Микробиологическая характеристика возбудителей дифтерии, колюша и паракоклюша

Цель: Изучить микробиологическую характеристику возбудителя дифтерии, коклюша и паракоклюша.

Вопросы, разбираемые на занятии:
1.Микробиологическая характеристика возбудителей дифтерии, коклюша и паракоклюша
2 Методы лабораторной диагностики дифтерии, коклюша и паракоклюша

семейство:Corynebacteriaceae
род:Corynebacterium
вид:C.diphtheria
var. gravis
var. mitis
var. intermedius

Источником инфекции является человек – больной, выздоравливающий или здоровый бактерионоситель.
Заражение происходит воздушно-капельным, воздушно-пылевым путем, через различные предметы, бывшие в употреблении у больных или здоровых бактерионосителей: книги, игрушки, посуда. В случае инфицирования продуктов питания возможен алиментарный путь инфицирования.

Основной фактор вирулентности возбудителя дифтерии – токсин (гистотоксин).
Ферменты вирулентности - гиалуронидаза, нейраминидаза

Механизм действия дифтерийного экзотоксина
Дифтерийный экзотоксин является полипептидом, состоящим из А и В субъединиц. В-субъединица прикрепляется к ганглиозидным рецепторам на клетке-мишени. А-субъединица проникает внутрь клетки-мишени и, являясь ферментом АДФ-рибозил-трансферазой, вызывает АДФ-рибозилирование белкового фактора элонгации EF-2, необходимого для построения полипептидных цепей на рибосомах, что приводит к подавлению синтеза белка на стадии элонгации и гибели клеток в результате некроза.

Клинические формы дифтерийной инфекции
Дифтерия ротоглотки:
- локализованные формы: катаральная, островковая, пленчатая
токсические формы: субтоксическая, токсическая I-III степеней, гипертоксическая
Дифтерия дыхательных путей:
- дифтерия гортани (локализованный круп)
дифтерия гортани, трахеи (распространенный круп)
дифтерия гортани, трахеи, бронхов (нисходящий круп)
Дифтерия носа:
катарально-язвенная
пленчатая

Дифтерия редких локализаций:
- дифтерия слизистой оболочки рта
- дифтерия пищевода
- дифтерия половых органов
- дифтерия кожи (раны)
Комбинированные формы дифтерии.
Дифтерийное бактерионосительство.

Клинические проявления дифтерии
Стертое начало (трудно определить момент начала заболевания)
Субфебрильная температура
Бледность кожных покровов
Выраженная слабость
Отек мягких тканей («бычья шея»)
Боль в горле, затруднение глотания
Увеличение небных миндалин
Гиперемия и отек слизистой глотки
Пленчатый налет (серо-белый), покрывающий небные миндалины, иногда распространяющийся на небные дужки, мягкое небо, боковые стенки глотки, гортань
Увеличение шейных лимфоузлов

Кроме зева, дифтерия может поражать слизистые носа, глаз, раневые поверхности. Токсигенные Corynebacterium diphtheria выделяют токсин, который вызывает отек и некроз слизистых, поражает миокард, периферические нервы (особенно часто языкоглоточный и блуждающий с развитием паралича мягкого неба), почки

Микроскопическое исследование мазка
Окраска по Нейссеру
Окраска по Лефлеру

В основе метода определения токсигенности коринебактерий дифтерии (тест Элека) лежит процесс встречной иммунодиффузии токсина и антитоксических антител в плотной питательной среде. В местах оптимального количественного соотношения между токсином, продуцируемым коринебактериями, и антитоксином, нанесенным на фильтровальную бумагу, происходит их взаимодействие с образованием преципитата в виде белой линии или "усов".

Антитоксические сыворотки получают иммунизацией лошадей возрастающими дозами анатоксинов, а затем и соответствующими токсинами. Сыворотки подвергают очистке и концентрации методом «Диаферм-3»,контролю на безвредность, апирогенность, затем титруют т. е. определяют содержание антитоксинов в 1 мл препарата. Специфическая активность сывороток или количество антител измеряется с помощью специальных методов, основанных на способности сывороток in vitro и in vivo нейтрализовать соответствующие токсины и выражается в международных антитоксических единицах (ME), принятых ВОЗ. За 1 ME принимается то минимальное количество сыворотки, которое способно нейтрализовать определенную дозу токсина, выражающуюся в стандартных единицах.