Микробиологическая диагностика коклюша и паракоклюша

Коклюш и паракоклюш -- острые инфекционные заболевания, клинически не отделимые друг от друга. Характеризуются преимущественным поражением дыхательных путей, центральной нервной системы, циклическим течением и своеобразными приступами судорожного кашля, заканчивающегося громким свистящим вдохом и выделением тягучей вязкой мокроты, а иногда и рвотой. Они несколько отличаются друг от друга тем, что при коклюше ведущим клиническим симптомом является спазматический кашель, паракоклюш имеет сходную клиническую картину, но легче протекает.

Возбудитель коклюша: Bordetella pertussis
Морфология бактерий рода Bordetella
Окраска по Граму
Возбудитель паракоклюша: Bordetella parapertussis

Вordetella pertussis, как правило, локализуется в эпителии дыхательных путей.

Как распознать коклюш
основные симптомы

Материал для исследования:
мокрота, слизь из носоглотки. Материал берут стерильным ватным тампоном из носоглотки больного ребенка. Для взятия материала у маленьких детей тампон, приготовленный на тонкой эластичной проволоке, вводят через нос.

Бактериоскопическое исследование
Для быстрого обнаружения и идентификации Bordetella pertussis используют иммунофлюоресцентный метод.

Бактериологическое исследование.
Материал для посева берут с помощью носоглоточного тампона или методом "кашлевых пластинок".

Культивируют 28-72 ч.
Материал засевают на КУА или кровяные среды - картофельно-глицериновый кровяной агар (среда Борде-Жангу) и молочно-кровяной агар.

На КУА колонии имеют серовато-кремовый цвет, а на среде Борде-Жангу приобретают жемчужный или ртутный блеск. Колонии B.parapertussis более крупные.
КУА
Борде-Жангу

При наличии в мазках овоидных грамотрицательных палочек ставят ориентировочную реакцию агглютинации с коклюшной и паракоклюшной сыворотками. Затем подозрительные колонии пересевают в пробирки для дальнейшего изучения чистых культур.

Идентификацию выделенной культуры производят на основании комплексного изучения морфологических, культуральных, биохимических и серологических свойств
Дифференциальные признаки Bordetella spp.

При бактериологической диагностике коклюша может возникнуть необходимость дифференциации бордетелл от Наетоphilus influenzae,
В отличие от бордетелл Н.influenzae растет только на кровяных питательных средах - кровяном агаре, "шоколадном" агаре Левинталя, содержащих гемин и коэнзим дегидрогеназы.

Экспресс-методы диагностики
Иммунохимические исследования
Метод ИФ:мазок обрабатывают флюоресцирующими противококлюшными антителами, другой - паракоклюшными антителами. Препараты микроскопируют в люминесцентном микроскопе. О положительном результате свидетельствует обнаружение темных бактериальных клеток с четким светящимся венчиком.

Биохимические и молекулярно-биологические исследования проводят методом ПЦР.

Серодиагностика
Реакции агглютинации и РСК применяют в основном для ретроспективного подтверждения диагноза и дифференциальной диагностики атипичных форм коклюша.