шигеÐÐÑ‹_Ðаборат_занятия

Шигеллёз (бактериальная дизентерия, shigellosis, dysenteria)
острое антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями рода Shigella с фекально-оральным механизмом передачи, характеризующееся симптомами общей интоксикации и преимущественным поражением дистального отдела толстой кишки
Клинические рекомендации
«Шигеллёз у взрослых»
2014 г.

Классификация
Осуществляется по биохимическим и антигенным (О-антигенам) свойствам шигелл, в соответствии с чем выделяют четыре серогруппы:
Серогруппа A: S. dysenteriae (15 серотипов, из них: S.dysenteriae серотип 1 - шигеллы Григорьева-Шиги (продуцирует Шиги-токсин); S. dysenteriae серотип 2 - шигеллы Штуцера - Шмитца; S. dysenteriae серотип 3-7 - шигеллы Ларджа - Сакса);
Серогруппа B: S. flexneri (8 серотипов, из них: S. flexneri серотип 1-6 - S. newcastle; и 9 подсеротипов)
Серогруппа C: S. boydii (19 серотипов)
Серогруппа D: S. sonnei (серологически однородны)
Группы A-C физиологически подобны; S. sonnei может быть выделена на основании биохимических свойств

Эпидемиология
АНТРОНООЗ
Источником инфекции - больной человек или бактерионоситель
Пути передачи инфекции: для детей раннего возраста— контактно-бытовой, для детей старшего возраста и взрослых — пищевой и водный
Этиологическая избирательность путей инфицирования: при шигеллезе Зонне ведущим является пищевой путь (молоко, молочные продукты), шигеллезе Флекснера - водный, шигеллезе Григорьева–Шиги— контактно-бытовой. Для дизентерии Григорьева-Шиги фактором передачи могут являться насекомые (мухи и тараканы)
Заболеваемость регистрируется в течение всего года с подъемом в летне-осенний период, преимущественно носит спорадический характер, но отмечаются пищевые и водные вспышки
Инфицирующая доза от 2 до 10 клеток

Факторы патогенности
Устойчивы в низким рН
Инфицирует М-клетки кишечника
Длинная цепь полисахаридов предотвращает эффекты сывороточного комплемента
Синтезирует колицины
Эндотоксин
Ферменты патогенности (гиалуронидаза, фибринолизи, лецитиназа)
S.dysenteriae 1 продуцирует Шига-токсин (кодируется хромосомой). Шига-токсин связывается с молекулой глоботриозилцерамида (Gb3), присутствующей на поверхности всех эукариотических клеткок. Блокирует синтез белка, вызывая клеточную смерть. Гемолитико-уремический синдром связан с действием токсина на ткани почек. Шига-токсин показывает нейротоксичные способности (роль в патогенезе до конца не ясна)

Характеристика возбудителя
ГР «-» палочки
НЕподвижны
Спор НЕ образуют
Капсулу НЕ образуют
Факультативные анаэробы
НЕ требовательны к питательным средам

Культуральные свойства
Маленькие, круглые, блестящие колонии
Лактозонегативные

Ферментативные свойства шигелл
«Микробиология», Черкес Ф.К и др, учебник для медицинских училищ, 1987

Лабораторная DS-ка
Исследуемый материал: испражнения, секционный материал, пищевые продукты; сыворотка крови
Методы исследования:
Микроскопический
Микробиологический
Серологический (РА, РНГА, ИФА)
Молекулярно-генетический
Экспресс-методы (ПЦР, РИФ, ИФА)

1-й день исследования
Исследуемый материал засевают на дифференциально-диагностические среды (Плоскирева, Эндо) и среды обогащения (селенитовый бульон)

2-й день исследования
Из селенитового бульона производят посев на дифференциально-диагностические среды
Изучение культуральных свойств. Лактозонегативные колонии засевают на среду Ресселя
Питательная среда Ресселя-ГРМ с индикатором бромтимоловым синим для первичной идентификации энтеробактерий по признаку ферментации лактозы и глюкозы в исследованиях санитарно- клинической микробиологии. При росте микроорганизмов ферментирующих лактозу происходит смещение pH среды в кислую сторону и наблюдается пожелтение скошенной части агара, глюкозы - пожелтение столбика среды. Газообразование сопровождается образованием пузырьков, разрывов, отслоением от стенок. Рост микроорганизмов, не ферментирующих лактозу и глюкозу, сопровождается подщелачиванием, индикатор среды синеет, либо сохраняется исходный зеленый цвет.
S. flexneri - пожелтение столбика и посинение скошенной части

3-й день исследования
Посевы со средой Ресселя анализируют: культуры, не расщепившие лактозу, подвергают дальнейшему изучению: делают мазки, окрашивают по Граму
При наличии грам «-» палочек производят посев на среды Гисса, в МПБ
Определение чувствительности к антибиотикам диско-диффузионным методом
Посев на среде Ресселя

4-й день исследования
Учитывают результаты биохимической активности
Культуры, подозрительные по своим ферментативным и культуральным свойствам подвергают серологической идентификации
Реакция агглютинации с целью идентификации возбудителя с адсорбированными сыворотками

Шига токсин может быть определен на клетках Vero, HeLa или методом ИФА

Схема бактериологического исследования при дизентерии
«Микробиология», Черкес Ф.К и др, учебник для медицинских училищ, 1987

Лечение
Антибиотики (ципрофлоксацин, тетрациклин, ампициллин)

Иммунитет
После перенесенного заболевания развивается непродолжительный (до 6 мес-1 года) видо- и типоспецифический иммунитет