Интерфероногенез при ротавирусной инфекции и возможности терапии

По данным ВОЗ в мире ежегодно регистрируется от 68,4 млн. до 275 млн. диарейных заболеваний.
Диарейные заболевания – третья наиболее частая причина смертности среди детей младше 5-ти лет в мире после перинатальных заболеваний и заболеваний респираторного тракта.
Они отвечают более чем за 1 млн. смертей ежегодно среди детей на земном шаре.
http://child epidemiology.htm www.who.int/child- adolescenthealth/OVERW/CHILD HEALTH/

На первый план во всем мире среди ОКИ выходят секреторные диареи, возбудителями которых могут быть вирусы (рота-, адено-, астро-, калици-, рео-, кишечные коронавирусы).
Ротавирусная инфекция является ведущим фактором ОКИ среди детей младшего возраста во всем мире.
Среди всех вирусных диарей ротавирус вызывает наиболее тяжелое течение у детей до 5 лет и составляет 30-50 % от всех госпитализаций по поводу ОКИ, достигая до 70 % в сезонный пик – зимние месяцы.
U.D. Parashar et al., 2006

1Parashar UD et al, Emerg Infect Dis 1998;4(4):561–570
Figure:Kapikian AZ, Chanock RM. Rotaviruses. In: Fields Virology 3rd ed. Philadelphia, PA: Lippincott-Raven; 1996:1659
Ежегодно во всем мире Ротавирус является причиной острой диареи в одной трети случаев1
Заболеваемость ротавирусным гастроэнтеритом у младенцев и маленьких детей не отличается в развитых и развивающихся странах1

Главные причины, которые не дают детям дожить до 5 лет
ВОЗ выделила 5 основных причин смертности детей до 5 лет:
Острые респираторные инфекции (в основном пневмонии)
Корь
Диареи
Малярия
Нарушение питания

Структура смертности детей в Украине от инфекционных заболеваний в 2009 г.
(данные статистики МЗ Украины)

География исследований в Украине
2006-2007 гг.
2680 образцов

г.Киев

г.Одесса

г.Львов

г.Харьков

г.Умань

Классификация Ротавирусов
A
G1P[8]
VP4
VP7
Типы
C, D, E, F, G
G
P
(1-14 )
(1-14)2
G2P[4]
G3P[8]
G4P[8]
Reoviridae
семейство
Группы
B
(7 )
VP6
Modified from 1Parashar UD et al, Emerg Infect Dis 1998;4(4):561–570; 2Santos N, Hoshino Y. Rev Med Virol 2005;15:29-56
G9P[8]
Самые распространенные типы

Установленные серо/генотипы ротавирусов, циркулирующих в Украине в 2006–2007 гг.
38,8%
20,1%
Дзюблик И.В., Обертинская О.В., 2009

Современные подходы к терапии ротавирусной инфекции у детей:
1. Диетотерапия
2. Регидратационная терапия
3. Этиотропная терапия - интерфероны и индукторы ИФН:
- кипфероны;
- рекомбинантные интерфероны ;
- циклоферон ;
- анаферон;
- специфический антиротавирусный иммуноглобулин ;
- арбидол .
4. Пробиотики
5. Энтеросорбенты
6. Ферментотерапия
7. Симптоматические антидиарейные средства
8. Посиндромная терапия

Цель нашего иследования: оценить состояние интерфероногенеза у детей с ротавирусной инфекцией для обоснования применения отечественного препарата рекомбинантного интерферона альфа 2 бета-ЛАФЕРОНа в комплексной терапии ротавирусной инфеции.
Задачи:
1.Оценить клиническую эффективность применения рекомбинантного интерферона альфа 2 бета-ЛАФЕРОНа у больных ротавирусной инфекцией.
2.Исследовать в динамике ИФН статус у детей с ротавирусной инфекцией.
3.Проанализировать влияние ИФН-терапии с применением препаратов рекомбинантного альфа-2 бета ИФН-ЛАФЕРОНа на клиническое течение и функциональное состояние системы ИФН у детей с ротавирусной инфекцией.

