Санитарно-микробиологическое исследование воздуха. Микрофлора воздуха

МИКРОФЛОРА ВОЗДУХА
Воздух является неблагоприятной средой обитания микроорганизмов, т.к. в нем отсутствуют питательные вещества, необходимые для поддержания их жизни и размножения. Одним из важных условий для вживания в воздухе является способность микроорганизмов противостоять высушиванию, действию УФ- и радиоактивных лучей, колебаниям температуры и др. неблагоприятным факторам.
Микрофлора атмосферного воздуха формируется в основном за счет почвенных микроорганизмов, в меньшей степени они попадают в воздух с поверхности воды или растений.
В атмосферном воздухе обнаруживаются сапрофитные микроорганизмы, представленные кокками (микрококки, сарцины и др.), споровыми бактериями (Bacillus subtilis, B.cereus, B.mesentericus и др.), актиномицетами и грибами (Penicillium, Aspergillus, Mucor и др.)
Bacillus subtilis
грибы рода Aspergillus
сарцины

МИКРОФЛОРА ВОЗДУХА
Атмосферный воздух значительно отличается по количеству микроорганизмов и их видовому составу от воздуха закрытых помещений. Бактериальная обсемененность воздуха закрытых помещений всегда выше, чем атмосферного воздуха.
В составе воздуха закрытых помещений помимо сапрофитной микрофлоры находятся микроорганизмы, которые выделяет человек через дыхательные пути (при разговоре, кашле, чихании), с поверхности кожи, с пылью загрязненного постельного белья и др. источников (домашние животные, декоративные птицы).
Здоровый человек (10000-20000 микробных тел)
Больной и бактерионоситель (значительно больше)
Присутствие в воздухе патогенных микроорганизмов свидетельствует о санитарном неблагополучии объектов исследования, т.к. воздушно-капельным и воздушно-пылевым путями могут передаваться многие болезни (грипп, корь, дифтерия, коклюш, туберкулез и др.)

Для оценки санитарного состояния воздуха закрытых помещений определяют :
Общее микробное число
Количество санитарно-показательных микроорганизмов, к которым относятся гемолитические стафилококки, α- и β- гемолитические стрептококки
Количество плесневых и дрожжеподобных грибов

СЕДИМЕНТАЦИОННЫЙ МЕТОД КОХА
Метод основан на спонтанном оседании микроорганизмов под действием силы тяжести на поверхности питательной среды открытой чашки Петри.
Чашки помещают в термостат 37°С, 24 часа
Для определения общего микробного числа две чашки Петри со стерильным МПА оставляют открытыми в течение 10-30 минут. Затем их закрывают подписывают и инкубируют в термостате. Затем посевы выдерживают 24 часа при комнатной температуре для выявления плесневых грибов. Через 48 часов подсчитывают суммарное количество колоний, выросших на чашках. Исходят из того, что за 5 мин на поверхность 100 см2 плотной среды оседают бактерии из 10 л воздуха (Омелянский В.Л.)

Для выявления стафилококков используют желточно-солевой агар – экспозиция 15 минут
Для выявления гемолитических стафилококков и стрептококков используют кровяной агар - экспозиция 10-15 минут
Для грибов используют среду Сабуро (посевы выдерживают 3-5 суток при температуре 20-22оС

АСПИРАЦИОННЫЙ МЕТОД
Аппарат Кротова для взятия проб воздуха
Устройство автоматического отбора проб воздуха ПУ-1Б
На площадку прибора устанавливают открытую чашку Петри с питательной средой, закрывают крышкой аппарата и включают мотор. Вращением центробежного вентилятора воздух засасывается через клиновидную щель и с силой ударяется о поверхность питательной среды, на которой оседают микроорганизмы, равномерно распределяясь по ней. Скорость вращения чашки Петри регулируется, что позволяет пропускать разный объем воздуха в минуту, который фиксируется микромонометром. По истечении заданного времени экспозиции выключают мотор, чашку Петри с посевом воздуха снимают, закрывают и ставят в термостат.

Для определения общего микробного числа необходимо использовать МПА, скорость пропускания воздуха через аппарат 25 л/мин с экспозицией 4 мин, что гарантирует оседание микроорганизмов из объема не менее 100 л воздуха;
Для обнаружения золотистого стафилококка используют желточно-солевой агар
Для определения гемолитических стафилококков и стрептококков – 3-5 % кровяной агар, а время экспозиции увеличивают до 10-15 мин, что обеспечивает посев бактерий из 250-300 л воздуха
Посев воздуха проводят в две чашки Петри с МПА или желточно-солевым агаром и выращивают 48 час (24 час в термостате при 37оС, затем выдерживают 24 час при комнатной температуре). Чашки Петри с кровяным агаром инкубируют в термостате при 37оС 24 часа.

Определение общего микробного числа
Микробное число вычисляют по формуле:
а х 1000 Х=
V
А* – количество колоний
V – объем пропущенного через прибор воздуха
1000 – искомый объем воздуха в 1 м3
* Подсчитывают количество колоний в каждой чашке Петри и выводят среднеарифметическое значение

Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздуха помещений лечебных учреждений в зависимости от класса чистоты и их функционального значения (СанПиН 2.1.3.1375-03)