Выявление и диагностика туберкулеза.Лекция №3

Содержание

Слайд 2

План лекции.

Выявление туберкулеза.
Процесс диагностики
Методы выявления туберкулеза
Клинический
Лучевой
Эндоскопический Гистоморфологический
Биопсия плевры, легких и лимфатических

План лекции. Выявление туберкулеза. Процесс диагностики Методы выявления туберкулеза Клинический Лучевой Эндоскопический
узлов
Бактериологический
Иммунологический
Микробиологический

Слайд 3

Выявление туберкулеза.

Выявление больных —
составная часть борьбы
с туберкулезом,
направленная на
идентификацию

Выявление туберкулеза. Выявление больных — составная часть борьбы с туберкулезом, направленная на
случаев
этой болезни в обществе.

Слайд 4

Длительное течение туберкулеза у больных, не учтенных противотуберкулезным диспансером, представляет большую эпидемиологическую

Длительное течение туберкулеза у больных, не учтенных противотуберкулезным диспансером, представляет большую эпидемиологическую
опасность для окружающего населения, особенно при массивном и обильном выделении МБТ.

Слайд 5

Процесс диагностики туберкулеза включает несколько этапов:

1. Отбор лиц с различными заболеваниями

Процесс диагностики туберкулеза включает несколько этапов: 1. Отбор лиц с различными заболеваниями
легких среди больных, обратившихся за медицинской помощью в учреждения первичной медико-санитарной помощи (ПМСП):

Лица с рентгенологическими изменениями, подозрительными на туберкулез, при прохождении ежегодной флюорографии (ФГ).
Лица с жалобами, подозрительными на туберкулез (кашель более 3 недель, кровохарканье, субфебрильная температура более 2 недель).
Дети и подростки с положительными реакциями на диагностические тесты.

Слайд 7

Методы обследования больных. 2. ОДМ в ПМСП

1. Анализ жалоб, анамнеза (включая сбор данных

Методы обследования больных. 2. ОДМ в ПМСП 1. Анализ жалоб, анамнеза (включая
о возможном туб. контакте). Данные объективного осмотра.
2. ОАК, ОАМ
3. Рентгенография грудной клетки цифровая или аналоговая, линейная томография.
4. Микробиологическое исследование включающее
Исследование 2х образцов материала методом микроскопии, ПЦР, посева на питательные среды
Идентификация культур выросших на питательных средах
Определение лекарственной чувствительности
5. Диаскинтест

Слайд 8

3. Обследование в учреждениях противотуберкулезной службы (ПТС).

3. Обследование в учреждениях противотуберкулезной службы (ПТС).

Слайд 9

Методы выявления туберкулеза

Массовые
Групповые
Индивидуальные

Методы выявления туберкулеза Массовые Групповые Индивидуальные

Слайд 10

Методы выявления туберкулеза

Клинический
Лучевой
флюорография
R-графия
КТ, МРТ
Эндоскопический(ФБС, медиастиноскопия…)
Бактериологический
простая микроскопия с окраской по Цилю-Нельсену
люминисцентная микроскопия
культуральный метод

Методы выявления туберкулеза Клинический Лучевой флюорография R-графия КТ, МРТ Эндоскопический(ФБС, медиастиноскопия…) Бактериологический
(посев, Бактэк)
ПЦР
6.Иммунологический
туберкулинодиагностика
ИФА
IGRA-тесты.
7.Гистоморфологический(Биопсия плевры, легких и лимфатических узлов)

Слайд 11

Клинический метод выявления туберкулеза.

Исследование любого больного включает в себя этапы:
• сбор жалоб на

Клинический метод выявления туберкулеза. Исследование любого больного включает в себя этапы: •
момент заболевания;
• анамнез заболевания (anamnesis morbi);
• эпидемиологический анамнез
• анамнез жизни (anamnesis vitae);
• объективное исследование (осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация)

Слайд 12

Характерные клинические признаки по которым можно заподозрить туберкулёз:

Жалобы :
• слабость

Характерные клинические признаки по которым можно заподозрить туберкулёз: Жалобы : • слабость
,утомляемость;
• ночной пот;
• повышение температуры;
• подкашливание;
• кашель с мокротой ;
• боли в грудной клетке ;
• похудание;
• кровохарканье.