Дизайн исследования
В исследовании принимали участие 60 детей в возрасте от 3 мес. до 3 лет, у которых был установлен диагноз ротавирусной инфекции по данным клиники и подтверждён лабораторно выявлением ротавирусов в кале методами ИФА и РНГА в титре 1:16 – 1:128
Основную группу составили 30 больных острыми кишечными инфекциями, в комплексную терапию которых был включен препарат альфа 2 бета-интерферон, рекомбинантная форма - ЛАФЕРОН.
Контрольную группу составили 30 больных, получавших стандартную терапию.
Препарат вводили в суппозиториях в течении 5 дней из расчёта 100 тыс.МЕ/кг. массы тела.

Tabasco, Mexico Jan 2005
«Лицо» ротавируса
Диарея
Рвота
Дегидратация
Шок
Смерть

Динамика проявлений интоксикационного синдрома при разных методах лечения (в баллах)
*-достоверная разница с показателем контрольной группы (P<0,05)

Динамика консистенции стула при разных методах лечения
*-достоверная разница с показателем контрольной группы (P<0,05)

Динамика кратности испражнений при разных методах лечения
*-достоверная разница с показателем контрольной группы (P<0,05)

Определение функционального состояния системы ИФНа у детей с ротавирусной инфекцией было проведено в динамике по трём показателям,объединённых в группу оценочных тестов, под названием " интерфероновый статус организма".
1.Первый тест- определяет уровень циркулирующего ИФН в крови (сывороточный ИФН) и является объективным суммарным критерием количества данного белка.
2.Второй тест- определяет способность лейкоцитов крови продуцировать альфа-ИФН в ответ на индукцию вирусными агентами. Это интерфероновая реакция лимфоцитов (ИРЛ).
3.Третий тест- определяет способность лимфоцитов крови продуцировать гамма- ИФН(иммунный ИФН).
Определение уровней продукции альфа-ИФН и гамма-ИФН даёт информацию относительно функциональной активности системы ИФН.

У человека образуются три основных вида интерферонов (альфа-, бета- и гамма-интерферон)

Выявлено, что у большинства больных с вирусными и вирусно-бактериальными инфекциями имеют место выраженные нарушения в системе интерферона: снижение способности лейкоцитов к продукции α и γ-интерферонов. При этом следует отметить, что уровень α и γ-интерферонов будет тем ниже, чем тяжелее протекает вирусная инфекция и может рассматриваться как показание для интерферонстимулирующей терапии (Нестерова И.В., 1998-2002 гг.)

В крови здоровых людей обычно определяется низкий уровень интерферонов (нет антигенной стимуляции и иммунная система находится в неактивном состоянии),а выделенные из крови лейкоциты после стимуляции антигеном дают высокую продукцию интерферона-альфа и интерферона-гамма.

Исследование динамики интерферонообразования у детей с ротавирусной инфекцией показало, что в остром периоде инфекции в сыворотке крови детей наблюдалось достоверное повышение (р<0,01) уровня сывороточного ИФН (3,47±0,16 log2 МЕ/мл.)
Анализ динамики образования альфа- и гамма-ИФН лейкоцитами периферической крови свидетельствовал о достоверном снижении (р<0,01) уровня альфа-ИФН до 2,14± 0,14 log2 МЕ/мл. и гамма-ИФН до 1,36± 0,10 log2МЕ/мл.

Показатели ИФН статуса у здоровых и больных РВИ детей

Показатели ИФН статуса после применения различных методов терапии

Сравнение показателей ИФН статуса у
детей после применения различных методов лечения

Данные вирусологического исследования испражнений при разных методах лечения

Оценка эффективности препарата Лаферон в схеме терапии ОКИ у детей

Выводы:
1. Установлено, что у детей в остром периоде ротавирусной инфекции наблюдается достоверное (p<0,01) повышение уровня сывороточного интерферона и угнетение способности лейкоцитов крови к продукции альфа-ИФН и гамма-ИФН.
2. Эффективность ЛАФЕРОНа заключается в быстрой регрессии клинических проявлений заболевания, а именно: динамике интоксикационного синдрома, частоты и характера испражнений, длительности выделения ротавируса. В случае госпитализации ребёнка в ранние сроки заболевания, применение ЛАФЕРОНа приводит к укорочению продолжительности основных клинических проявлений за счёт стимуляции интерфероногенеза и более быстрой санации организма от вируса.
3. Препарат ЛАФЕРОН в суппозиториях ректальных имеет высокую эффективность, хорошую переносимость, удобен в комплексной терапии кишечных инфекций ротавирусной этиологии у детей.