Патогенные вибрионы

Содержание

Слайд 2

Таксономия

согласно таксономии Берги вибрионы входят в 5 группу- семейство Vibrionaceae.
К семейству

Таксономия согласно таксономии Берги вибрионы входят в 5 группу- семейство Vibrionaceae. К
относят 5 родов.
Медицинское значение имеют:
роды: Vibrio, Aeromonas,
Plesiomonas.
.

Слайд 3

Род Vibrio

прямые или изогнутые грамотрицательные палочки, не образующие спор;
подвижны с помощью одного

Род Vibrio прямые или изогнутые грамотрицательные палочки, не образующие спор; подвижны с
или многих полярно расположенных жгутиков;
растут в аэробных и анаэробных условиях;
продуцируют оксидазу (исключение V. metschnikovii);
ферментируют глюкозу, некоторые с выделением газа.

Слайд 4

Vibrio

 2. V. metschnikovii
 3. V. harveyi               
 4. V. campbellii            
 5. V. parahaemolyticus
 6.

Vibrio 2. V. metschnikovii 3. V. harveyi 4. V. campbellii 5. V.
V. alginolyticus         
 7. V. natriegens            
 8. V. vulnificus            

15. V. anguillarum
16. V. ordalii
17. V. fischeri
18. V. logei
19. V. proteolyticus
20. V. gazogenes
21. V. marinus
22. V. costicola
23. V. mimicus

1. Вид Vibrio cholerae (типовой вид рода)
а) V. cholerae O1 (два биовара - классический и эльтор)
б) V. cholerae O139
в) V. cholerae non О1 (от О2 до О200 серогруппы)

9. V. nereis                 
10. V. fluvialis            
11. V. furnissii            
12. V. splendidus I         
     V. splendidus II        
13. V. pelagius I
    V. pelagius II
14. V. nigripulchritudo     

24. V. damsela
25. V. hollisae
26. V. aestuarianus
27. V. diazotrophicus
28. V. orientalis
29. V. cincinnatiensis
30. V. salmonicida
31. V. tubiashi
32. V. mediterranei
33. V. carchariae

Слайд 5

Vibrio cholerae

V. cholerae открыл в 1854 году Пачини, он и дал название.

Vibrio cholerae V. cholerae открыл в 1854 году Пачини, он и дал

Роберт Кох изучил и дал полное описание свойств классического вибриона.
В 1906 году Ф.Готлиб на карантинной станции Эль-Тор (Синайский полуостров) выделил второго возбудителя холеры - вибриона Эль-Тор.

Слайд 6

На территории РФ в течении последних пяти лет имели место единичные завозные

На территории РФ в течении последних пяти лет имели место единичные завозные
случаи холеры из республики Таджикистан, Индии, Китая.

Слайд 7

Морфология

Вибрионы- изогнутая в виде запятой грамотрицательная палочка размерами
1,5-4,0х0,2 мкм, монотрих-

Морфология Вибрионы- изогнутая в виде запятой грамотрицательная палочка размерами 1,5-4,0х0,2 мкм, монотрих-
имеет полярный жгутик, снабжённый чехликом. Хорошо окрашивается анилиновыми красителями.
Могут образовывать L-формы.
Спор и капсул не образует.
Отличительной морфологической
особенностью вибриона О 139
является наличие капсулы.

Слайд 9

Антигенная структура

Холерные вибрионы имеют два основных антигена:
0-антиген типоспецифический, термостабильный.
Н-

Антигенная структура Холерные вибрионы имеют два основных антигена: 0-антиген типоспецифический, термостабильный. Н- жгутиковый, термолабильный
жгутиковый, термолабильный

Слайд 10

Подразделение V.cholerae по О-антигену

non O1 V.cholerae НАГ вибрионы

Огава (ав)
Инаба (ас)
Гикошима (авс)

Подразделение V.cholerae по О-антигену non O1 V.cholerae НАГ вибрионы Огава (ав) Инаба (ас) Гикошима (авс)

Слайд 11

Резистентность

Возбудители холеры способны к сапрофитному способу существования в водной среде.
- При

Резистентность Возбудители холеры способны к сапрофитному способу существования в водной среде. -
температуре 8°C размножение возбудителя холеры прекращается.
- При температуре 5°C возбудители холеры могут сохранятся до 4 лет.
-погибают при температуре 56°C - в течение 30 минут и мгновенно - при кипячении.
- Высушивание и действие солнечных лучей губительны для вибриона (погибают через несколько часов). В условиях достаточно высокой влажности, вибрионы сохраняются в течение 2-3 дней.

