены плохо.

Treponema pallidium

Treponema pallidum в отделяемом твердого шанкра при окраске по Романовскому-Гимзе

Обладает сложной антигенной структурой.
Имеет специфический термолабильный антиген и неспецифический липоидный антиген. Последний по составу идентичен кардиолипину, экстрагированному из бычьего сердца. Представляет по химической структуре дифосфадил глицерин.

T. pallidum, окраска серебрение

Факторы патогенности изучены плохо.
В процессе прикрепления к клеткам участвуют:
Адгезины, синтез которых происходит, возможно, при попадании возбудителя в организм человека.
Липопротеины участвуют в развитии иммунопатологических процессов. T. pallidum/pallidum не продуцирует сильнодействующие экзотоксины, обладая тем не менее цитотоксической активностью в отношении нейробластов и других клеток.
Имеются протеины, сходные с бактериальными гемолизинами.

Резистентность.
Чувствителен к высыханию, солнечным лучам, дезинфицирующим веществам, нагреванию. При нагревании до 55 С гибнет в течение 15 мин, при 100 С - мгновенно. На предметах домашнего обихода сохраняет заразительность до высыхания.
Цисты и L-формы являются формами устойчивого выживания в неблагоприятных условиях.

Проникшие в организм трепонемы из места входных ворот попадают в регионарные лимфатические узлы, где размножаются.
Из лимфатических узлов возбудитель попадает в кровяное русло, где прикрепляется к эндотелиальным клеткам, вызывая эндартериит, ведущий к развитию васкулитов и последующему тканевому некрозу. С кровью трепонемы разносятся по всему организму, обсеменяя различные органы и ткани: печень, почки, костную, нервную и сердечно-сосудистую системы.

Болезнь протекает в несколько циклов.
Инкубационный период составляет 3-4 нед.
Первичный период характеризуется появлением твердого шанкра (язвочки с твердыми краями на месте внедрения возбудителя - слизистых оболочках половых органов, рта, ануса), увеличением и воспалением лимфатических узлов. Его длительность
6-7 нед.

Затем наступает вторичный период, который длится годами. Он характеризуется появлением на коже и слизистых оболочках папулезных, везикулярных или пустулезных высыпаний, в которых содержится большое количество живых трепонем, а также поражением печени, почек, костной, нервной и сердечно-сосудистой систем. В этот период больной наиболее заразен. Высыпания могут самопроизвольно исчезать, а при ослаблении защитных сил организма появляться вновь.

При отсутствии лечения наступает третичный период, который длится десятилетиями и характеризуется образованием сифилитических бугорков (гумм) как результат развития в организме иммунопатологического процесса. Гуммы склонны к распаду, вызывая деструктивные изменения в пораженных органах и тканях.

Без лечения наступает четвертичный период - нейросифилис, характеризующийся развитием прогрессирующего паралича вследствие поражения центральной нервной системы.

Микробиологическая диагностика сифилиса
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ:
отделяемое шанкра (Iпериод заболевания);
аспират из высыпных элементов,
пунктат регионарных лимфатических узлов (IIпериод);
кровь (II,III,IVпериод);
спинномозговая жидкость (IVпериод заболе­вания).

В ранних стадиях заболевания (I, II период) возбудитель в исследуемом материале (отделяемом шанкра, аспирате из высыпных элементов, пунктате регионарных лимфатических узлов) может быть выявлен методом микроскопии в темном поле. Из исследуемого материала готовят препарат "раздавленная" капля. При положительном результате видны тонкие извитые нити длиной 6—14 мкм, имеющие 10—12 равномерных мелких завитков правильной формы . Для T.pallidum (бледной трепонемы) характерны маятникообразные и поступательно-сгибательные движения. При развитии поражений на слизистой оболочке рта при вторичном сифилисе, а также при локализации твердого шанкра в полости рта приходится дифференцировать T.pallidum от сапрофитных трепонем, являющихся представителями нормальной микрофлоры. В этом случае решающее диагностическое значение имеет обнаружение типичных трепонем в пунктате регионарных лимфатических узлов.
БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Микроскопия в темном поле T.pallidum

Экспресс-методы диагностики: биохимические и молекулярно-биологические исследования.
Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика.
Используют комплекс серологических реакций (КСР), который включает :
реакцию Вассермана (РСК);
реакцию микропреципитации;
реакцию иммобилизации трепонем (РИТ) ;
реакция непрямой ИФ (РИФ).

Реакция микропреципитации.
Реакцию ставят с неспецифическим кардиолипиновым антигеном исследуемой инактивированной сывороткой крови или плазмой. В лунку на пластине из плексигласа (или на обычное стекло) наносят 3 капли сыворотки и добавляют 1 каплю кардиолипинового антигена. Смесь тщательно перемешивают и учитывают результаты. Положительная реакция характеризуется образованием и выпадением хлопьев разной величины; при отрицательном результате наблюдается равномерная легкая опалесценция. Положительная реакция микропреципитации позволяет поставить предварительный диагноз и направить пациента на дальнейшее обследование.

Реакцию Вассермана ставят одновременно с двумя антигенами:
специфическим, содержащим антиген возбудителя — разрушенные ультразвуком трепонемы;
2) неспецифическим — кардиолипиновым.
Исследуемую сыворотку разводят в соотношении 1:5 и ставят РСК по общепринятой методике. При положительной реакции наблюдается задержка гемолиза, при отрицательной — происходит гемолиз эритроцитов, интенсивность реакции оценивается соответственно от (++++) До (-).

РИФ —реакция непрямой ИФ—является специфической при диагностике сифилиса. В качестве антигена используют взвесь тканевых трепонем. Сыворотку больного инактивируют и разводят в соотношении 1:200. На предметные стекла наносят каплю антигена, высушивают и фиксируют 5 мин в ацетоне. Затем на препарат наносят сыворотку больного, через 30 мин промывают и высушивают. Следующим этапом является обработка препарата флюоресцирующей сывороткой против иммуноглобулинов человека. Изучают препарат с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая степень свечения трепонем.

Реакция иммобилизации трепонем также является специфической. Принцип реакции заключается в угнетении движения трепонем (иммобилизация) антителами сыворотки крови пациента в присутствии комплемента.

Живую культуру трепонем получают при культивировании в яичке кролика. Яичко зараженного животного измельчают в специальной среде, в которой трепонемы сохраняют подвижность. Ставят реакцию следующим образом: взвесь тканевых (подвижных) трепонем смешивают в пробирке с исследуемой сывороткой и добавляют свежий комплемент. В одну контрольную пробирку вместо исследуемой сыворотки добавляют сыворотку здорового человека, в другую - вместо свежего комплемента добавляют инактивированный. После инкубации при 35 °С в анаэробных условиях (анаэростат) из всех пробирок готовят препарат "раздавленная" капля и в темном поле определяют количество подвижных и неподвижных трепонем.

Диагностические, профилактические препараты
Антигены для реакции Вассермана:
1) специфический антиген из тканевых трепонем, разрушенных ультразвуком;
2) неспецифический кардиолипиновый антиген — высокоочищенный экстракт бычьего сердца, имеющий постоянный химический состав липидов, смешанных в определенной пропорции с лецитином и холестерином.
.