Ускоренная культуральная диагностика туберкулеза на жидких средах – технология BD BACTEC™ MGIT™ 960

Методы иследования микобактерий
Микроскопические:
Микроскопия по Циль-Нильсену
Люминесцентная микроскопия
LED микроскопия
Культуральные:
Культуральное выявление микобактерий и определение их лекарственной чувствительности к ПТП 1-го (5 препаратов) и 2-го ряда (9 препаратов) на ЖИДКИХ питательных средах: технология MGIT
Культуральное выявление микобактерий на ПЛОТНЫХ питательных средах (Левенштейна-Йенсена, Финна-2) и определение их лекарственной чувствительности методом абсолютных концентраций
Молекулярно-генетические:
Выявление ДНК МБТ и определение мутаций в генах определяющих лекарственную устойчивость к 1-му или 2-3-м ПТП
ПЦР в режиме реального времени
ПЦР с дальнейшей гибридизацией на биологических микрочипах
ПЦР с дальнейшей гибридизацией на стриповых мембранах
Заявка на микробиологическое исследование
Какой метод назначить?

Классический комплекс исследования микобактерий с определением чувствительности к широкому спектру противотуберкулезных препаратов занимает в среднем 2,5-3 месяца

Комплекс ускоренного исследования микобактерий с определением чувствительности к широкому спектру противотуберкулезных препаратов занимает в среднем 25 дней, соответственно сокращает сроки исследования в 3 раза

В основе методики лежит изобретение индикаторной пробирки MGIT- Mycobacteria Growth Indicator Tube.
В дно пробирки встроен флуоресцентный кислородный датчик
Во время бактериального роста внутри пробирки происходит поглощение О2 и его замещение СО2. По мере расходования О2 прекращается ингибирование флюорохрома. Флюоресценция становится видимой при облучении прбирки УФ и автоматически регистрируется фотодатчиками прибора. Интенсивность свечения регистрируется в единицах роста (CU – growth units)
1 раз в час флуоресцентный сенсор считывает результаты тестирования
Принцип технологии BACTEC MGIT

Методы культурального исследования МБТ

Определение лекарственной чувствительности
Определение ЛЧ МБТ в системе BACTEC MGIT 960 к 5 ПТП 1-го ряда: к изониазиду, рифампицину, этамбутолу, стрептомицину, пиразинамиду; к 10 ПТП 2-го ряда: к амикацину, каприомицину, офлоксацину, левофлоксацину, моксифлоксацину, этионамиду, протионамиду, линезолиду, канамицину, ПАСКу
Определение ЛЧ МБТ методом абсолютных концентраций на среде ЛЙ к 4 ПТП 1-го ряда: к изониазиду, рифампицину, этамбутолу, стрептомицину; к 7 ПТП 2-го ряда: к канамицину, офлоксацину, этионамиду, протионамиду, каприомицину, циклосерину, ПАСКу

Технологический процесс микробиологического исследования
Заявка на
исследование
Преаналитический
этап
Подготовка к
исследованию,
сбор и доставка материала в
лабораторию
Лечащий врач
Аналитический этап
Прием материала,
регистрация
Подготовка реагентов
Проведение
Исследования,
контроль качества
культивирование
идентификация
Опреде-
ление лекарственной
чувствительности
Заключение
Обработка результатов
Передача результатов
Медсестра
Пациент
Постаналитический этап
Клиническая оценка
результатов;
диагностическая
эффективность;
влияние результатов
на качество оказания
мед.помощи
Лаборатория

СТАНДАРТ ОБСЛЕДОВАНИЯ ПАЦИЕНТОВ, СОСТОЯЩИХ НА ДИСПАНСЕРНОМ УЧЕТЕ, МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
(материалы доклада Севастьяновой Э.В., ЦНИИТ , на конференции в Кисловодске 27-28.02)

Виды диагностического материала
Какой материал исследовать?
Мокрота, отделяемое верхних дыхательных путей, полученное после аэрозольных ингаляций, промывные воды бронхов
Все виды материала, получаемого при бронхоскопии
Экссудаты
Отделяемое ран и свищей
Промывные воды желудка (преимущественно у детей)
Спинномозговая жидкость
Операционный материал (без примеси крови)
Не рекомендуется исследовать кровь

Подготовка пациента к исследованию, сбор материала
Как собрать материал?
Сбор МОКРОТЫ проводится в специально оборудованном помещении под контролем медицинского работника, утром, до еды, после тщательного туалета полости рта в стерильные флаконы объемом 50 мл
Прочий материал забирается в специализированных кабинетах (процедурный, бронхоскопический...) в пробирки объемом 50 мл
На флаконе указывается Ф.И.О. пациента
К каждой пробе выписывается направление стандартного образца

Хранение и доставка диагностического материала
Как хранить и доставлять материал?
Собранный диагностический материал необходимо в течении двух часов доставить в бактериологическую лабораторию!
Если это невозможно:
Мокроту и ПБВ можно хранить при t +4-6*C до двух суток
Требовательный к хранению материал (эксудаты, спинномозговая жидкость) может сохраняться при t +4-6*C до 8 часов
Замораживать диагностический материал перед доставкой не рекомендуется, т.к. требуется быстрая заморозка при t -25-30*C и размораживать материал разрешается только 1 раз

Хранение и доставка диагностического материала
Доставляется диагностический материал в сопровождении специально обученного медицинского работника (если это не возможно, необходимо обучить водителя).
В лабораторию диагностический материал доставляется в специальных контейнерах (желательно термоконтейнерах) и штативах
Необходимо иметь 2 контейнера (1 оставляется в лаборатории с пробами, 2-й забирается после дез.обработки)
Помимо направления на всю партию диагностического материала оформляется сопроводительный лист (2 экземпляра)
Сопроводительные документы (направления, сопроводительный лист) доставляются отдельно от проб