Слайд 13

Вибрион особо чувствителен к воздействию кислот, даже в самых слабых концентрациях.
Дез.средства

Вибрион особо чувствителен к воздействию кислот, даже в самых слабых концентрациях. Дез.средства
в невысоких концентрациях вызывают гибель холерных вибрионов в течение нескольких минут (хлорсодержащие препараты в концентрациях 0.2-0.3 мг/л).
Губительно действуют на вибрион тетрациклин, нитрофураны.

Слайд 14

Биовары V.cholerae O1

Биовары V.cholerae O1

Слайд 15

Воронкообразное разжижение желатины возбудителем холеры

Воронкообразное разжижение желатины возбудителем холеры

Слайд 16

Биохимическая активность

По способности ферментировать арабинозу, маннозу, сахарозу вибрионы патогенных видов распределены

Биохимическая активность По способности ферментировать арабинозу, маннозу, сахарозу вибрионы патогенных видов распределены по разным группам Хейберга
по разным группам Хейберга

Слайд 17

Культивирование холерных вибрионов

Необходима щелочная рН.
Транспортные среды:
1% пептонная вода с рН 8,5±0,1
1%

Культивирование холерных вибрионов Необходима щелочная рН. Транспортные среды: 1% пептонная вода с
пептонная вода с рН 8,5±0,1 с теллуритом калия
2% раствор поваренной соли

Слайд 18

Элективные и элективно-дифференциальные среды для холерных вибрионов

Элективные и элективно-дифференциальные среды для холерных вибрионов

Слайд 19

Культуральные свойства

Щелочной агар – круглые, гладкие, плоские, голубоватые, гомогенные с ровными краями,

Культуральные свойства Щелочной агар – круглые, гладкие, плоские, голубоватые, гомогенные с ровными
прозрачные в проходящем свете и светло-серые с голубоватым или зеленоватым оттенком в косом свете
TSBS и СЭДХ – полупрозрачные, ярко желтые на зеленом или синем фоне среды
Атипичные колонии: мутные с плотным центром, шероховатые, коричневые или желтые

ТСВS – агар

Слайд 20

Характер роста вибрионов на среде TCBS

Характер роста вибрионов на среде TCBS

Слайд 22

Факторы патогенности холерного вибриона

токсин-коpегулиpуемые пили адгезии – ген tcp на «остpове патогенности»

Факторы патогенности холерного вибриона токсин-коpегулиpуемые пили адгезии – ген tcp на «остpове
хромосомы
Холеpный токсин (холероген) – гены ctxAB (или vctAB) в составе умеpенного нитевидного фага.

Слайд 23

Экзотоксин- холероген- термолабильный белок. Инактивируется формалином. Состоит из 2-х субъединиц А и

Экзотоксин- холероген- термолабильный белок. Инактивируется формалином. Состоит из 2-х субъединиц А и
В.
Частица В (пять пептидов) определяет взаимодействие с эпителиальными клетками и Аг специфичность.
Частица А- активирует внутриклеточную аденилатциклазу, приводит к повышению ц-АМФ и выходу электролитов и жидкости из клеток.

Слайд 26

дополнительные токсины

ZOT (zonula occludenc toxin) и ACE (accessory cholera enterotoxin) токсины,

дополнительные токсины ZOT (zonula occludenc toxin) и ACE (accessory cholera enterotoxin) токсины,
цитотоксический комплекс RTX, цитототонический фактор Cef, термостабильный токсин ST, NMDCY токсин (non membrane damaging cytotoxin), шигаподобный токсин Shb, No7 токсин (novel toxin), cholix toxin.
Фактор проницаемости – нарушает проницаемость капилляров и клеточных мембран кишечной стенки.
Факторы адгезии и колонизации – белки наружной мембраны, фимбрии, не менее важным фактором вирулентности холерных вибрионов являются токсин-корегулируемые пили адгезии или TCP (от англ. - toxin-coregulated pilus) - ключевой фактор колонизации. За синтез пилей TCP отвечают гены tcpA-F, среди них ген tcpA - за биосинтез основной субъединицы пилей.