Слайд 13

Анамнез жизни:

психические и физические травмы , стрессы (экзамен, развод);
беременность , роды ;
сопутствующие

Анамнез жизни: психические и физические травмы , стрессы (экзамен, развод); беременность ,
заболевания (сахарный диабет, язвенная болезнь);
наркомания;
алкоголизм ;
ВИЧ-инфекция;
хронический бронхит и курение(синдром неподвижных ресничек);
бесплодие (до 90% это туберкулёз );
импотенция
места лишения свободы .
профессиональные вредности
пороки развития легких

Слайд 14

Эпидемиологический анамнез:
контакт с больным туберкулёзом человеком или животным (квартирный, профессиональный, семейный)
перенесённый туберкулёз

Эпидемиологический анамнез: контакт с больным туберкулёзом человеком или животным (квартирный, профессиональный, семейный) перенесённый туберкулёз

Слайд 15

Анамнез заболевания:

Острое, подострое, «бессимптомное» начало заболевания
Бессимптомный туберкулез – плохо собранный анамнез и

Анамнез заболевания: Острое, подострое, «бессимптомное» начало заболевания Бессимптомный туберкулез – плохо собранный
плохо осмотренный больной
Длительность
Регулярность ФГ исследований
Регулярность проведения пробы Манту
Детали маршрута пациента на этапах медицинской помощи
Предшествующее лечение

Слайд 16

Осмотр :

Внешний вид (habitus phtisicus ):
дефицит массы тела, румянец на бледном

Осмотр : Внешний вид (habitus phtisicus ): дефицит массы тела, румянец на
лице, блеск глаз и широкие зрачки, дистрофические изменения кожи, длинная и узкая грудная клетка, расширенные межреберные промежутки, острый надчревный угол, отстающие (крыловидные) лопатки

Слайд 17

Кожные покровы:
Бледность, цианоз, бронзовый оттенок
Наличие сыпи (геморрагической, папулезной и т.д.)
Расширение венозной сети

Кожные покровы: Бледность, цианоз, бронзовый оттенок Наличие сыпи (геморрагической, папулезной и т.д.)
(симптомы Видергофера , Франка)
Гнойные свищи (шея, спина, над лимфоузлами)
Стигмы дизонтогенеза:

Слайд 18

Периферические лимфоузлы:
лимфоаденопатии
полиадения

Периферические лимфоузлы: лимфоаденопатии полиадения

Слайд 19

Параспецифические реакции
(кератоконъюнктивит, артралгия и т.д.)

Параспецифические реакции (кератоконъюнктивит, артралгия и т.д.)

Слайд 20

Перкуссия :
• лёгких;
• подвижности диафрагмы ;
• сердца.
Аускультация :

Перкуссия : • лёгких; • подвижности диафрагмы ; • сердца. Аускультация :
жёсткое , ослабленное дыхание ;
• хрипы.

Методы физикального обследования:

Слайд 21

Лабораторные исследования :

• анализ крови : СОЭ 16-40 ;
лимфопения;
моноцитоз.
• анализ

Лабораторные исследования : • анализ крови : СОЭ 16-40 ; лимфопения; моноцитоз.
мочи : белок ;
эритроцитурия;
лейкоцитурия.

Слайд 22

После того, как врач предположил туберкулез. Ему необходимо подтвердить свой диагноз.

После того, как врач предположил туберкулез. Ему необходимо подтвердить свой диагноз.

