Содержание
- 2. - ВВЕДЕНИЕ - ОСНОВНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ КОЛОНКИ ДЛЯ ТФЭ - ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ - ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ
- 3. ВВЕДЕНИЕ
- 4. Цель пособия – оказание помощи в практической работе по проведению твердофазной экстракции (ТФЭ). В данном пособии
- 5. ОСНОВНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ КОЛОНКИ ДЛЯ ТФЭ
- 6. Колонка (картридж) для ТФЭ
- 7. ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ
- 10. ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ПРОВЕДЕНИЯ ПРОЦЕССА ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ
- 11. Процесс проведения ТФЭ состоит из нескольких основных этапов. В зависимости от метода их число бывает различным.
- 12. Кондиционирование – процесс приведения сорбента в активное состояние. Уравновешивание – приведение патрона (картриджа) в состояние динамического
- 13. ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ И МАТЕРИАЛЫ ТФЭ
- 14. 1. Вакуумное устройство на 12 позиций (установка для твердофазной экстракции) (номер по каталогу Phenomenex AH0-6023)
- 15. 2. Стеклянная камера в комплекте с манометром и вентилем (AH0-6031)
- 16. 3. Крышка устройства (AH0-6027) Прокладка (AH0-6029) Ножки (AH0-6056)
- 17. 4. Емкость для сбора слива (AH0-6052)
- 18. 5. Штатив для пробирок (AH0-6037)
- 19. 6. Вакуумный насос
- 20. 7. Комплектующие для ТФЭ адаптер (AH0-7379) резервуар колонка для ТФЭ - патрон (картридж) заглушка (AH0-6061) запорный
- 21. СБОРКА УСТАНОВКИ ДЛЯ ТФЭ
- 22. 1. Наружный фитинг присоединяется (заворачивается по резьбе) к внешней стороне крышки устройства. СБОРКА УСТАНОВКИ ДЛЯ ТФЭ
- 23. Наружный фитинг, присоединенный к крышке устройства.
- 24. 2. Внутренний фитинг присоединяется (заворачивается по резьбе) к внутренней поверхности крышки устройства.
- 25. Внутренний фитинг, присоединенный к крышке устройства.
- 26. Внутренний (слева) и наружный (справа) фитинги, присоединенные к крышке устройства.
- 27. 3. Игла надевается на внутренний фитинг, если этот фитинг будет задействован в процессе твердофазной экстракции.
- 28. Игла, присоединенная к внутреннему фитингу.
- 29. 4. Аналогично заполняются все 12 позиций устройства.
- 30. 5. В случае удерживающей ТФЭ в стеклянную камеру устанавливается емкость для сбора слива.
- 31. Вид устройства с емкостью для слива внутри.
- 32. Для сбора слива при удерживающей ТФЭ или целевого компонента при неудерживающей ТФЭ возможно использование стакана.
- 33. 6. Камера со стаканом закрывается подготовленной крышкой устройства.
- 34. 7. Заглушки присоединяются к внешним фитингам, которые не будут задействованы в процессе твердофазной экстракции или использованы
- 35. 8. Запорные краны вставляются во внешние фитинги, которые будут задействованы в процессе твердофазной экстракции либо будут
- 36. 9. Патрон (картридж) присоединяется к запорному крану, который будет задействован в процессе твердофазной экстракции.
- 37. Патрон (картридж), присоединенный к запорному крану.
- 38. 10. Шланг насоса присоединяется к устройству. Возможно использование не только вакуумного, но и обычного силиконового шланга,
- 39. Насос, соединенный шлангом с устройством. Длина шланга выбирается исходя из места расположения насоса.
- 40. Установка в сборе.
- 41. ПРОЦЕСС ПРОВЕДЕНИЯ УДЕРЖИВАЮЩЕЙ ТФЭ
- 42. КОНДИЦИОНИРОВАНИЕ/ УРАВНОВЕШИВАНИЕ
- 43. 1. С помощью пипет-дозатора или пипетки на патрон наносится жидкость для его кондиционирования/уравновешивания. Запорный кран под
- 44. 2. Включается вакуумный насос. Запорные краны при этом должны быть закрыты.
- 45. 3. Запорный кран поворачивается в положение, позволяющее поддерживать нужную скорость элюирования. Управление скоростью потока жидкости, проходящегочерез
- 46. а также регулированием давления в системе (путем изменения размера отверстия в вакуумной линии регулировочным вентилем или
- 47. Во время элюирования вакуум желательно поддерживать на уровне примерно 30-40 кПа (по показанию манометра). ВНИМАНИЕ! Предельно
- 48. 4. Элюат собирается в емкости для слива.
- 49. 5. По окончании процесса элюирования вакуумный насос выключается.
- 50. 6. Вакуум в системе сбрасывают, максимально открывая отверстие вакуумной линии при помощи регулировочного вентиля.
- 51. 7. Крышка устройства снимается с камеры.
- 52. НАНЕСЕНИЕ ПРОБЫ
- 53. За процессами кондиционирования и уравновешивания следует процесс нанесения пробы. 1. Для нанесения проб больших объемов применяются
- 54. 2. С помощью пипет-дозатора или пипетки на патрон наносится количество пробы, составляющее около 3/4 вместимости патрона.
- 55. 3. К патрону присоединяется адаптер. Это необходимо, если объем пробы по сравнению с «мертвым» объемом патрона
- 56. 4. К адаптеру присоединяется резервуар.
- 57. Вид установки сверху в случае одновременного использования четырех позиций для ТФЭ.
- 58. 5. Из цилиндра (или другой емкости) в резервуар наливается проба.
- 59. 6. Включается вакуумный насос. Запорные краны при этом должны быть закрыты.