Слайд 27

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ

Ферменты агрессии:
- муциназа – способствует разрушению муцина на эпителиальных

ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ Ферменты агрессии: - муциназа – способствует разрушению муцина на эпителиальных
клетках, что облегчает всасывание токсических продуктов и открывает доступ к рецептору энтероцитов - ганглиозиду GM1 ;
- нейраминидаза – обеспечивает взаимодействие с микроворсинками;
- протеаза – способствует разрушению белков;
- гемолизин V.cholerae eltor – разрушает эритроциты;
- гемагглютинин V.cholerae eltor – способствует агглютинации эритроцитов;
- продуцируют лецитиназу, триглицероллипазу.
Высокая подвижность – жгутик состоящий из белка флагеллина.

Слайд 28

Этиопатогенез

Источник инфекции: больной или носитель
Пути передачи:
Фекально-оральный
Водный
Контактно-бытовой
Инкубационный период от нескольких часов до

Этиопатогенез Источник инфекции: больной или носитель Пути передачи: Фекально-оральный Водный Контактно-бытовой Инкубационный
5 дней.

Слайд 29

ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ

После адгезии и колонизации слизистой тонкого кишечника возбудитель остается на

ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ После адгезии и колонизации слизистой тонкого кишечника возбудитель остается на
поверхности клеток, не вызывая воспаления (I тип взаимодействия).
Образование комплекса токсина с ганглиозидом GM1 запускает эндоцитоз. Дальнейшие события полностью определяются действием холерогена.

Слайд 30

ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ

Потеря электролитов и воды приводит к обезвоживанию организма:
Падает артериальное давление;
Нарушается

ПАТОГЕНЕЗ ХОЛЕРЫ Потеря электролитов и воды приводит к обезвоживанию организма: Падает артериальное
микроциркуляция;
Развивается гипоксия тканей;
Метаболический ацидоз;
Гипокалиемия;
Острая почечная недостаточность;
Сердечная недостаточность;
Возможен гиповолемический шок (алгид).

Слайд 31

Формы заболевания

Типичные: желудочно-кишечные
Атипичные: молниеносная, сухая, стертая, бессимптомная,
Вибрионосительство

Формы заболевания Типичные: желудочно-кишечные Атипичные: молниеносная, сухая, стертая, бессимптомная, Вибрионосительство

Слайд 34

Иммунитет

Антимикробный, антитоксический
Относительно стойкий, видоспецифический
С накоплением вибриоцидных АТ IgM и IgG.
Поствакцинальный иммунитет от

Иммунитет Антимикробный, антитоксический Относительно стойкий, видоспецифический С накоплением вибриоцидных АТ IgM и
6 мес.до года.

Слайд 35

Методы исследования:
Бактериологический;
Бактериоскопический;
Серологический;
Молекулярно-генетический.

Методы исследования: Бактериологический; Бактериоскопический; Серологический; Молекулярно-генетический.

Слайд 36

Исследования, выполняются в лабораториях, имеющих разрешение на работу с микроорганизмами III гр.

Исследования, выполняются в лабораториях, имеющих разрешение на работу с микроорганизмами III гр.
патогенности

Исследование материала от больных, контактных из окружающей среды до установления отрицательного результата или выделения вибрионов.
Идентификация вибрионов: мазок, оксидаза, рост на полиуглеводной среде, слайд-агглютинация с холерными сыворотками О1, Огава, Инаба, РО, О 139

Слайд 37

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

ХОЛЕРЫ (МУК 4.2.2218-07)
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Испражнения и рвотные массы (10-20 мл);
Желчь –

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ (МУК 4.2.2218-07) МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: Испражнения и рвотные массы
порции В и С (по 10-12 мл);
Трупный материал (отрезки по 10 см верхней, средней и нижней частей тонкого кишечника и желчный пузырь целиком. Содержимое кишечника и желчь - по 10 мл);
Предметы, загрязненные испражнениями (постельное и нательное белье и др.).