Слайд 23

В соответствии с федеральными клиническими рекомендациями по диагностике и лечению туберкулеза органов

В соответствии с федеральными клиническими рекомендациями по диагностике и лечению туберкулеза органов
дыхания от 2014г:

Обязательный диагностический минимум (ОДМ) включает в себя:

Рентгенография грудной клетки цифровая или аналоговая.
Линейная томография.
Микробиологические исследования, включающие:
– исследование двух образцов диагностического материала методами микроскопии, ПЦР, посева на жидкие и/или плотные питательные среды;
– идентификация культур, выросших на питательных средах;
– определение лекарственной чувствительности (ЛЧ) микобактерий туберкулеза (МБТ) к противотуберкулезным препаратам (ПТП) классическими микробиологическими и молекулярно-генетическими методами (МГМ).
Диаскинтест детям и подросткам

Слайд 24

Если диагноз не ясен, проводятся дополнительные методы исследования (ДМИ):

Неинвазивные
Допускается (при

Если диагноз не ясен, проводятся дополнительные методы исследования (ДМИ): Неинвазивные Допускается (при
необходимости) увеличение кратности микробиологического исследования мокроты.
Спиральная компьютерная томография в алгоритме высокого разрешения с шагом томографа не более 2-мм легких и средостения.

Слайд 25

Лучевые.

• крупнокадровая флюорография(размер кадров 70x70,100x100 и 110x110мм) – устарел, практически не используется

Лучевые. • крупнокадровая флюорография(размер кадров 70x70,100x100 и 110x110мм) – устарел, практически не
;
• цифровая малодозная флюорография;
• рентгенография;
• различные виды томографии, в том числе компьютерная томография (КТ);
• томосинтез
• рентгеноконтрастные методы: бронхография, фистулография, плеврография, ангиопульмонография
• радиоизотопное исследование
• ультразвуковое исследование

Слайд 26

Множественные туберкуломы, очаги

крупнокадровая флюорография

Множественные туберкуломы, очаги крупнокадровая флюорография

Слайд 27

Туберкулез внутригрудных лимфатических узлов, осложненный бронхолимфогенной диссеминацией. (а, б) высокоразрешающая КТ, легочное

Туберкулез внутригрудных лимфатических узлов, осложненный бронхолимфогенной диссеминацией. (а, б) высокоразрешающая КТ, легочное
окно, уровень базальных сегментов нижних долей . В задних сегментах нижних долей обоихлегких, преимущественно в кортикальных отделах, множественные полиморфные центрилобулярные очаги,

(в) КТ-ангиография, мягкотканное окно, уровень левого главного бронха. В корне левого легкого крупные увеличенные лимфатические узлы.

Слайд 28

Бронхография

Бронхография

Слайд 29

Ангиопульмонография

ТЭЛА

Ангиопульмонография ТЭЛА

Слайд 30

Радиоизотопное исследование

Радиоизотопное исследование

Слайд 31

Ультразвуковое исследование

Ультразвуковое исследование

Слайд 32

Инвазивные (по показаниям)
с цитологическим, гистологическим и микробиологическим исследованием диагностического материала (микроскопия,

Инвазивные (по показаниям) с цитологическим, гистологическим и микробиологическим исследованием диагностического материала (микроскопия,
ПЦР, посев, определение ЛЧ микробиологическими и молекулярно-генетическими методами)
Фибробронхоскопия с комплексом биопсий: браш-биопсией, транстрахеальной и трансбронхиальной пункцией, прямой биопсией слизистой оболочки бронхов, патологических образований в них, исследование бронхоальвеолярных смывов (БАС).
Трансторакальная аспирационная биопсия легкого.
Пункционная биопсия плевры.
Диагностические операции: медиастиноскопия с биопсией лимфоузлов, открытая биопсия легкого и лимфоузлов, открытая биопсия плевры.

Слайд 33

Эндоскопические.

Бронхоскопия Торакоскопия Медиастиноскопия

Эндоскопические. Бронхоскопия Торакоскопия Медиастиноскопия

Слайд 34

Иммунологические.

Туберкулинодиагностика:
Проба Манту
Проба Коха
Проба Пирке
Диаскинтест
Тесты освобождения гамма-интерферона (IGRA-тесты)

Иммунологические методы — диагностические

Иммунологические. Туберкулинодиагностика: Проба Манту Проба Коха Проба Пирке Диаскинтест Тесты освобождения гамма-интерферона
методы исследования, основанные на специфическом взаимодействии антигенов и антител.

