Эффективность применения препаратов с цитостатическим эффектом для профилактики спаечного процесса в брюшной полости

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования.
Спаечная болезнь брюшины остается одним из распространенных хирургических заболеваний живота. По данным Международного общества по изучению спаек послеоперационный спаечный процесс в брюшной полости одним из самых частых осложнений абдоминальных оперативных вмешательств. По поводу спаечной болезни ежегодно в хирургических отделениях оперируется до 1% ранее прооперированных больных, у 50% из которых развивается спаечная кишечная непроходимость с летальностью от 10 до 15%.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучить влияние применения депонированных в полимерном средстве «Мезогель» препаратов с цитостатическим действием и препарата «Мексикор®» на вероятность послеоперационного СПБП в эксперименте.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
1.Оценить в эксперименте in vitro инертность компонентов системы депонированных в противоспаечном «Мезогеле».
2.Оценить в ходе эксперимента in vivo эффективность противоспаечных свойств «Мезогеля» с иммобилизированными в нем цитостатическими препаратами.
3.Оценить в эксперименте на животных противоспаечную эффективность препарата «Мексикор®» на фоне применения цитостатических препаратов, депонированных в «Мезогеле».

Анализ литературных данных
Вне зависимости от используемой техники сохраняются нерешенные вопросы в оперативных приемах проведения любого варианта внутрибрюшной химиотерапии.
Остается актуальным вопрос поиска новых способов системной и локальной химиотерапии, направленного на предупреждение развития и прогрессирования канцероматоза с одномоментной профилактикой спаечной болезни у пациентов онкологического профиля.

В связи с невозможностью определенных классов препаратов, механизм действия которых связан с подавлением роста сосудов в опухолевых тканях, локального ингибирования ангиогенеза в опухолевых тканях определенный интерес представляет изучение возможности коррекции микроциркуляторных нарушений путем применения препарата «Мексикор®» (2-этил-6-метил-3-оксипиридина сукцинат) ООО ЭкоФармИнвест, обладающего антиоксидантной, противоишемической, антигипоксической активностью, а также способностью регулировать метаболические процессы в сердечно-сосудистой системе.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование носило экспериментальный характер и было выполнено на базе кафедре оперативной хирургии и топографической анатомии научно-исследовательского института экологической медицины ГБОУ ВПО Курского государственного медицинского университета Минздрава РФ, и на кафедре высокомолекулярных соединений и коллоидов Воронежского государственного университета.

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Мексикор – (Oxymethylethylpiridine succinate, 2-Этил-6-метил-3-оксипиридина сукцинат). Фармакологическое действие - антиоксидантное, мембраностабилизирующее, ноотропное, церебропротективное, адаптогенное, анксиолитическое.
Цисплатин (Cisplatin, цис-Диаминдихлорплатина) противоопухолевый препарат. Образует поперечные связи одинарной и двойной цепей ДНК, нарушает ее матричную функцию и подавляет биосинтез нуклеиновых кислот, вызывая гибель клетки; влияет на иммунную систему, вызывает регрессию первичных опухолей и метастазов. Содержит тяжелый металл платину.
Циклофосфан (Cyclophosphamide, N,N-бис(2-Хлорэтил)тетрагидро-2H-1,3,2-оксазафосфорин-2-амин-2-оксид). Фармакологическое действие - противоопухолевое (цитостатическое), алкилирующее, иммунодепрессивное.

Экспериментальный блок исследования in vitro
С целью установления возможных изменений физико-химических свойств основного компонента «Мезогеля» - карбоксиметилцеллюлозы - с исследуемыми препаратами (цисплатин, циклофосфан) проведено исследование смесей «Мезогеля» с цитостатиками методами ультрафиолетовой (УФ) и инфракрасной (ИК) спектроскопии. Предварительно регистрировали УФ- и ИК-спектры исследуемых препаратов, а затем их смесей. Проведены 2 серии физико-химических исследований in vitro (таблица 2).

Схема по изучению инертности компонентов смесей эксперимента in vitro

Экспериментальный блок исследования in vivo
Экспериментальный блок исследования был выполнен на 104 белых лабораторных крысах-альбиносах линии Вистар мужского пола массой 250-300 г. Для исследования отбирались животные без внешних признаков заболевания. Животные содержались в одинаковых условиях на стандартном пищевом и питьевом режиме.
Были сформированы шесть групп животных (таблица 3).

Таблица 3

Во всех экспериментальных группах до и после экспериментов у всех животных оценивалось общее состояние по предложенной методике, представленной в таблице 4.

Метод объективной оценки выраженности спаечного процесса брюшной полости представляет собой многофакторную балльную систему, которая учитывает коэффициенты значимости каждого оцениваемого признака и позволяет с применением принципов морфометрии и математического анализа в каждом конкретном случае интегрально оценить выраженность данного патологического явления с высокой дисперсией оценки.

Качества, характеризующие выраженность спаечного процесса в брюшной полости и их коэффициенты весомости

Оценка каждого качества СПБП производилась по пятибалльной шкале

Оценка деформации органов, вовлеченных в СПБП

Оценка выраженности различных видов спаек (оценивается по каждому виду спаек отдельно)

Цифровые данные обрабатывались статистически с целью изучения статистической значимости расхождений средних величин в сравниваемых группах и подгруппах исследований. Эта часть работы выполнена в соответствии со стандарстами ИСО 3534-3-99 и ГОСТ Р 50779.10-2000 ( ИСО 3534-1-93) (Государственный стандарт Ростехрегулирования от 01 сентября 2007 года № ГОСТ Р ИСО 11462-1-2007). После определения показателей описательной статистики (среднее арифметическое, медиана, мода) и обнаружение существенных отклонений от кривой Гауссова распределения нами было принято решение в качестве основной методики определения уровня статистической значимости отличий использовать определение границ доверительного интервала (t) при допустимом для экспериментальных медико-биологических исследований in vivo уровня р ≤ 0,05 [9].

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
Результаты экспериментального исследования in vitro
ИК-спектры: цисплатина(1); Na-КМЦ (2); смеси цисплатин + Na-КМЦ (3).

УФ - спектры: цисплатина (1); смеси цисплатин + КМЦ (2).

ИК-спектр: циклофосфана (1); Na- КМЦ (2); смеси циклофосфан + Na-КМЦ (3).

УФ - спектры: циклофосфана (1) и смеси циклофосфан + Na-КМЦ(2)

Результаты экспериментального исследования in vivo
Выраженность спаечного процесса брюшной полости

Заключение
Выполненные исследования in vitro выявили инертность «Мезогеля» на основе Nа-КМЦ в отношении исследуемых цитостатиков – циклофосфана и цисплатина, а именно отсутствие формирования стойких химических соединений между КМЦ и цитостатиками. Иммобилизация циклофосфана и цисплатина в «Мезогеле» обеспечивает «внутрибрюшинное депо» цитостатика и постепенное высвобождение лекарственного вещества; уменьшается общая токсичность химиопрепарата. Карбоксиметилцеллюлоза препятствует формированию спаечно-опухолевых конгломератов и развитию спаечной кишечной непроходимости.

Выраженность спаечного процесса брюшной полости у животных разных групп на 5 сутки.

Выраженность спаечного процесса брюшной полости у животных разных
групп на 14-е сутки.