Слайд 38

Этапы исследования:
I этап
II этап
III этап
IV этап
V этап
VI этап

Исследуемый материал

Ускоренные

Этапы исследования: I этап II этап III этап IV этап V этап
методы:
МФА, РИВ,
РНГА, ПЦР
Предварительный ответ , устно

ЩА (12-16ч), TCBS, СЭДХ
(18-24ч)

Отбор и высев подозрительных колоний на ЩА и/или Клиглера (Ресселя), лактозо-сахарозная среда

I п.в.
(6-8ч)

II п.в.
(6-8ч)

ЩА (12-16ч),
TCBS, СЭДХ (18-24)

ЩА
(12-16ч)

Отбор культур по Клиглеру и оксидазной пробе

Бактериоскопическое исследование,
оксидазная проба и
РА с О1, О139 и RO
с колоний и пленки – предварительный ответ, устно

Идентификация чистой культуры: по культуральным, морфологическим, биохимическим признакам, антигенной структуре, токсигенности, чувствительности к антибиотикам и б/фагам (24-36ч)

Окончательный ответ , письменно (36-48ч)

Слайд 39

I этап
Исследование нативного материала ускоренными методами: МФА, РИВ, РНГА, ПЦР.

I этап Исследование нативного материала ускоренными методами: МФА, РИВ, РНГА, ПЦР. Предварительный
Предварительный ответ, устно.
Исследуемый материал (фекалии) от больных в объёме 0,5-1,0 мл засевают в 50-100 мл накопительной среды – 1% пептонную воду. Если материал взят в колбу или во флакон с 50 мл 1% пептонной воды, то её используют как 1 среду накопления. Если материал взят в пробирку, то её содержимое выливают в колбу с 50 мл 1% пептонной воды (1 среда накопления).
Одновременно петлей материал засевают на щелочной агар и одну из элективных сред TCBS и др. Посевы помещают в термостат при температуре 37ºС.

Слайд 40

II этап
Через 6-8 часов с 1 среды накопления делают посев

II этап Через 6-8 часов с 1 среды накопления делают посев на
на 2 среду накопления ( 5-8 мл 1% пептонной воды) и одновременно большой бактериологической петлей с поверхностного слоя 1 среды накопления делают высев на щелочной агар и одну из элективных дифференциально-диагностических сред.
Если в 1 среде накопления видна пленка и лёгкое помутнение среды, то делают мазок, смотрят подвижность, при возможности ставят с поверхностной пленки ориентировочную слайд-агглютинацию с холерной О1 сывороткой.

Слайд 41

III этап
Через 12-16 часов, если есть рост на 2 среде

III этап Через 12-16 часов, если есть рост на 2 среде накопления,
накопления, делают высев на щелочной агар (3 чашка).
Чашки просматривают в проходящем свете или с помощью лупы. Если на чашках есть подозрительные колонии, отбор колоний можно начинать уже на III этапе через 10-12 часов от начала исследования, в остальных случаях – через 18-24 часа.

Слайд 42

IVэтап
Через 18-24 часа - отбор подозрительных колоний в посевах на плотных

IVэтап Через 18-24 часа - отбор подозрительных колоний в посевах на плотных
средах нативного материала, а также в высевах из 1 и 2-ой накопительных сред. На щелочном агаре холерные вибрионы в S-форме вырастают в виде круглых, гладких, плоских, голубовато-прозрачных средней величины колоний с ровными краями. Через 10-12 ч их диаметр не превышает 1 мм, а к 18-24 ч достигает 2-3 мм. Темпы роста на элективных средах замедлены, поэтому просмотр следует проводить через 18-20 ч инкубации в термостате при температуре 37ºС. Колонии на элективной среде TCBS имеют ярко-желтую окраску на зеленом фоне среды, полупрозрачные.

Слайд 43

IVэтап
Из колоний, выросших на щелочном агаре, делают мазок, окрашивают по Граму,

IVэтап Из колоний, выросших на щелочном агаре, делают мазок, окрашивают по Граму,
смотрят подвижность и ставят микроагглютинацию на стекле с холерной сывороткой О1 в разведении 1:50, 1:100. Если реакция положительная, то ставят реакцию агглютинации с варианто-специфическими сыворотками Инаба, Огава в том же разведении.
При отборе колоний можно пользоваться тестом на оксидазу, применяя систему индикаторную бумажную (СИБ). Холерный вибрион дает положительную реакцию на оксидазу (фиолетовое или ярко красное окрашивание в зависимости от индикатора).
Далее делают посевы со щелочного агара на полиуглеводную среду Клиглера (Ресселя). При положительной реакции происходит изменение цвета столбика (сахароза) без изменения цвета скошенной части (лактоза) и без образования газа и сероводорода. Далее подозрительные колонии отсевают на косой или щелочной агар для выделения чистой культуры и проводят идентификацию на холеру.