Слайд 35

Проба Манту (проба Пирке, туберкулиновая проба, туберкулинодиагностика, tuberculin skin-test, PPD test)

Метод

Проба Манту (проба Пирке, туберкулиновая проба, туберкулинодиагностика, tuberculin skin-test, PPD test) Метод
исследования напряженности иммунитета к возбудителю туберкулеза с помощью оценки реакции на специальный препарат микобактерий, туберкулин.
Согласно рекомендациям ВОЗ и Международного союза по борьбе с туберкулезом и легочными заболеваниями (International Union against Tuberculosis and Lung Diseases, IUATLD), пробу проводят с двумя туберкулиновыми единицами очищенного туберкулина (PPD).

Слайд 36

Туберкулин (точное название «альттуберкулин», АТ) Коха – это «вытяжка», лизат из микобактерий

Туберкулин (точное название «альттуберкулин», АТ) Коха – это «вытяжка», лизат из микобактерий
туберкулеза, инактивированных нагреванием.
С конца 60-х годов 20-го столетия были разработаны чистые препараты туберкулина (не содержащие примесей), так называемые PPD (Purified Protein Derivate – очищенный дериват белка), которые применяются и по сей день.
В России применяется препарат ППД-Л, т.е. очищенный туберкулин, полученный русским ученым Линниковой в 1965 году.

Слайд 37

Что такое реакция Манту?

Реакция Манту – это результат реакции организма на введение

Что такое реакция Манту? Реакция Манту – это результат реакции организма на
туберкулина.
В месте инъекции препарата в кожу возникает специфическое воспаление, вызванное инфильтрацией Т-лимфоцитами.

Слайд 39

Реакция считается: отрицательной - при полном отсутствии уплотнения или при наличии только

Реакция считается: отрицательной - при полном отсутствии уплотнения или при наличии только
уколочной реакции (0-1 мм); сомнительной - при “пуговке” размером 2-4 мм и при покраснении любого размера без уплотнения; положительной - при наличии выраженного уплотнения диаметром 5 мм и более. Слабо положительными считаются реакции с размером “пуговки” 5-9 мм в диаметре; средней интенсивности - 10-14 мм; выраженными - 15-16 мм; очень сильно выраженной у детей и подростков считается реакция с диаметром уплотнения 17 мм и более.

Слайд 40


В Российской Федерации впервые в мировой практике разработан на базе двух

В Российской Федерации впервые в мировой практике разработан на базе двух рекомбинантных
рекомбинантных белков ESAT-6/CFP-10 препарат ДИАСКИНТЕСТ, предназначенный для:

дифференциальной диагностики туберкулеза;
оценки активности процесса;
дифференциальной диагностики инфекционной и поствакцинной аллергии;
оценки эффективности лечения в комплексе с другими методами.

Слайд 41

Препарат ДИАСКИНТЕСТ® представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia

Препарат ДИАСКИНТЕСТ® представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli.
coli.
Содержит два антигена (ESAT-6 и CFP-10), продуцируемые вирулентными и размножающимися штаммами МБТ и не продуцируемые:
- БЦЖ-МБТ,
- неразмножающимися МБТ
- большинством нетуберкулезных микобактерий (M.avium, M.fortuitum, M.xenopi, M.celatum и др.)

Слайд 42

ПРИ ВНУТРИКОЖНОМ ВВЕДЕНИИ ПРЕПАРАТА ДИАСКИНТЕСТ®
развивается специфическая кожная реакция, являющаяся проявлением гиперчувствительности

ПРИ ВНУТРИКОЖНОМ ВВЕДЕНИИ ПРЕПАРАТА ДИАСКИНТЕСТ® развивается специфическая кожная реакция, являющаяся проявлением гиперчувствительности замедленного типа
замедленного типа

Слайд 43

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ – полное отсутствие инфильтрата и гиперемии или “уколочная реакция”
СОМНИТЕЛЬНЫЙ

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ – полное отсутствие инфильтрата и гиперемии или “уколочная реакция” СОМНИТЕЛЬНЫЙ –
– при наличии гиперемии без инфильтрата
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