- 60. 7. Запорный кран поворачивается в положение, позволяющее поддерживать нужную скорость элюирования. Управление скоростью потока жидкости, проходящего
- 61. а также регулированием давления в системе (путем изменения размера отверстия в вакуумной линии регулировочным вентилем или
- 62. Во время элюирования вакуум желательно поддерживать на уровне примерно 30-40 кПа (по показанию манометра). ВНИМАНИЕ! Предельно
- 63. 8. Элюат собирается в емкости для слива.
- 64. 9. По окончании процесса элюирования вакуумный насос выключается.
- 65. 10. Вакуум в системе сбрасывают, максимально открывая отверстие вакуумной линии при помощи регулировочного вентиля.
- 66. 11. Резервуар с адаптером снимается с патрона.
- 67. СУШКА СОРБЕНТА
- 68. После удаления резервуара с адаптером во многих методах ТФЭ необходима сушка сорбента. Для ее осуществления, не
- 69. Все запорные краны, кроме крана, соединенного с высушиваемым патроном, закрыты. Время сушки указано в методике; сушку
- 70. 2. По окончании процесса сушки вакуумный насос выключается.
- 71. 3. Вакуум в системе сбрасывают, максимально открывая отверстие вакуумной линии при помощи регулировочного вентиля.
- 72. 4. Крышка устройства снимается с камеры.
- 73. ПРОМЫВКА СОРБЕНТА
- 74. В зависимости от природы анализируемого вещества промывка сорбента может осуществляться как до процесса его сушки, так
- 75. 5. После промывки и сушки сорбента емкость для слива (в данном случае стакан) удаляется из камеры.
- 76. ЭЛЮИРОВАНИЕ ЦЕЛЕВОГО КОМПОНЕНТА
- 77. Далее проводится элюирование целевого компонента с патрона. 1. Готовится штатив для пробирок из комплекта устройства.
- 78. 2. В штатив для пробирок помещается пробирка с коническим дном. Пробирку следует устанавливать в ту позицию
- 79. 3. Штатив с пробиркой помещается в камеру.
- 80. Штатив с пробиркой, помещенный в камеру.
- 81. 4. Камера закрывается крышкой устройства. Необходимо следить, чтобы игла была опущена в пробирку.
- 82. Установка, собранная для элюирования целевого компонента.
- 83. 5. С помощью пипетки отбирается нужное количество элюирующей жидкости.
- 84. 6. Производится загрузка элюирующей жидкости на патрон. При этом запорный кран должен быть закрыт.
- 85. 7. Включается вакуумный насос. Запорные краны при этом должны быть закрыты.
- 86. 8. Запорный кран поворачивается в положение, позволяющее поддерживать нужную скорость элюирования.
- 87. 9. Процесс элюирования продолжается до полного выхода элюата.
- 88. 10. По окончании процесса элюирования вакуумный насос выключается.
- 89. 11. Вакуум в системе сбрасывают, максимально открывая отверстие вакуумной линии при помощи регулировочного вентиля.
- 90. 12. Крышка устройства снимается с камеры.
- 91. 13. Элюат из пробирки направляется на ввод ВЭЖХ- системы.
- 92. ПРОЦЕСС ПРОВЕДЕНИЯ НЕУДЕРЖИВАЮЩЕЙ ТФЭ
- 93. Как отмечалось ранее, при неудерживающей ТФЭ целевой компонент, растворенный в нанесенной пробе, не удерживается на сорбенте
- 94. КОНДИЦИОНИРОВАНИЕ / УРАВНОВЕШИВАНИЕ
- 95. 1. С помощью пипет-дозатора или пипетки на патрон наносится жидкость для кондиционирования/уравновешивания. Запорный кран под патроном
- 96. 2. Включается вакуумный насос. Запорные краны при этом должны быть закрыты.
- 97. 3. Запорный кран поворачивается в положение, позволяющее поддерживать нужную скорость элюирования. Управление скоростью потока жидкости, проходящего
- 98. а также регулированием давления в системе (путем изменения размера отверстия в вакуумной линии регулировочным вентилем или
- 99. Во время элюирования вакуум желательно поддерживать на уровне примерно 30-40 кПа (по показанию манометра). ВНИМАНИЕ! Необходимо
- 100. 4. Элюат собирается в емкости для слива.
- 101. 5. По окончании процесса элюирования вакуумный насос выключается.
- 102. 6. Вакуум в системе сбрасывают, максимально открывая отверстие вакуумной линии при помощи регулировочного вентиля. вернуться к
- 103. 7. Крышка устройства снимается с камеры.
- 104. 8. После кондиционирования и уравновешивания сорбента стакан удаляется из камеры и заменяется на емкость для сбора
- 105. Для сбора элюата, содержащего целевой компонент при неудерживающей ТФЭ, можно использовать стакан.
- 106. НАНЕСЕНИЕ ПРОБЫ / ЭЛЮИРОВАНИЕ ЦЕЛЕВОГО КОМПОНЕНТА
- 107. За процессами кондиционирования и уравновешивания следует элюирование целевого компонента. Для нанесения проб больших объемов применяются резервуары
- 108. 2. С помощью пипет-дозатора или пипетки на патрон наносится количество пробы, составляющее около 3/4 вместимости патрона.
- 109. 3. К патрону присоединяется адаптер. Это необходимо, если объем пробы по сравнению с «мертвым» объемом патрона
- 110. 4. К адаптеру присоединяется резервуар.
- 111. 5. В резервуар наливается оставшийся объем пробы. Проводят элюирование аналогично описанному выше. Режим элюирования подробно описан
- 113. Скачать презентацию