Слайд 44

Vэтап: Идентификация культур холерных вибрионов
Культуры, выделенные на различных этапах, идентифицируют с

Vэтап: Идентификация культур холерных вибрионов Культуры, выделенные на различных этапах, идентифицируют с
целью определения их принадлежности к виду Vibrio cholerae соответствующей серогруппы (О1, О139 и др.).
Предварительную идентификацию проводят по комплексу признаков, включая морфологию колоний, подвижность, пробу на оксидазу и агглютинацию на стекле с сыворотками О1 (1:100), RО (1:50) и О139. Для культур, положительно реагирующих с сывороткой О1, устанавливают принадлежность к серологическим вариантам Инаба и Огава также в слайд-агглютинации.
Окончательную идентификацию культур, выделенных на полиуглеводной среде или щелочном агаре, агглютинирующихся на стекле, проводят по сокращенной или полной схеме.

Слайд 45

Сокращённая схема идентификации:
Морфология и подвижность микробных клеток
Оксидазная проба
Слайд-агглютинация с О1 или

Сокращённая схема идентификации: Морфология и подвижность микробных клеток Оксидазная проба Слайд-агглютинация с
О139 сывороткой
Развернутой РА с холерными сыворотками О1, Инаба, Огава, RО
Чувствительность к холерным диагностическим фагам (классическому и эльтор)
О/F тест и отношение к отдельным углеводам (манниту, маннозе, сахарозе и арабинозе в средах Гисса, а также лизину, орнитину и аргинину)
Оценка эпидемической значимости:
Гемолитическая активность по Грейгу
Чувствительность к фагам холерным эльтор ctx+ и ctx-
Ответ выдается письменно

Слайд 46

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ВИДОВ V. CHOLERAE

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ВИДОВ V. CHOLERAE

Слайд 47

Идентификация атипичных культур холерных вибрионов.
Антигенная изменчивость холерных вибрионов О1 может выражаться

Идентификация атипичных культур холерных вибрионов. Антигенная изменчивость холерных вибрионов О1 может выражаться
в ослаблении до 1/4 титра или утрате агглютинабельности холерными сыворотками О1, Инаба, Огава. Встречаются штаммы, агглютинирующиеся только холерной сывороткой О1 серогруппы и не реагирующие с варианто-специфическими сыворотками (Инаба и Огава), что делает невозможным установление их серовара.

Слайд 48

В случае S-R диссоциации культуры холерных вибрионов агглютинируют RО-сывороткой. При этом в

В случае S-R диссоциации культуры холерных вибрионов агглютинируют RО-сывороткой. При этом в
одних случаях штаммы агглютинируются всеми холерными сыворотками, в т.ч. и RО, их обозначают как SR-варианты, в других - измененные холерные вибрионы в диагностических титрах агглютинируются только с RО-сывороткой и не агглютинируются холерными сыворотками О1, Инаба и Огава, их относят к R-вариантам.
В последние годы возросла частота встречаемости резистентных к диагностическим холерным фагам штаммов среди холерных вибрионов О1, выделяемых как от людей, так и из объектов окружающей среды.

Слайд 49

Ускоренные методы диагностики

Реакция иммобилизации вибрионов
РИФ (МФА),
ПЦР для обнаружения ctx- гена
РНГА с применением

Ускоренные методы диагностики Реакция иммобилизации вибрионов РИФ (МФА), ПЦР для обнаружения ctx-
эритроцитарных или полимерных иммуноглобулиновых О1, О139 диагностикумов
РНаг

Слайд 50

Латекс-агглютинация с образцами жидкого стула

+

+

-

-

J. J. FARMER III  F. W. HICKMAN-BRENNER The Genera

Латекс-агглютинация с образцами жидкого стула + + - - J. J. FARMER
Vibrio and Photobacterium// Procariotae

Слайд 51

Схема оценки эпидемической значимости Vibrio cholerae eltor
по чувствительности к бактериофагам ctx+

Схема оценки эпидемической значимости Vibrio cholerae eltor по чувствительности к бактериофагам ctx+
и ctx-
и гемолитической активности

Слайд 52

Окончательный положительный ответ должен быть выдан устно и письменно через 36-48

Окончательный положительный ответ должен быть выдан устно и письменно через 36-48 часов
часов по результатам полной, сокращенной или ускоренной идентификации выделенной культуры с определением вида, серогруппы (и сероварианта для О1), биовара, эпидемической значимости и антибиотикограммы.
На культуры, которые агглютинируются холерной сывороткой О1 до 1/4 титра, но не чувствительны к фагам в рабочем разведении, также выдают положительный ответ о принадлежности культуры к Vibrio cholerae О1.