СЛАБО ВЫРАЖЕННАЯ – инфильтрат до 5 мм
УМЕРЕННО ВЫРАЖЕННАЯ – инфильтрат 5-9 мм
ВЫРАЖЕННАЯ – инфильтрат 10 мм и более
ГИПЕРЕРГИЧЕСКАЯ – инфильтрат 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата

Слайд 44

А., 16 лет, с 2005 г. по поводу инфицирования , ежегодно проводилась

А., 16 лет, с 2005 г. по поводу инфицирования , ежегодно проводилась
превентивная химиотерапия. Диаскинтест «-», р. Манту «+».

Слайд 45

Г., 12 лет, ТВГЛУ в фазе кальцинации, излечение ДИАСКИНТЕСТ «-»., п. Манту

Г., 12 лет, ТВГЛУ в фазе кальцинации, излечение ДИАСКИНТЕСТ «-»., п. Манту «+»
«+»

Слайд 46

К. , 8 лет ТВГЛУ

К. , 8 лет ТВГЛУ

Слайд 47

М., 9 лет, поствакцинная аллергия (Манту «+», Диаскинтест «-»

М., 9 лет, поствакцинная аллергия (Манту «+», Диаскинтест «-»

Слайд 48

С., 11 лет, из контакта с бактериовыделителем: (п. Манту «+», Д –

С., 11 лет, из контакта с бактериовыделителем: (п. Манту «+», Д – тест «+»)
тест «+»)

Слайд 49

Уколочная реакция на Диаскинтест

Уколочная реакция на Диаскинтест

Слайд 50

Пример «извращенной» реакции на Диаскинтест у
больного атопическим дерматитом

Пример «извращенной» реакции на Диаскинтест у больного атопическим дерматитом

Слайд 51

- Отсутствие инфицирования МБТ
- Неактивная туберкулезная инфекция у ранее инфицированных лиц
- Инфицирование

- Отсутствие инфицирования МБТ - Неактивная туберкулезная инфекция у ранее инфицированных лиц
или заболевание, вызванное нетуберкулезными микобактериями
- У больных с иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса
- У лиц с сопутствующей патологией, сопровождающейся иммунодефицитным состоянием (ВИЧ, иммуносупрессивная терапия в т.ч. после трансплантации органов)

ОСНОВНЫЕ ПРИЧИНЫ ОТРИЦАТЕЛЬНОЙ РЕАКЦИИ НА ДИАСКИНТЕСТ®

Слайд 52

Выводы:

1. Диаскинтест является:
одним из основных тестов в дифференциальной диагностике поствакцинальной и инфекционной аллергии.
тестом

Выводы: 1. Диаскинтест является: одним из основных тестов в дифференциальной диагностике поствакцинальной
с высокой информативностью (чувствительность - 92,7% у детей и 81,5% у взрослых, специфичности - 93,7% у взрослых).
2. Считается целесообразным с целью дифференциальной диагностики и определения активности туберкулезного процесса одновременное проведение пробы Манту с 2 ТЕ и Диаскинтеста

Слайд 53

Тесты освобождения гамма-интерферона (IGRA-тесты)

Открытие антигенов, специфичных для МБТ и отсутствующих в штамме BCG

Тесты освобождения гамма-интерферона (IGRA-тесты) Открытие антигенов, специфичных для МБТ и отсутствующих в
и большинстве НТМБ, привело к разработке диагностических тестов in vitro.
В основе этих методов лежит выявление секреции интерферона-гамма (ИНФγ) мононуклеарными клетками периферической крови в результате их взаимодействия со специфическими белками микобактерий туберкулеза (ESAT-6 и CFP-10).

Слайд 54

У людей с ВИЧ-негативным статусом эти тесты показали высокую чувствительность и почти

У людей с ВИЧ-негативным статусом эти тесты показали высокую чувствительность и почти
абсолютную специфичность по выявлению Латентной ТИ.
В Российской Федерации в клинической практике используются тест-системы
T-SPOT.TB и QuantiFERON-TB Gold.
Широкому применения IGRA-тестов препятствует высокая стоимость исследования и необходимость специального лабораторного оборудования.

