Роль диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге у пациенток с люминальным типом рака молочной железы

Актуальность работы
Многие клиницисты считают, что диссеминированые опухолевые клетки (ДОК) являются причиной последующих. (Smirnova O.V. 2015)
Рак молочной железы(РМЖ) занимает третье место среди онкологических заболеваний по смертности.
За 2017 год было зарегистрировано более 60.000 случаев заболевания, 20% из которых с летальным исходом. (И.В. Поддубная, И.В. Колядин, 2017)

Цель исследования
Определить закономерность появления ДОК в костном мозге у пациенток с люминальным типом РМЖ и выявить взаимосвязь между ДОК и иммунофенотипическими параметрами опухоли и костного мозга (КМ).

Материалы и методы исследования
В исследовании использовалось 65 образцов КМ полученных у пациентов во время плановых операций по поводу РМЖ
Все образцы были подвергнуты стандартным цитологическим методам исследования
Использовался иммунофлюоресцентный анализ с применением моноклональных антител к цитокератинам САМ 5.2 и KL-1
Проточная цитометрия Attune с акустической фокусировкой
Статическая обработка полученных результатов (непараметрический метод по Манн-Уитни)

Иммунофлюоресцентный анализ (ИФА) - способ основанный на визуальном учете меченых антигенов или антител флюорисцирующими красителями с целью выявить антиген или антитело в изучаемого препарате тканей. (merriam-webster.com)
АТ к цитокератинам САМ 5.2
АТ к цитокератинам KL-1

Проточная цитометрия - техника идентификации и сортировки клеток и их компонентов при помощи предварительной обработки флюорисцирующими красителями и последующим выявлением клеток лазерным излучением.
Проточная цитометрия с акустической фокусировкой
Обыкновенная проточная цитометрия

Результаты
У 26 из 65 пациенток с люминальным РМЖ были обнаружены ДОК (40%)
У данных пациенток в большинстве случаев были рецептор негативные опухоли и чаще выявлялись метастазы в лимфатических узлах.
По результатам этого анализа наличие ДОК в КМ был расценен как важный прогностический неблагоприятный фактор

Зависимость между наличием ДОК и рецепторным статусом опухоли
При отсутствии рецепторов эстрогенов (ER) и прогестерона (PR) ДОК были обнаружены у 84,6% пациенток
При налиии рецепторов эстрогенов (ER) – у 28,6 %
При наличии эстрогенов – 25 %

Не было установлено статически значимой связи ДОК-положительного статуса опухоли с ее размером, стадией и степенью злокачественности
Минимальная частота обнаружения ДОК наблюдалась при 1 степени злокачественности 25%, а максимальная при 2 степени злокачественности
Полученные данные указывают, что клинико-морфологические характеристики опухоли не являются определяющими для диссеминации опухолевых клеток в КМ

Сравнение уровней NK-клеток, Т- и В-лимфоцитов в КМ
Единственной статически важной субпопуляцией были клетки CD8 и их уровень - 39,2 %
Наличие Т-лимфоцитов коррелирует с уменьшением метастатической инвазии и повышении общей выживаемости
Костномозговые СD-8, CD-4 и Т-клетки выполняют защитную роль, предотвращают появление метастатических очагов.

Место ДОК в рецидиве опухоли

Выводы
Общие результаты указывают на ценность определения статуса ДОК у пациентов с люминальным РМЖ, а также использования этого показателя в качестве терапевтической мишени
Частота обнаружения ДОК составила 40% и не отличалась при люминальных типах А и В, что указывает на более глубокие молекулярно-генетические и иммунологические взаимоотношения между ДОК и иммунной системой организма и первичной опухолью
CD8-лимфоциты находятся в постоянном взаимодействии с ДОК. При преобладании ДОК появляются отдаленные метастазы, при преобладании лимфоцитов полный контроль и ремиссия РМЖ