Слайд 53

Окончательную оценку вирулентности холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп дают в

Окончательную оценку вирулентности холерных вибрионов О1 и О139 серогрупп дают в специализированных
специализированных лабораториях по данным молекулярного зондирования на ген холерного токсина в реакции ПЦР.
Отрицательный ответ выдают через 36-48 часов - только после окончания исследования по полной схеме.

Слайд 54

Серологический метод:
Определение агглютининов в сыворотке крови (развернутой РА – серовары Огава, Инаба

Серологический метод: Определение агглютининов в сыворотке крови (развернутой РА – серовары Огава,
и О139 (ДТ – 1:40 и ↑); РНГА (ДТ – 1:40 и ↑); РНАг (ДТ – 1:50 (1:80) и ↑)
Определение вибриоцидных антител (РВА) в сыворотке крови (вибриоцидным титром – гибель не менее 50% клеток холерного вибриона)
Определение токсиннейтролизующих антител в сыворотке крови (РНГА с эритроцитарным холерным энтеротоксическим диагностикумом (ЭХЭД) - ДТ – 1:160 и ↑)

Слайд 55

Критерии ЧП:
в неэндемических районах – единичный подтвержденный местный случай;
в эндемических районах –

Критерии ЧП: в неэндемических районах – единичный подтвержденный местный случай; в эндемических
резкое повышение заболеваемости по сравнению с обычным уровнем, особенно при появлении множественных очагов и летальных исходов

Слайд 56

Примерный штат лаборатории на 1000 анализов в сутки (700 от людей и

Примерный штат лаборатории на 1000 анализов в сутки (700 от людей и
300 – воды) при 36-часовой рабочей неделе по МУ 3.4.1030-01

Слайд 57

Этиотропная терапия

Антибиотики (тетрациклин, доксициклин),
Антибиотик резерва- ципрофлоксацин
Симптоматическая терапия

Этиотропная терапия Антибиотики (тетрациклин, доксициклин), Антибиотик резерва- ципрофлоксацин Симптоматическая терапия

Слайд 58

Специфическая профилактика

Вакцинация по эпидемическим показаниям.
Холероген-анатоксин
Химическая холерная вакцина
Корпускулярная убитая вакцина

Специфическая профилактика Вакцинация по эпидемическим показаниям. Холероген-анатоксин Химическая холерная вакцина Корпускулярная убитая вакцина

Слайд 59

Галофильные вибрионы

Большой вклад в изоляцию и исследование галофильных вибрионов был внесен японскими

Галофильные вибрионы Большой вклад в изоляцию и исследование галофильных вибрионов был внесен
исследователями Т. Фуджино и
Р. Саказаки.

Слайд 60

Галофильные вибрионы широко распространены в воде морей и океанов. Они обнаружены в

Галофильные вибрионы широко распространены в воде морей и океанов. Они обнаружены в
морских гидробионтах (рыба, моллюски), водорослях, иле и соленой воде.
Известно более 30 видов галофильных вибрионов, причем 17 из них способны вызывать заболевания у человека

Слайд 62

Морфология

В мазках галофильные вибрионы имеют вид прямых или слегка изогнутых палочек с

Морфология В мазках галофильные вибрионы имеют вид прямых или слегка изогнутых палочек
закругленными концами длиной до 1-3 мкм, шириной 0,2-0,4мкм, лежащих хаотично отдельно друг от друга.
характерен полиморфизм. Могут встречаться шаровидные формы, в некоторых случаях образуются нити.
Спор и капсул галофильные вибрионы не образуют. Хорошо красятся анилиновыми красителями, грамотрицательны.
подвижны благодаря наличию полярно расположенного жгутика или пучка жгутиков.