Слайд 55

Микробиологические методы диагностики туберкулеза.

Бактериоскопический (прямая, люминесцентная микроскопия)
Бактериологический (культуральный, посев на питательные среды,

Микробиологические методы диагностики туберкулеза. Бактериоскопический (прямая, люминесцентная микроскопия) Бактериологический (культуральный, посев на
BACTEC)
Биологический (заражение подопытных животных патологическим материалом), в настоящее время в клинической практике не используется.

Слайд 56

Патологическим материалом для исследования на наличие МБТ является
мокрота,
промывные воды желудка,

Патологическим материалом для исследования на наличие МБТ является мокрота, промывные воды желудка,
бронхов,
моча,
кал,
спинномозговая жидкость,
экссудат из плевральной и брюшной полостей,
гной из натечников,
синовиальная жидкость,
пунктат из лимфоузлов,
менструальная кровь.

Слайд 57

Бактериоскопический метод

С целью лучшего выявления бактеpии тубеpкулеза pекомендуется забиpать тpи пpобы. Хотя

Бактериоскопический метод С целью лучшего выявления бактеpии тубеpкулеза pекомендуется забиpать тpи пpобы.
бы одна из них должна быть собpана pанним утpом.

Слайд 58

Окраска по Ziehl Neelsen

Кислотоустойчивые микобактеpии видны как тонкие
кpасные палочки на голубом фоне.

Окраска по Ziehl Neelsen Кислотоустойчивые микобактеpии видны как тонкие кpасные палочки на
Они могут быть слегка
изогнутыми, зеpнистыми и могут pасполагаться
поодиночке, паpами или гpуппами.

Слайд 59

Микроколонии M. tuberculosis в виде жгутов и кос. Циль-Нельсен х900

Микроколонии M. tuberculosis в виде жгутов и кос. Циль-Нельсен х900

Слайд 60

Бактериоскопический метод

прямая микроскопия, разрешающая способность очень низкая (100 000 микобактерий туберкулеза в

Бактериоскопический метод прямая микроскопия, разрешающая способность очень низкая (100 000 микобактерий туберкулеза
1 мл исследуемого материала).
люминесцентная микроскопия (10 000 МБТ в 1 мл исследуемого материала).

Слайд 61

Результаты бактериоскопии оценивают следующим образом:

1-9 КУМ в 100 п/з (указывают точное число

Результаты бактериоскопии оценивают следующим образом: 1-9 КУМ в 100 п/з (указывают точное
КУМ) – единичные КУМ в препарате;
10-99 КУМ в 100 п/з (1+) – единичные КУМ в поле зрения;
1-10 КУМ в 1 п/з (2+) – умеренное количество КУМ;
более 10 КУМ в 1 п/з (3+) – значительное количество КУМ.

Слайд 62

Исследование мокроты с окраской по Циль-Нельсену на КУМ

чувствительность метода – 50% (в

Исследование мокроты с окраской по Циль-Нельсену на КУМ чувствительность метода – 50%
50% случаев ложноотрицательные результаты)
специфичность метода – 96% (4% ложноположительных результатов)


Слайд 63

Бактериологический метод

позволяет типировать культуру микобактерий
позволяет судить о чувствительности культуры микобактерий к различным

Бактериологический метод позволяет типировать культуру микобактерий позволяет судить о чувствительности культуры микобактерий к различным химиопрепаратам
химиопрепаратам

Слайд 64

Результаты посева на МБТ

S -формы колоний микобактерий

R-формы колоний
микобактерий

Результаты посева на МБТ S -формы колоний микобактерий R-формы колоний микобактерий

Слайд 65

Оценка культурального метода
1-20 КОЕ (1+) – «скудное» бактериовыделение;
21-100 КОЕ (2+) – «умеренное»

Оценка культурального метода 1-20 КОЕ (1+) – «скудное» бактериовыделение; 21-100 КОЕ (2+)
бактериовыделение;
более 100 КОЕ (3+) – «обильное» бактериовыделение.

