Высокоэффективная жидкостная препаративная хроиматография

Высокоэффективная жидкостная хроматография
Хроматогра́фия (от др.-греч. χρῶμα — цвет) — динамический сорбционный метод разделения жидких смесей, основан на распределении веществ между двумя фазами — неподвижной (твердая фаза или жидкость, связанная на инертном носителе) и подвижной (газовая или жидкая фаза, элюент).
Впервые применён русским учёным-ботаником Михаилом Семеновичем Цветом в 1900 году. Он использовал колонку, заполненную карбонатом кальция, для разделения пигментов растительного происхождения.
Жидкостную хроматографию в свою очередь можно разделить в зависимости от агрегатного состояния неподвижной фазы на твердо-жидкофазную (ТЖХ) — неподвижная фаза твердая и жидко-жидкофазную хроматографию (ЖЖХ) — неподвижная фаза жидкая. ЖЖХ часто называют распределительной хроматографией.

Высокоэффективная жидкостная хроматография
Использование хроматографических колонн большого диаметра (1-30 см) и специальных устройств для выделения и сбора элюатов.
В лабораториях на колонках диаметром 8-15 мм выделяют 0,1-10 г вещества.
На полупромышленных установках с колоннами диаметром 10-20 см - несколько килограммов.
Созданы промышленные приборы с колоннами диаметром около 0,5 м для получения нескольких тонн веществ.

Высокоэффективная жидкостная хроматография
Большой диаметр колонн приводит к тому, что плотность сорбента по сечению неодинакова, влияние на разделение оказывают тепловые эффекты сорбции и десорбции, а большой объем пробы не удается вводить одновременно на весь верхний слой сорбента.
Производительность препаративных колонн относительно невысока (до 10 см3 см-2час-1) и зависит от природы разделяемых веществ и емкости сорбента.
Потери вещества в препаративных колоннах малы, что позволяет широко использовать их для разделения небольших количеств сложных синтетических и природных смесей.

Высокоэффективная жидкостная хроматография
1. Адсорбционная хроматография — разделение за счет адсорбции основано на различии адсобируемости компонентов смеси на данном адсорбенте.
2. Распределительная хроматография — разделение основано на различии в растворимости сорбатов в подвижной и неподвижной фазах или на различии в стабильности образующихся комплексов.
3. Ионообменная хроматография — разделение основано на различии констант ионообменного равновесия.
4. Осадочная хроматография — разделение основано на различной растворимости осадков в подвижной фазе.
5. Аффинная хроматография — основана на биоспецифическом взаимодействии компонентов с аффинным лигандом;
6. Эксклюзионная хроматография — разделение основано на различии и проницаемости молекул разделяемых веществ в неподвижную фазу. Компоненты элюируются в порядке уменьшения их молекулярной массы.