Слайд 63

Аг- свойства

О-АГ соматический - термостабилен, выдерживает нагревание до +100°С, не разрушается

Аг- свойства О-АГ соматический - термостабилен, выдерживает нагревание до +100°С, не разрушается
под действием спирта и соляной
кислотой
К-АГ поверхностно-капсульный - термолабилен, причем их сочетание стабильно.
Наборы агглютинирующих О- и К-сывороток для серологического типирования выпускаются пока только в Японии.
Н-АГ жгутиковый - термолабилен, неспецифичен, встречается у всех вибрионов в жгутиках.

Слайд 64

Культуральные свойства

Мезофилы, размножаются при t° от +12,8°С до +43°С (оптимальная температура

Культуральные свойства Мезофилы, размножаются при t° от +12,8°С до +43°С (оптимальная температура
+35°С, +37°С).
Факультативные анаэробы,
хорошо растут на питательных средах с обязательным содержанием NaCl от 0,5% до 10%. (в жидких средах галофильные вибрионы растут при более высоких концентрациях NaCl).
концентрация водородных ионов (рН) - от 6,0 до 10,0 (оптимальная 7,5-8,5).

Слайд 65

На плотных средах образуют разнообразные по морфологии формы колоний и менее прозрачные.

На плотных средах образуют разнообразные по морфологии формы колоний и менее прозрачные.
Характерен феномен роения.
Для культивирования галофильных вибрионов используют питательные среды: Касаткиной, TСBS-агар, среды Эндо, Плоскирева, щелочной агар и пептонную воду с 3% NaCl.

Слайд 66

Характер роста вибрионов на среде TCBS

Характер роста вибрионов на среде TCBS

Слайд 68

При росте в жидких средах галофильные вибрионы образуют плотную, грубую пленку, или

При росте в жидких средах галофильные вибрионы образуют плотную, грубую пленку, или она вообще может отсутствовать.
она вообще может отсутствовать.

Слайд 69

Резистентность

Сохраняют жизнеспособность при температуре +4°С в течение 2-3 суток. При этой температуре

Резистентность Сохраняют жизнеспособность при температуре +4°С в течение 2-3 суток. При этой
происходит постепенное отмирание клеток, но единичные особи выживают до 8 суток.
При комнатной температуре (+18°С, +20°С) галофилы способны выживать длительное время. При нагревании до +60°С, +80°С отдельные клетки выживают в течение 15 минут. При низких температурах – они могут выживать до 1-2 месяцев.
Вибрионы чувствительны к левомицетину, тетрациклину, фуразолидону, стрептомицину, полимиксину В, рифампицину, гентамицину.

Слайд 70

Распределение галофильных вибрионов, патогенных для человека по группам Хейберга

.

Распределение галофильных вибрионов, патогенных для человека по группам Хейберга .

Слайд 71

Основные свойства галофильных вибрионов

.

Основные свойства галофильных вибрионов .

Слайд 72

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

ОТНОШЕНИЕ ПАТОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ К ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИМ УГЛЕВОДАМ

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ОТНОШЕНИЕ ПАТОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ К ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИМ УГЛЕВОДАМ

Слайд 73

Вирулентность

адгезины, обуславливающие их выраженные адгезивные свойства,
фермент лецитиназа,
основной фактор патогенности термостабильный гемотоксин,

Вирулентность адгезины, обуславливающие их выраженные адгезивные свойства, фермент лецитиназа, основной фактор патогенности
определяет прямой гемолиз и термолабильный гемолизин
энтеротоксины и цитолизины

Слайд 74

характерный признак патогенных штаммов V.parahaemolyticus - способность к гемолизу эритроцитов кролика или

характерный признак патогенных штаммов V.parahaemolyticus - способность к гемолизу эритроцитов кролика или
человека на агаре, содержащем 7%NaCl.
Этот тест получил название «феномена Канагава». Штаммы, обладающие этим свойством, относятся к канагава-положительным, не обладающие – к канагава-отрицательным.

Слайд 75

Этиопатогенез

Источником инфекции являются морепродукты не прошедшие надлежащей кулинарной обработки или инфицированные вибрионами

Этиопатогенез Источником инфекции являются морепродукты не прошедшие надлежащей кулинарной обработки или инфицированные
после приготовления, в результате нарушения правил хранения и транспортировки готовой продукции, а также морская вода.