Слайд 66

Посев мокроты на МБТ

- чувствительность метода – 87% (13% ложноотрицательных результатов)

Посев мокроты на МБТ - чувствительность метода – 87% (13% ложноотрицательных результатов)
- специфичность метода – 99% (1% ложноположительных результатов)

Слайд 67

В последние годы для ускорения роста микобактерий предложены питательные среды на агаровой

В последние годы для ускорения роста микобактерий предложены питательные среды на агаровой
основе с различными ростовыми добавками и применением специальной газовой смеси.

BACTEC

Слайд 68

Система BACTEC относится к разработкам высоких технологий и предназначена для ускоренной бактериологической

Система BACTEC относится к разработкам высоких технологий и предназначена для ускоренной бактериологической
диагностики туберкулёза и определения чувствительности микобактерий к препаратам первого ряда и некоторым препаратам второго ряда.

Слайд 69

В её основе лежит флюоресценция, возникающая при потреблении кислорода микобактериями в процессе

В её основе лежит флюоресценция, возникающая при потреблении кислорода микобактериями в процессе
роста.
Кислородзависимый флюорохромный краситель содержится на дне специальной пробирки и покрыт слоем силикона.
Размножение микобактерий приводит к уменьшению количества кислорода в пробирке и снижению его концентрации, что вызывает усиление флюоресценции, которая становится видимой при облучении пробирки ультрафиолетовым свете и автоматически регистрируется фотодатчиками, встроенными в прибор ВАСТЕС- 960.

Слайд 70

Интенсивность свечения регистрируют в единицах роста (GU— growth units). Данные роста заносятся

Интенсивность свечения регистрируют в единицах роста (GU— growth units). Данные роста заносятся
в компьютер, где их можно сохранить, автоматически.
Компьютерный анализ кривых роста может дать информацию о наличии различных пулов микобактерий, в том числе нетуберкулезных, а также помогает оценить ростовые свойства микобактерий.

Слайд 71

В результате внедрения таких систем время появления роста микобактерий зна­чительно сократилось, составляя

В результате внедрения таких систем время появления роста микобактерий зна­чительно сократилось, составляя
в среднем 11 - 19 дней, против 30-60 дней на стандартной плотной питательной среде.
Необходимо отметить, что эти системы требуют высокой квалификации персонала. Посев материала на жидкие среды обязательно сопровождают посевом на среду Левенштейна-Йенсена, играющую роль дублёра в тех случаях, когда на других средах микобактерий туберкулеза не дают роста.

Слайд 72

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР позволяет проводить прямое определение микроорганизмов непосредственно в клиническом

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) ПЦР позволяет проводить прямое определение микроорганизмов непосредственно в
материале без получения чистой культуры возбудителя.

ПЦР - диагностика туберкулеза как правило строится на использовании последовательностей ДНК специфичных для всех видов группы туберкулеза.

Слайд 73

Биочипы

Биочипы

Слайд 74

В основе принципа работы всех молекулярных биочипов с иммобилизованными зондами лежит способность

В основе принципа работы всех молекулярных биочипов с иммобилизованными зондами лежит способность
биологических макромолекул к молекулярному узнаванию (высокоспецифичному избирательному связыванию с другими молекулами).

Слайд 75

На матрице расположено около 100 ячеек в которых содержится вещество позволяющее определить

На матрице расположено около 100 ячеек в которых содержится вещество позволяющее определить
наличие определенного участка ДНК.
При нанесении материала, содержащего участки ДНК способные связаться с материалом ячейки биочипа, после соответствующей обработки, появляется флюоресцентное свечение.

Слайд 76

Интенсивности флуоресценции из ячеек измеряются с помощью люминесцентного микроскопа, передающего сигнал на

Интенсивности флуоресценции из ячеек измеряются с помощью люминесцентного микроскопа, передающего сигнал на
прибор с зарядовой связью. После этого данные подвергаются компьютерной обработке.
Имя файла: Выявление-и-диагностика-туберкулеза.Лекция-№3.pptx
Количество просмотров: 39
Количество скачиваний: 0