Слайд 76

Кишечные заболевания

в виде трех клинических форм:
гастроэнтеритической (наиболее часто встречающейся),
дизентерие-

Кишечные заболевания в виде трех клинических форм: гастроэнтеритической (наиболее часто встречающейся), дизентерие-
и
холероподобной, при разной тяжести состояния.

Слайд 77

Внекишечные заболевания

После ранений у иммунодефицитных людей и у наркоманов после инъекций могут

Внекишечные заболевания После ранений у иммунодефицитных людей и у наркоманов после инъекций
развиться абсцессы на руках и ногах, причиной которых является заражение инъекционных ран и раневых участков морскими галофильными вибрионами. В этом участвуют V.alginolyticus, V.vulnificus, V.parahaemolyticus и др.

Слайд 78

Лабораторная диагностика

галофильных инфекционных заболеваний вне зависимости от клинической формы сводится:
микроскопическому
бактериологическому методу

Лабораторная диагностика галофильных инфекционных заболеваний вне зависимости от клинической формы сводится: микроскопическому
с выделением чистой культуры возбудителя и его идентификацией.

Слайд 79

Критерии диагностики пищевых отравлений вызываемых V.parahaemolyticus

«Критериями диагностики заболеваний вызванных V.parahaemolyticus является обнаружение

Критерии диагностики пищевых отравлений вызываемых V.parahaemolyticus «Критериями диагностики заболеваний вызванных V.parahaemolyticus является
их в подозреваемом продукте в количестве 106 и более живых клеток в 1 г/мл, с одновременным обнаружением того же типа возбудителя в кале пострадавших»

Слайд 80

Посев материала (1-2 дни исследования) согласно МУК 4.2.1793-03

РВОТНЫЕ МАССЫ, ПРОМЫВНЫЕ ВОДЫ ЖЕЛУДКА,

Посев материала (1-2 дни исследования) согласно МУК 4.2.1793-03 РВОТНЫЕ МАССЫ, ПРОМЫВНЫЕ ВОДЫ
ИСПРАЖНЕНИЯ

ЩА (щелочной агар с 1,5% NaCl)

Элективные среды (СЭД), TCBS и др.

1-2 г (мл)

50 мл ПВ с 1,5% NaCl

10 мл ПВ с
1,5% NaCl

ЩА

ЩА

Слайд 81

Посев материала (1-2 дни исследования) согласно МУК 4.2.1793-03

ОТДЕЛЯЕМОЕ РАН

Элективные среды (СЭД), TCBS и

Посев материала (1-2 дни исследования) согласно МУК 4.2.1793-03 ОТДЕЛЯЕМОЕ РАН Элективные среды
др.

ПВ с 1,5% NaCl

ПВ с
1,5% NaCl

ЩА

ЩА

Слайд 82

Кровяно - солевой агар (среда Wagatsuma)

Дрожжевой экстракт - 5 г
Пептон - 10

Кровяно - солевой агар (среда Wagatsuma) Дрожжевой экстракт - 5 г Пептон
г
Натрий хлористый - 70 г
Маннит - 5 г
Агар - 15 г
0,1% кристалл-виолет – 0,01 мл
Дистиллированная вода - 1 л

Растворяют все ингредиенты в воде, кипятят, устанавливают рН 7,5. НЕ СТЕРИЛИЗУЮТ. Охлаждают до 50 оС и добавляют 10% отмытых человеческих эритроцитов и разливают в чашки

Среду инкубируют при 35 оС 18-20 часов.
Энтеропатогенные V.parahaemolyticus вызывают гемолиз эритроцитов

Инструкция ... №1135-73

Слайд 83

Штаммы дифференцируются по чувствительности к бактериофагам. Различают А, В, С и

Штаммы дифференцируются по чувствительности к бактериофагам. Различают А, В, С и D
D монофаги, способные лизировать до 60% штаммов галофильных вибрионов, выделенных из разных экосистем.

Слайд 85

Лечение

восстановление нормального водно-солевого обмена или регидратация
Этиотропная терапия показана при тяжелом и длительном

Лечение восстановление нормального водно-солевого обмена или регидратация Этиотропная терапия показана при тяжелом
течении заболевания- тетрациклин, препараты нитрофуранового ряда.
При септических процессах и раневых инфекциях- карбенициллин, цефалотин, хлорамфеникол, гентамицин или тетрациклин